| 摘要 | 第1-9页 |
| Abstract | 第9-11页 |
| 缩略语表（Abbreviation) | 第11-13页 |
| 1 文献综述 | 第13-24页 |
| ·PRRSV概况 | 第13页 |
| ·PRRSV病原学特性 | 第13-16页 |
| ·PRRSV分类 | 第13-14页 |
| ·抗原性 | 第14-15页 |
| ·临床特性 | 第15页 |
| ·生物学特性 | 第15-16页 |
| ·分子生物学研究进展 | 第16-19页 |
| ·PRRSV基因组结构 | 第16页 |
| ·PRRSV非结构蛋白质 | 第16-17页 |
| ·PRRSV结构蛋白质 | 第17-18页 |
| ·PRRSV基因遗传变异和抗原性变异 | 第18-19页 |
| ·PRRSV毒力变异 | 第19页 |
| ·PRRSV的免疫学研究进展 | 第19-20页 |
| ·体液免疫 | 第19-20页 |
| ·细胞免疫 | 第20页 |
| ·PRRS诊断方法研究进展 | 第20-22页 |
| ·血清学诊断方法 | 第20-21页 |
| ·间接免疫荧光实验(IFA) | 第21页 |
| ·免疫过氧化物酶单层试验(IPMA) | 第21页 |
| ·血清中和试验(SNT) | 第21页 |
| ·酶联免疫吸附试验(ELISA) | 第21页 |
| ·分子生物学诊断方法 | 第21-22页 |
| ·PRRSV分离鉴定 | 第21-22页 |
| ·PRRSV核酸检测 | 第22页 |
| ·PRRS疫苗研究进展 | 第22-24页 |
| ·PRRS常规疫苗 | 第22-23页 |
| ·灭活苗 | 第22-23页 |
| ·弱毒活疫苗 | 第23页 |
| ·PRRS新型疫苗 | 第23-24页 |
| ·核酸疫苗 | 第23页 |
| ·亚单位疫苗 | 第23页 |
| ·活病毒载体疫苗 | 第23-24页 |
| 2 研究目的和意义 | 第24-25页 |
| 3 材料与方法 | 第25-33页 |
| ·试验材料 | 第25-26页 |
| ·毒株和细胞 | 第25页 |
| ·病料、疫苗和实验动物 | 第25页 |
| ·工具酶和主要试剂 | 第25页 |
| ·相关试剂及其配制 | 第25-26页 |
| ·引物设计与合成 | 第26页 |
| ·分子生物学软件 | 第26页 |
| ·实验方法 | 第26-33页 |
| ·病料采集与处理 | 第26-27页 |
| ·血清或组织样品总RNA的提取 | 第27页 |
| ·两步法RT-PCR | 第27-28页 |
| ·PCR产物或酶切产物的回收与纯化 | 第28页 |
| ·回收后DNA片段与质粒载体的连接反应 | 第28页 |
| ·连接产物的转化 | 第28页 |
| ·质粒的小量提取 | 第28-29页 |
| ·重组质粒的酶切鉴定 | 第29页 |
| ·测序 | 第29页 |
| ·动物实验 | 第29页 |
| ·PRRSV W-UH3的增殖 | 第29-30页 |
| ·半数细胞培养物感染量(TCID_(50))的测定 | 第30页 |
| ·微量中和试验(固定病毒-稀释血清法) | 第30页 |
| ·IFN-γ的检测 | 第30页 |
| ·PRRSV抗体检测 | 第30-31页 |
| ·绝对荧光定量检测病毒血症及病毒载量 | 第31-32页 |
| ·病理切片制作 | 第32页 |
| ·统计学方法 | 第32-33页 |
| 4 结果与分析 | 第33-52页 |
| ·PRRSV遗传变异分析 | 第33-39页 |
| ·PRRSV流行毒株NSP2、ORF5基因的扩增及重组质粒的鉴定 | 第33页 |
| ·HZ-31的检测与分离 | 第33-34页 |
| ·流行毒株NSP2序列分析 | 第34-35页 |
| ·流行毒株ORF5序列分析 | 第35-39页 |
| ·PRRSV HZ-31序列分析 | 第39-44页 |
| ·PRRSV HZ-31全基因组分段RT-PCR扩增结果 | 第39-40页 |
| ·PRRSV HZ-31全基因组序列分析 | 第40页 |
| ·PRRSV HZ-31序列分析 | 第40-44页 |
| ·HZ-31株毒力相关氨基酸的变异分析 | 第44页 |
| ·PRRS弱毒疫苗的免疫效果评价 | 第44-52页 |
| ·临床症状观察 | 第45-46页 |
| ·血清中PRRSV ELISA抗体水平 | 第46页 |
| ·血清中PRRSV中和抗体水平 | 第46-47页 |
| ·血清中IFN-γ水平 | 第47页 |
| ·病毒血症 | 第47-48页 |
| ·鼻拭子、粪拭子排毒情况 | 第48页 |
| ·剖检、病理观察 | 第48-51页 |
| ·组织病毒载量 | 第51-52页 |
| 5 讨论与结论 | 第52-56页 |
| ·讨论 | 第52-55页 |
| ·NSP2蛋白的变异分析 | 第52页 |
| ·ORF5蛋白的变异分析 | 第52-53页 |
| ·HZ-31全基因组序列分析 | 第53页 |
| ·PRRS活疫苗免疫效果评价 | 第53-55页 |
| ·结论 | 第55-56页 |
| 参考文献 | 第56-64页 |
| 致谢 | 第64页 |
