| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-8页 |
| 1 绪论 | 第8-18页 |
| ·蜘蛛拖丝 | 第8-11页 |
| ·蜘蛛丝蛋白特性 | 第8-9页 |
| ·卿蛛丝蛋白结构 | 第9-10页 |
| ·蜘蛛丝蛋白的研究现状 | 第10-11页 |
| ·角蛋白 | 第11-12页 |
| ·角蛋白种类 | 第11页 |
| ·角蛋白结构 | 第11-12页 |
| ·角蛋白相关蛋白 | 第12页 |
| ·启动子 | 第12-13页 |
| ·启动子元件 | 第12-13页 |
| ·原核启动子 | 第13页 |
| ·真核启动子 | 第13页 |
| ·基因转染 | 第13-14页 |
| ·生物转染法 | 第13-14页 |
| ·化学转染法 | 第14页 |
| ·物理转染法 | 第14页 |
| ·细胞培养 | 第14-17页 |
| ·细胞培养的条件 | 第14-17页 |
| ·细胞株的建立 | 第17页 |
| ·研究目的意义 | 第17-18页 |
| 2 真核表达载体的构建及检测 | 第18-30页 |
| ·实验材料 | 第18-20页 |
| ·实验菌株 | 第18页 |
| ·载体信息 | 第18-19页 |
| ·实验药品及试剂 | 第19页 |
| ·常用溶液的配置 | 第19-20页 |
| ·实验仪器 | 第20页 |
| ·实验方法 | 第20-26页 |
| ·蜘蛛拖丝蛋白二聚体的获得 | 第20-21页 |
| ·核表达的构建 | 第21-26页 |
| ·结果 | 第26-28页 |
| ·重组质粒Kap6.1-pcDNA3.1的构建与检测 | 第26-27页 |
| ·真核表达载体Kap6.1-pcDNA3.1-2S构建及检测 | 第27-28页 |
| ·讨论 | 第28-29页 |
| ·本章总结 | 第29-30页 |
| 3 转基因绵羊皮肤成纤维细胞株的建立 | 第30-43页 |
| ·实验材料 | 第30-31页 |
| ·实验细胞 | 第30页 |
| ·实验药品及试剂 | 第30页 |
| ·常用溶液的配置 | 第30-31页 |
| ·实验仪器 | 第31页 |
| ·实验方法 | 第31-35页 |
| ·绵羊皮肤成纤维细胞的培养 | 第31-33页 |
| ·最适G418浓度的确定 | 第33页 |
| ·绵羊皮肤成纤维细胞的转染及筛选 | 第33页 |
| ·转基因成纤维细胞株的鉴定 | 第33-35页 |
| ·转基因成纤维细胞的冷冻与复苏 | 第35页 |
| ·结果 | 第35-41页 |
| ·绵羊皮肤成纤维细胞的培养 | 第35-36页 |
| ·最适G418浓度的确定 | 第36-37页 |
| ·绵羊皮肤成纤维细胞的转染及筛选 | 第37-39页 |
| ·筛选后转基因细胞株的鉴定 | 第39-40页 |
| ·冷冻复苏后转基因细胞株的生物学特点 | 第40-41页 |
| ·讨论 | 第41-42页 |
| ·本章总结 | 第42-43页 |
| 4 结论 | 第43-44页 |
| 参考文献 | 第44-48页 |
| 附录 | 第48-49页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第49-50页 |
| 致谢 | 第50-51页 |