| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-5页 |
| 目录 | 第5-7页 |
| 第一章 绪论 | 第7-16页 |
| ·引言 | 第7页 |
| ·SNARE 结构性质及生理作用 | 第7-10页 |
| ·SNARE 蛋白结构 | 第7-8页 |
| ·SNARE 介导的膜融合机制 | 第8-10页 |
| ·SNARE 复合体装配的调控 | 第10页 |
| ·SNARE 蛋白在神经递质释放中的功能 | 第10-12页 |
| ·syntaxin-1 蛋白简介 | 第11-12页 |
| ·酵母中的 SNARE 系统 | 第12-14页 |
| ·酵母中 SNARE 复合物的结构 | 第13页 |
| ·孢子形成过程中涉及的 SNARE 蛋白 | 第13-14页 |
| ·利用酵母研究突触 SNARE 的可行性 | 第14页 |
| ·本课题立题意义和主要内容 | 第14-16页 |
| 第二章 材料和方法 | 第16-27页 |
| ·实验材料 | 第16-21页 |
| ·菌株与质粒 | 第16-18页 |
| ·引物 | 第18-19页 |
| ·试剂 | 第19-20页 |
| ·仪器和设备 | 第20页 |
| ·培养基 | 第20-21页 |
| ·溶液的配置 | 第21页 |
| ·实验方法 | 第21-27页 |
| ·基因敲除 | 第21-22页 |
| ·酿酒酵母基因组的提取 | 第22-23页 |
| ·嵌合基因的获得 | 第23-24页 |
| ·高效感受态细胞的制备 | 第24页 |
| ·质粒构建 | 第24-25页 |
| ·质粒转化酿酒酵母细胞 | 第25-26页 |
| ·产孢分析 | 第26页 |
| ·PrM 的观察 | 第26页 |
| ·营养生长分析 | 第26-27页 |
| 第三章 结果与讨论 | 第27-37页 |
| ·在酵母中构建人源化的 syntaxin | 第27-30页 |
| ·sso1 菌株的构建 | 第27页 |
| ·Sso1 与 syntaxin-1A 的重组蛋白不能使酵母产孢 | 第27-28页 |
| ·用 Sso1 与 sytx 1A 的重组蛋白定位 Sso1 产孢功能区 | 第28-29页 |
| ·A220 为重组蛋白无产孢功能的原因 | 第29-30页 |
| ·在酵母中构建人源化的 SNAP-25 | 第30-33页 |
| ·spo20 菌株的构建 | 第31页 |
| ·用 Spo20 与 SNAP-25 的重组蛋白定位 Spo20 产孢功能区 | 第31-33页 |
| ·对 Sso1 的进一步研究 | 第33-37页 |
| ·Sso1 功能的实现需要 E218 | 第33页 |
| ·Sso1 第 218 位电负性并非其功能必须 | 第33-34页 |
| ·sso1 sso2 菌株的构建 | 第34-35页 |
| ·酵母营养细胞中验证 E218 的作用 | 第35-36页 |
| ·过量表达 Sec1 不能回补重组蛋白的产孢缺陷 | 第36-37页 |
| 主要结论与展望 | 第37-38页 |
| 主要结论 | 第37页 |
| 展望 | 第37-38页 |
| 致谢 | 第38-39页 |
| 参考文献 | 第39-43页 |
| 附录:作者在攻读硕士学位期间发表的论文 | 第43页 |