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喹赛多对C2C12肌管基因与蛋白表达的影响研究

摘要第1-11页
Abstract第11-14页
縮略语表第14-15页
1 前言第15-21页
   ·喹赛多促生长作用研究概况第15-16页
   ·骨骼肌生长相关研究进展第16-18页
     ·骨骼肌的生长特性第16页
     ·出生后动物体肌纤维的生长机制研究概况第16-17页
     ·出生后肌肉内转录与蛋白质周转的调控第17-18页
   ·研究思路第18-19页
   ·研究内容与目标第19-21页
2 材料方法第21-38页
   ·细胞株第21页
   ·主要试剂第21-23页
   ·主要仪器第23-24页
   ·主要试剂的配制第24-25页
   ·细胞培养及冻存第25-26页
   ·免疫荧光染色法测定C2C12细胞分化阶段第26-27页
   ·C2C12肌管敏感药物作用浓度与时间的筛选第27-30页
     ·BCA法测定喹赛多作用的C2C12肌管总蛋白浓度第27-28页
     ·喹赛多作用C2C12肌管MyHC基因表达量变化的测定第28-30页
   ·C2C12肌管表达谱基因芯片检测第30-32页
     ·总RNA的提取和纯化第31页
     ·cDNA合成与aRNA的制备第31页
     ·aRNA纯化和片段化第31页
     ·芯片杂交第31页
     ·芯片洗染扫描第31-32页
     ·数据处理第32页
     ·实时荧光定量PCR验证部分差异基因表达第32页
   ·双向电泳技术检测及质谱鉴定喹赛多作用C2C12肌管差异蛋白第32-37页
     ·细胞处理及分组第33页
     ·细胞总蛋白的制备第33页
     ·蛋白质定量第33页
     ·一相等点聚焦(IEF)第33-34页
     ·二相SDS-PAGE电泳第34-35页
     ·图像扫描及分析第35页
     ·质谱鉴定第35-36页
     ·Western Blot方法验证差异蛋白结果第36-37页
   ·数据处理第37-38页
3 结果及分析第38-58页
   ·C2C12细胞增殖与分化时期形态学第38页
   ·C2C12细胞不同分化阶段MyHC蛋白表达差异第38-39页
   ·喹赛多最佳作用时间和浓度的确定第39-43页
     ·喹赛多对C2C12肌管总蛋白积累的影响第39-41页
     ·喹赛多对C2C12肌管MyHC基因转录水平的影响第41-43页
   ·喹赛多作用C2C12肌管差异基因的检测(基因芯片)第43-51页
     ·总RNA质量第43页
     ·喹赛多作用后差异表达基因的分析第43-50页
     ·基因芯片中重点关注基因mRNA表达水平的验证第50-51页
   ·喹赛多作用C2C12肌管的差异蛋白的检测与鉴定(双向电泳-质谱)第51-58页
     ·蛋白样品定量检测第51-52页
     ·喹赛多作用C2C12肌管总蛋白双向电泳图谱及分析第52-53页
     ·喹赛多作用C2C12肌管差异蛋白点的鉴定第53-57页
     ·Western blot验证双向电泳结果第57-58页
4 讨论第58-70页
   ·喹赛多作用C2C12肌管差异基因功能分析第58-62页
     ·蛋白质合成和修饰相关基因第58-59页
     ·转录调控相关基因第59-60页
     ·细胞生长相关基因第60-61页
     ·物质代谢与生物合成相关基因第61页
     ·基因层面喹赛多作用机制小结第61-62页
   ·喹赛多作用肌管差异蛋白功能分析第62-66页
     ·细胞骨架蛋白第62页
     ·热休克蛋白第62-63页
     ·外来凝集素第63页
     ·代谢相关蛋白第63-64页
     ·氧化应激相关蛋白第64-66页
     ·蛋白层面喹赛多作用机制小结第66页
   ·喹赛多功能基因与功能蛋白之间的关系第66-67页
   ·喹赛多促进C2C12肌管生长的分子机制第67-70页
5 全文总结第70-71页
6 文献综述:基因组学和蛋白质组学研究技术概述第71-85页
   ·基因组学研究技术概述第71-77页
     ·结构基因组学的研究技术概述第71-74页
     ·功能基因组学的研究技术概述第74-77页
   ·蛋白质组学的研究技术概述第77-84页
     ·蛋白质分离技术第78-79页
     ·蛋白质鉴定技术第79-81页
     ·蛋白质的定量技术第81页
     ·蛋白质结构解析技术第81页
     ·蛋白质相互作用研究技术第81-84页
   ·展望第84-85页
参考文献第85-98页
致谢第98-99页
附录第99-108页

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