| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 缩略语表 | 第8-9页 |
| 1 前言 | 第9-16页 |
| ·MiRNA | 第9页 |
| ·MiRNA的转录调控与生物加工 | 第9-10页 |
| ·MiRNA的作用机制 | 第10-13页 |
| ·翻译起始抑制 | 第11页 |
| ·翻译起始后抑制 | 第11-12页 |
| ·介导mRNA衰减 | 第12页 |
| ·正调控和去抑制 | 第12-13页 |
| ·MiRNA与疾病 | 第13-14页 |
| ·MiRNA与炎症 | 第13-14页 |
| ·MiRNA与脂肪分化 | 第14页 |
| ·研究的目的和意义 | 第14-16页 |
| 2 材料与方法 | 第16-36页 |
| ·实验材料 | 第16页 |
| ·实验细胞 | 第16页 |
| ·实验菌株 | 第16页 |
| ·实验质粒 | 第16页 |
| ·实验试剂 | 第16-19页 |
| ·主要实验试剂 | 第16-17页 |
| ·主要溶液的配置 | 第17-18页 |
| ·主要实验仪器 | 第18-19页 |
| ·分子生物学相关软件 | 第19页 |
| ·实验方法 | 第19-31页 |
| ·细胞基因组DNA的制备 | 第19-21页 |
| ·小鼠miR-130a/b启动子序列扩增及双荧光真核报告表达载体构建 | 第21-24页 |
| ·DNA电泳检测PCR产物及回收纯化 | 第24-25页 |
| ·DNA片段的克隆与测序 | 第25-26页 |
| ·质粒的大量提取 | 第26-28页 |
| ·细胞的瞬时转染 | 第28页 |
| ·细胞总RNA提取、纯化和反转录 | 第28-30页 |
| ·实时定量PCR | 第30-31页 |
| ·双荧光素酶报告系统检测 | 第31-33页 |
| ·试剂准备 | 第32页 |
| ·细胞裂解 | 第32页 |
| ·被动裂解 | 第32页 |
| ·检测样品 | 第32-33页 |
| ·染色质免疫共沉淀 | 第33-35页 |
| ·数据统计分析 | 第35-36页 |
| 3 结果与分析 | 第36-52页 |
| ·miR-130a/b对3T3-L1前体脂肪细胞成脂分化的影响 | 第36页 |
| ·小鼠miR-130a/b对SP1和TNF α表达的影响 | 第36-37页 |
| ·LPS处理对小鼠miR-130a/b的表达影响 | 第37-38页 |
| ·小鼠miR-130a/b启动子克隆与转录因子结合位点预测 | 第38-42页 |
| ·转录因子对小鼠miR-130a/b启动子活性影响 | 第42-43页 |
| ·小鼠miR-130a/b启动子全长及截短活性分析 | 第43-45页 |
| ·C/EBP α对小鼠miR-130a/b启动子活性的调节 | 第45-47页 |
| ·MiR-130a/b启动子上受C/EBP α调节的关键位点分析 | 第47-49页 |
| ·C/EBP α与miR-130a/b启动子的特异性结合 | 第49-50页 |
| ·BHK21细胞中C/EBPα对miR-130a和miR-130b的表达量影响 | 第50-52页 |
| 4 讨论 | 第52-54页 |
| 5 结论与创新点 | 第54-56页 |
| ·结论 | 第54-55页 |
| ·创新点 | 第55-56页 |
| 参考文献 | 第56-62页 |
| 致谢 | 第62页 |
