| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-6页 |
| 目录 | 第6-9页 |
| 第一章 绪论 | 第9-19页 |
| ·木聚糖概述 | 第9页 |
| ·木聚糖酶 | 第9-10页 |
| ·木聚糖酶简介 | 第9-10页 |
| ·木聚糖酶的催化机理 | 第10页 |
| ·木聚糖酶的分类 | 第10页 |
| ·木聚糖酶的研究进展 | 第10-15页 |
| ·11家族木聚糖酶的主要结构特征 | 第10-11页 |
| ·11家族木聚糖酶的酶学性质 | 第11-12页 |
| ·11家族木聚糖酶的热稳定性研究 | 第12-15页 |
| ·木聚糖酶的应用 | 第15-17页 |
| ·造纸工业 | 第15页 |
| ·饲料工业 | 第15-16页 |
| ·纺织工业 | 第16页 |
| ·食品工业 | 第16页 |
| ·木聚糖酶降解产物的应用 | 第16-17页 |
| ·能源工业 | 第17页 |
| ·本课题立题意义与研究内容 | 第17-19页 |
| ·立题意义 | 第17-18页 |
| ·研究内容 | 第18-19页 |
| 第二章 材料与方法 | 第19-34页 |
| ·实验材料 | 第19-22页 |
| ·菌种与载体 | 第19页 |
| ·工具酶与试剂 | 第19页 |
| ·主要仪器设备 | 第19-20页 |
| ·主要软件和网站 | 第20页 |
| ·PCR引物 | 第20页 |
| ·培养基 | 第20-21页 |
| ·常用溶液的配置 | 第21-22页 |
| ·AoXyn11A氨基端引入氢键和二硫键的实验方法 | 第22-32页 |
| ·氨基酸序列的比对和分析 | 第22-23页 |
| ·同源建模和分子动力学模拟 | 第23页 |
| ·突变酶基因的构建 | 第23-25页 |
| ·感受态 E. coli JM109 的制备 | 第25页 |
| ·重组克隆质粒的连接与转化 | 第25-26页 |
| ·重组子的鉴定筛选和保存测序 | 第26页 |
| ·碱法提取质粒 | 第26-27页 |
| ·重组质粒的双酶切 | 第27页 |
| ·重组质粒的连接、转化、筛选和鉴定 | 第27-28页 |
| ·重组表达质粒线性化和纯化回收 | 第28-29页 |
| ·感受态 P. pastoris GS115 的制备 | 第29页 |
| ·电击转化感受态 P. pastoris GS115 酵母 | 第29-30页 |
| ·重组酵母的筛选和诱导表达 | 第30页 |
| ·诱导表达产物分析鉴定 | 第30-31页 |
| ·酶学性质分析 | 第31-32页 |
| ·AoXyn11A氨基端引入咪唑环的实验方法 | 第32-34页 |
| ·氨基酸序列的比对和分析 | 第32页 |
| ·突变酶基因 AoXyn11AN9H序列的构建 | 第32-33页 |
| ·构建重组克隆质粒pUCm-T-AoXyn11AN9H | 第33页 |
| ·构建重组表达质粒pPIC9K-AoXyn11AN9H | 第33页 |
| ·对 P. pastoris GS115 的转化、筛选和诱导表达 | 第33页 |
| ·诱导表达产物的鉴定与分析 | 第33页 |
| ·酶学性质分析 | 第33-34页 |
| 第三章 结果与讨论 | 第34-50页 |
| ·氢键和二硫键对AoXyn11A热稳定性的影响 | 第34-43页 |
| ·氨基酸序列比对、同源建模和动力学模拟 | 第34-35页 |
| ·突变木聚糖酶基因的扩增 | 第35-36页 |
| ·重组克隆质粒的构建 | 第36-37页 |
| ·重组表达质粒的构建 | 第37-38页 |
| ·诱导表达产物鉴定 | 第38-39页 |
| ·酶学性质鉴定 | 第39-41页 |
| ·突变对酶三维结构和热稳定性的影响 | 第41-43页 |
| ·进一步的推论 | 第43页 |
| ·组氨酸对AoXyn11A热稳定性的影响 | 第43-50页 |
| ·氨基酸序列比对和同源建模 | 第43-44页 |
| ·杂合木聚糖酶基因的构建 | 第44-45页 |
| ·构建重组克隆质粒 | 第45页 |
| ·构建重组表达质粒 | 第45页 |
| ·对 P. pastoris GS115 的转化、筛选和诱导表达 | 第45-46页 |
| ·诱导表达产物鉴定 | 第46-47页 |
| ·酶学性质鉴定 | 第47-49页 |
| ·突变对酶热稳定性的影响 | 第49-50页 |
| 主要结论与展望 | 第50-52页 |
| 主要结论 | 第50页 |
| 展望 | 第50-52页 |
| 致谢 | 第52-53页 |
| 参考文献 | 第53-57页 |
| 附录:作者在攻读硕士学位期间发表的论文 | 第57页 |