| 本论文的创新点 | 第1-10页 |
| 中文摘要 | 第10-14页 |
| Abstract | 第14-18页 |
| 缩略词表 | 第18-20页 |
| 第—章 文献综述 | 第20-39页 |
| 1 植物衰老的研究进展 | 第20-26页 |
| ·植物衰老概述 | 第20页 |
| ·植物叶衰老的特征 | 第20-21页 |
| ·叶衰老的生理学特征 | 第20页 |
| ·叶衰老的细胞学特征 | 第20-21页 |
| ·叶衰老的分子生物学特征 | 第21页 |
| ·植物衰老的影响因素和调控机制 | 第21-26页 |
| ·植物激素 | 第22-24页 |
| ·活性氧(ROS) | 第24-25页 |
| ·糖信号 | 第25页 |
| ·环境因素 | 第25-26页 |
| 2 植物类病变的研究进展 | 第26-33页 |
| ·植物类病变的概述 | 第26-27页 |
| ·植物类病变突变体的发生机理 | 第27页 |
| ·抗病基因的变异或表达改变 | 第27页 |
| ·植物正常代谢途径的紊乱 | 第27页 |
| ·植物类病变的防御反应信号途径 | 第27-30页 |
| ·ROS调控途径 | 第27-29页 |
| ·植物激素调控途径 | 第29-30页 |
| ·水稻类病变基因的鉴定、克隆和功能研究进展 | 第30-33页 |
| 3 UDP-N-乙酰氨基葡萄糖焦磷酸化酶的研究进展 | 第33-37页 |
| ·UDP-N-乙酰氨基葡萄糖简介 | 第33页 |
| ·UDP-N-乙酰氨基葡萄糖的生物学合成途径 | 第33-35页 |
| ·UDP-N-乙酰氨基葡萄糖焦磷酸化酶所在的基因家族介绍 | 第35页 |
| ·UDP-N-乙酰氨基葡萄糖焦磷酸化酶的研究 | 第35-37页 |
| ·UDP-N-乙酰氨基葡萄糖焦磷酸化酶的酶学研究简介 | 第35-36页 |
| ·UDP-N-乙酰氨基葡萄糖焦磷酸化酶的突变体相关研究 | 第36-37页 |
| 4 本研究的目的和意义 | 第37-39页 |
| 第二章 水稻类病变基因SPL29的定位和克隆 | 第39-56页 |
| 1 引言 | 第39-40页 |
| 2 材料与方法 | 第40-45页 |
| ·水稻材料及其培养种植 | 第40页 |
| ·类病变突变体spl29的潮霉素抗性筛选分析 | 第40-41页 |
| ·遗传分析群体的构建、种植和表型观察 | 第41页 |
| ·DNA的提取 | 第41页 |
| ·图位克隆所用的PCR反应及其检测 | 第41页 |
| ·SPL29基因的初步定位 | 第41-42页 |
| ·SPL29基因的精细定位 | 第42-43页 |
| ·精细群体的构建以及取材 | 第42-43页 |
| ·精细定位分子标记的开发 | 第43页 |
| ·精细定位检测 | 第43页 |
| ·SPL29的候选基因的确定 | 第43-44页 |
| ·精细定位区段内的候选基因分析 | 第43页 |
| ·候选基因的点突变在不同的水稻品种和F_2植株中的检测 | 第43-44页 |
| ·SPL29候选基因的互补实验 | 第44-45页 |
| ·功能互补载体的构建 | 第44页 |
| ·转基因互补实验和阳性转基因植株的鉴定 | 第44-45页 |
| 3 结果与分析 | 第45-54页 |
| ·类病变突变体spl29的表型性状变化明显 | 第45-47页 |
| ·类病变突变体spl29产生于体细胞无性系变异 | 第47-49页 |
| ·利用图位克隆的方法克隆了SPL29基因 | 第49-54页 |
| ·类病变突变体spl29的遗传分析 | 第49页 |
| ·SPL29基因的初步定位 | 第49-51页 |
| ·SPL29基因的精细定位 | 第51-52页 |
| ·SPL29的候选基因的确定 | 第52-53页 |
| ·SPL29候选基因的互补验证 | 第53-54页 |
| 4 讨论 | 第54-56页 |
| 第三章 SPL29编码水稻中的UDP-N-乙酰氨基葡萄糖焦磷酸化酶1(UAP1) | 第56-68页 |
| 1 引言 | 第56-57页 |
| 2 材料与方法 | 第57-60页 |
