摘要 | 第1-11页 |
Abstract | 第11-14页 |
縮略语表 | 第14-15页 |
1 前言 | 第15-21页 |
·喹赛多促生长作用研究概况 | 第15-16页 |
·骨骼肌生长相关研究进展 | 第16-18页 |
·骨骼肌的生长特性 | 第16页 |
·出生后动物体肌纤维的生长机制研究概况 | 第16-17页 |
·出生后肌肉内转录与蛋白质周转的调控 | 第17-18页 |
·研究思路 | 第18-19页 |
·研究内容与目标 | 第19-21页 |
2 材料方法 | 第21-38页 |
·细胞株 | 第21页 |
·主要试剂 | 第21-23页 |
·主要仪器 | 第23-24页 |
·主要试剂的配制 | 第24-25页 |
·细胞培养及冻存 | 第25-26页 |
·免疫荧光染色法测定C2C12细胞分化阶段 | 第26-27页 |
·C2C12肌管敏感药物作用浓度与时间的筛选 | 第27-30页 |
·BCA法测定喹赛多作用的C2C12肌管总蛋白浓度 | 第27-28页 |
·喹赛多作用C2C12肌管MyHC基因表达量变化的测定 | 第28-30页 |
·C2C12肌管表达谱基因芯片检测 | 第30-32页 |
·总RNA的提取和纯化 | 第31页 |
·cDNA合成与aRNA的制备 | 第31页 |
·aRNA纯化和片段化 | 第31页 |
·芯片杂交 | 第31页 |
·芯片洗染扫描 | 第31-32页 |
·数据处理 | 第32页 |
·实时荧光定量PCR验证部分差异基因表达 | 第32页 |
·双向电泳技术检测及质谱鉴定喹赛多作用C2C12肌管差异蛋白 | 第32-37页 |
·细胞处理及分组 | 第33页 |
·细胞总蛋白的制备 | 第33页 |
·蛋白质定量 | 第33页 |
·一相等点聚焦(IEF) | 第33-34页 |
·二相SDS-PAGE电泳 | 第34-35页 |
·图像扫描及分析 | 第35页 |
·质谱鉴定 | 第35-36页 |
·Western Blot方法验证差异蛋白结果 | 第36-37页 |
·数据处理 | 第37-38页 |
3 结果及分析 | 第38-58页 |
·C2C12细胞增殖与分化时期形态学 | 第38页 |
·C2C12细胞不同分化阶段MyHC蛋白表达差异 | 第38-39页 |
·喹赛多最佳作用时间和浓度的确定 | 第39-43页 |
·喹赛多对C2C12肌管总蛋白积累的影响 | 第39-41页 |
·喹赛多对C2C12肌管MyHC基因转录水平的影响 | 第41-43页 |
·喹赛多作用C2C12肌管差异基因的检测(基因芯片) | 第43-51页 |
·总RNA质量 | 第43页 |
·喹赛多作用后差异表达基因的分析 | 第43-50页 |
·基因芯片中重点关注基因mRNA表达水平的验证 | 第50-51页 |
·喹赛多作用C2C12肌管的差异蛋白的检测与鉴定(双向电泳-质谱) | 第51-58页 |
·蛋白样品定量检测 | 第51-52页 |
·喹赛多作用C2C12肌管总蛋白双向电泳图谱及分析 | 第52-53页 |
·喹赛多作用C2C12肌管差异蛋白点的鉴定 | 第53-57页 |
·Western blot验证双向电泳结果 | 第57-58页 |
4 讨论 | 第58-70页 |
·喹赛多作用C2C12肌管差异基因功能分析 | 第58-62页 |
·蛋白质合成和修饰相关基因 | 第58-59页 |
·转录调控相关基因 | 第59-60页 |
·细胞生长相关基因 | 第60-61页 |
·物质代谢与生物合成相关基因 | 第61页 |
·基因层面喹赛多作用机制小结 | 第61-62页 |
·喹赛多作用肌管差异蛋白功能分析 | 第62-66页 |
·细胞骨架蛋白 | 第62页 |
·热休克蛋白 | 第62-63页 |
·外来凝集素 | 第63页 |
·代谢相关蛋白 | 第63-64页 |
·氧化应激相关蛋白 | 第64-66页 |
·蛋白层面喹赛多作用机制小结 | 第66页 |
·喹赛多功能基因与功能蛋白之间的关系 | 第66-67页 |
·喹赛多促进C2C12肌管生长的分子机制 | 第67-70页 |
5 全文总结 | 第70-71页 |
6 文献综述:基因组学和蛋白质组学研究技术概述 | 第71-85页 |
·基因组学研究技术概述 | 第71-77页 |
·结构基因组学的研究技术概述 | 第71-74页 |
·功能基因组学的研究技术概述 | 第74-77页 |
·蛋白质组学的研究技术概述 | 第77-84页 |
·蛋白质分离技术 | 第78-79页 |
·蛋白质鉴定技术 | 第79-81页 |
·蛋白质的定量技术 | 第81页 |
·蛋白质结构解析技术 | 第81页 |
·蛋白质相互作用研究技术 | 第81-84页 |
·展望 | 第84-85页 |
参考文献 | 第85-98页 |
致谢 | 第98-99页 |
附录 | 第99-108页 |