致谢 | 第1-9页 |
摘要 | 第9-10页 |
Abstract | 第10-12页 |
引言 | 第12-13页 |
第一章 文献综述 | 第13-20页 |
·木质素的概述 | 第13-14页 |
·木质素的自然组成 | 第13页 |
·木质素降解的研究 | 第13页 |
·木质素降解酶系的研究 | 第13-14页 |
·白腐菌的研究 | 第14-15页 |
·黄孢原毛平革菌合成木质素降解酶营养调控 | 第14-15页 |
·黄孢原毛平革菌产漆酶情况研究 | 第15页 |
·锰过氧化物酶的研究 | 第15-18页 |
·锰过氧化物酶的基本性质 | 第15-16页 |
·锰过氧化物酶的锰结合位点与功能 | 第16页 |
·锰过氧化物酶分子水平的研究 | 第16-17页 |
·锰过氧化物酶基因的表达 | 第17页 |
·锰过氧化物酶酶活测定 | 第17-18页 |
·锰过氧化物酶的应用 | 第18页 |
·毕赤酵母表达系统的优越性 | 第18页 |
·本研究目的和意义 | 第18-20页 |
第二章 锰过氧化物酶(MnP)基因的克隆 | 第20-34页 |
·试验材料 | 第20-21页 |
·质粒与菌种 | 第20页 |
·试验仪器 | 第20页 |
·试剂 | 第20页 |
·培养基配制 | 第20页 |
·溶液配制 | 第20-21页 |
·试验方法 | 第21-25页 |
·锰过氧化物酶 DNA 提取 | 第21-22页 |
·锰过氧化物酶基因的克隆 | 第22-25页 |
·结果与分析 | 第25-32页 |
·黄孢原毛平革菌基因组 DNA 提取 | 第25页 |
·PCR 扩增目的基因并回收 | 第25-26页 |
·蓝白斑鉴定 | 第26页 |
·重组质粒的鉴定 | 第26-32页 |
·讨论 | 第32-33页 |
·小结 | 第33-34页 |
第三章 锰过氧化物酶(MnP)基因与表达载体连接 | 第34-40页 |
·试验材料 | 第34页 |
·质粒与菌种 | 第34页 |
·试验仪器 | 第34页 |
·酶与试剂 | 第34页 |
·培养基配制 | 第34页 |
·溶液配制 | 第34页 |
·试验方法 | 第34-37页 |
·目的基因的回收 | 第34-35页 |
·真核表达载体 pGAPZαA 回收 | 第35-36页 |
·目的基因与表达载体 pGAPZαA 连接 | 第36页 |
·连接产物转化大肠杆菌 DH5α | 第36页 |
·重组质粒提取 | 第36页 |
·重组质粒鉴定 | 第36-37页 |
·结果与分析 | 第37-38页 |
·讨论 | 第38-39页 |
·小结 | 第39-40页 |
第四章 重组载体电击转化酵母 | 第40-47页 |
·试验材料 | 第40-41页 |
·试验仪器 | 第40页 |
·菌株 | 第40页 |
·酶与试剂 | 第40页 |
·培养基配制 | 第40页 |
·试剂配制 | 第40-41页 |
·试验方法 | 第41-44页 |
·重组 pGAPZαA-MnP 质粒线性化 | 第41-42页 |
·毕赤酵母感受态细胞的制备 | 第42页 |
·重组质粒电击转化毕赤酵母 | 第42页 |
·重组酵母鉴定 | 第42-44页 |
·结果与分析 | 第44-45页 |
·讨论 | 第45-46页 |
·小结 | 第46-47页 |
第五章 转锰过氧化物酶酵母产酶特性与降解木质素能力分析 | 第47-53页 |
·试验材料 | 第47页 |
·试验仪器 | 第47页 |
·菌种 | 第47页 |
·培养基配制 | 第47页 |
·溶液配制 | 第47页 |
·试验方法 | 第47-48页 |
·酶性分析 | 第47-48页 |
·木质素降解率的测定 | 第48页 |
·统计分析 | 第48页 |
·结果与分析 | 第48-51页 |
·测定酶活结果 | 第48-49页 |
·温度对酶性影响分析 | 第49页 |
·不同 pH 的粗酶液的酶活 | 第49-50页 |
·木质素降解率分析 | 第50-51页 |
·讨论 | 第51-52页 |
·小结 | 第52-53页 |
全文小结 | 第53-54页 |
本文创新 | 第54-55页 |
参考文献 | 第55-60页 |