| ·菌株和载体 | 第57页 |
| ·SPL29的生物信息学分析 | 第57页 |
| ·总RNA的提取、DNase处理以及cDNA第一链的合成 | 第57-58页 |
| ·总RNA的提取 | 第57-58页 |
| ·总RNA的DNase消化、再回收与检测 | 第58页 |
| ·cDNA第一链的合成 | 第58页 |
| ·GST、GST-SPL29和GST-spl29蛋白的获得 | 第58-60页 |
| ·GST融合表达载体的构建 | 第58-59页 |
| ·GST、GST-SPL29和GST-spl29的原核诱导表达 | 第59页 |
| ·GST、GST-SPL29和GST-spl29的蛋白纯化 | 第59页 |
| ·GST、GST-SPL29和GST-spl29的蛋白检测和定量 | 第59-60页 |
| ·利用核磁共振(~1H-NMR)方法检测UAP酶学活性 | 第60页 |
| 3 结果与分析 | 第60-66页 |
| ·SPL29可能是一个功能保守的UAP蛋白 | 第60-63页 |
| ·SPL29和spl29的UAP酶学活性分析 | 第63-66页 |
| ·获得了GST、GST-SPL29以及GST-spl29蛋白 | 第63-64页 |
| ·SPL29蛋白执行UAP酶学反应但spl29蛋白丧失了UAP酶学活性 | 第64-66页 |
| 4 讨论 | 第66-68页 |
| 第四章 UAP1突变失活引起水稻叶早衰和防御反应 | 第68-89页 |
| 1 引言 | 第68页 |
| 2 材料与方法 | 第68-75页 |
| ·植物材料及其种植 | 第68-69页 |
| ·叶绿素含量的测定 | 第69页 |
| ·快速叶绿素荧光诱导动力学曲线分析 | 第69-71页 |
| ·透射电子显微镜切片的制作和观察 | 第71页 |
| ·荧光定量PCR | 第71-75页 |
| ·样品RNA和cDNA的准备 | 第71-72页 |
| ·荧光定量引物的设计和扩增效率筛选 | 第72-73页 |
| ·荧光定量PCR操作 | 第73-74页 |
| ·用于叶组织样品的荧光定量PCR分析的内参选择 | 第74-75页 |
| ·白叶枯病菌培养、接种和表型观察 | 第75页 |
| 3 结果与分析 | 第75-86页 |
| ·叶绿素含量的下降在生理水平上支持spl29的叶早衰 | 第75-76页 |
| ·光系统Ⅱ性能的下降是支持spl29叶早衰的又一个生理证据 | 第76-79页 |
| ·叶绿体的降解在细胞水平上支持spl29的叶早衰 | 第79-81页 |
| ·衰老相关转录因子、衰老相关基因以及光合系统相关基因的表达变化为spl29的叶早衰提供了分子证据 | 第81-84页 |
| ·突变体spl29的白叶枯病抗性增强,同时防御反应相关基因的表达上调 | 第84-86页 |
| 4 讨论 | 第86-89页 |
| 第五章 活性氧和植物激素可能在spl29的叶早衰和防御反应途径中发挥着重要的作用 | 第89-99页 |
| 1 引言 | 第89页 |
| 2 材料与方法 | 第89-92页 |
| ·植物材料的培养和取材 | 第89-90页 |
| ·活性氧(ROS)的组织染色检测 | 第90页 |
| ·蛋白质的提取 | 第90页 |
| ·丙二醛(MDA)含量的测定 | 第90-91页 |
| ·超氧化物歧化酶(SOD)的酶活性测定 | 第91页 |
| ·过氧化氢酶(CAT)的酶活性测定 | 第91-92页 |
| ·茉莉酸(JA)和脱落酸(ABA)的测定 | 第92页 |
| 3 结果与分析 | 第92-96页 |
| ·ROS在spl29中积累 | 第92-93页 |
| ·MDA在spl29中积累 | 第93-95页 |
| ·SOD酶活性在spl29中上升但CAT酶活性正常 | 第95页 |
| ·JA和ABA在spl29中积累 | 第95-96页 |
| 4 讨论 | 第96-99页 |
| 第六章 总讨论 | 第99-105页 |
| 参考文献 | 第105-124页 |
| 攻博期间发表及投稿的科研成果 | 第124-125页 |
| 致谢 | 第125-126页 |
