| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-6页 |
| 目录 | 第6-8页 |
| 第一章 绪论 | 第8-15页 |
| ·L-天冬酰胺酶概述 | 第8页 |
| ·L-天冬酰胺酶 | 第8页 |
| ·L-天冬酰胺酶来源 | 第8页 |
| ·L-天冬酰胺酶应用 | 第8-11页 |
| ·L-天冬酰胺酶结构 | 第8-9页 |
| ·L-天冬酰胺酶催化机理 | 第9页 |
| ·L-天冬酰胺酶在医药上的应用 | 第9-10页 |
| ·L-天冬酰胺酶在食品上的应用 | 第10-11页 |
| ·L-天冬酰胺酶研究现状 | 第11-14页 |
| ·国外研究现状 | 第11-12页 |
| ·国内研究现状 | 第12-13页 |
| ·L-天冬酰胺酶的酶学性质研究 | 第13-14页 |
| ·本课题立题意义与主要研究内容 | 第14-15页 |
| ·立题意义 | 第14页 |
| ·主要研究内容 | 第14-15页 |
| 第二章 材料与方法 | 第15-24页 |
| ·实验材料 | 第15-18页 |
| ·主要试剂 | 第15页 |
| ·主要实验仪器 | 第15-16页 |
| ·菌株与质粒 | 第16页 |
| ·引物设计 | 第16页 |
| ·培养基及培养条件 | 第16-17页 |
| ·相关试剂的配制 | 第17-18页 |
| ·实验方法 | 第18-24页 |
| ·B. subtilis B11-06 染色体组的提取 | 第18页 |
| ·E. coli感受态细胞的制备 | 第18页 |
| ·B. subtilis B11-06 ansZ基因的克隆 | 第18-19页 |
| ·PCR产物与克隆载体pMD18-T连接 | 第19页 |
| ·重组质粒pMA5-ansZ的构建 | 第19页 |
| ·重组L-天冬酰胺酶的表达 | 第19页 |
| ·L-天冬酰胺酶酶活的测定 | 第19页 |
| ·重组菌B. subtilis 168/pMA5-ansZ产酶发酵优化 | 第19-21页 |
| ·重组L-天冬酰胺酶酶学性质研究 | 第21-22页 |
| ·N端融合多肽提高L-天冬酰胺酶稳定性 | 第22-24页 |
| 第三章 结果和讨论 | 第24-48页 |
| ·重组菌B. subtilis 168/pMA5-ansZ的构建与表达 | 第24-27页 |
| ·B. subtilis B11-06 L-天冬酰胺酶基因(ansZ)的克隆与分析 | 第24页 |
| ·重组质粒 pMA5-ansZ的构建与转化 | 第24-26页 |
| ·重组蛋白的表达与SDS-PAGE分析 | 第26页 |
| ·重组菌L-天冬酰胺酶酶活测定 | 第26-27页 |
| ·重组菌B. subtilis 168/pMA5-ansZ发酵培养基与培养条件的优化 | 第27-37页 |
| ·重组菌B. subtilis 168/pMA5-ansZ摇瓶水平培养基优化 | 第27-34页 |
| ·重组菌B. subtilis 168/pMA5-ansZ摇瓶水平发酵条件优化 | 第34-36页 |
| ·重组菌B. subtilis 168/pMA5-ansZ 5L发酵罐发酵产酶研究 | 第36-37页 |
| ·重组L-天冬酰胺酶酶学性质研究 | 第37-42页 |
| ·重组L-天冬酰胺酶的纯化 | 第37-38页 |
| ·重组L-天冬酰胺酶的最适反应pH及最适反应温度 | 第38页 |
| ·重组L-天冬酰胺酶的pH稳定性及热稳定性 | 第38-39页 |
| ·金属离子及EDTA对重组酶酶活的影响 | 第39页 |
| ·重组L-天冬酰胺酶的动力学常数 | 第39-40页 |
| ·重组L-天冬酰胺酶的食品应用初步研究 | 第40-42页 |
| ·L-天冬酰胺酶N端融合多肽 | 第42-48页 |
| ·重组菌E. coli BL21/pET-22b(+)-OP-ansZ的构建 | 第42页 |
| ·多肽融合L-天冬酰胺酶的纯化 | 第42-44页 |
| ·多肽融合L-天冬酰胺酶酶学性质研究 | 第44-45页 |
| ·多肽融合L-天冬酰胺酶的结构模拟与分析 | 第45-48页 |
| 主要结论与展望 | 第48-49页 |
| 主要结论 | 第48页 |
| 展望 | 第48-49页 |
| 致谢 | 第49-50页 |
| 参考文献 | 第50-55页 |
| 附录 : 作者在攻读硕士学位期间发表的论文 | 第55页 |
