| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-8页 |
| 目录 | 第8-11页 |
| 1 前言 | 第11-33页 |
| ·非生物胁迫与植物的适应性 | 第11-12页 |
| ·植物在非生物胁迫下的信号传递 | 第12-18页 |
| ·胁迫信号的感应 | 第12-13页 |
| ·ABA与信号传递 | 第13-14页 |
| ·Ca2+与信号传递 | 第14-16页 |
| ·活性氧与信号传递 | 第16-18页 |
| ·非生物逆境下基因的表达调控 | 第18-21页 |
| ·依赖于ABA的基因表达调控 | 第19-20页 |
| ·不依赖于ABA的基因表达调控 | 第20-21页 |
| ·锌指蛋白的研究进展 | 第21-23页 |
| ·锌指蛋白及类型 | 第21页 |
| ·锌指蛋白的作用方式 | 第21-22页 |
| ·抗逆相关锌指蛋白 | 第22-23页 |
| ·A20/AN1锌指蛋白研究进展 | 第23-29页 |
| ·A20/AN1锌指蛋白的分类 | 第23-24页 |
| ·动物中的A20/AN1锌指蛋白 | 第24-25页 |
| ·植物中A20/AN1锌指蛋白的研究 | 第25-27页 |
| ·植物中A20/AN1锌指蛋白作用机制的探索 | 第27-29页 |
| ·甘蔗生产与非生物胁迫 | 第29-31页 |
| ·甘蔗简介 | 第29页 |
| ·非生物胁迫对甘蔗生产的影响 | 第29-30页 |
| ·甘蔗抗逆育种展望 | 第30-31页 |
| ·研究目的和内容 | 第31-32页 |
| ·技术路线 | 第32-33页 |
| 2 材料与方法 | 第33-56页 |
| ·材料 | 第33-38页 |
| ·植物材料 | 第33页 |
| ·载体与菌株 | 第33页 |
| ·酶及其他试剂 | 第33-34页 |
| ·仪器 | 第34-35页 |
| ·引物 | 第35-38页 |
| ·方法 | 第38-56页 |
| ·ShSAP1的生物信息学与系统发育树分析 | 第38页 |
| ·ShSAP1基因组全长的分离与基因结构分析 | 第38页 |
| ·ShSAP1上游调控序列的扩增与顺式作用元件分析 | 第38-41页 |
| ·ShSAP1的表达分析 | 第41-42页 |
| ·ShSAP1的原核表达与多克隆抗体的制备 | 第42-44页 |
| ·ShSAP1的亚细胞定位分析 | 第44-46页 |
| ·ShSAP1转化烟草的研究 | 第46-48页 |
| ·转基因烟草的抗旱性和抗盐性分析 | 第48-51页 |
| ·干旱胁迫后ShSAPl转基因烟草抗逆相关基因的表达分析 | 第51-52页 |
| ·甘蔗ShSAP1 RNAi载体的构建及甘蔗的遗传转化 | 第52-54页 |
| ·pDI-ShSAP1遗传转化甘蔗 | 第54页 |
| ·甘蔗RNAi转化植株与pDI-ShSAP1转化植株中ShSAP1的表达分析 | 第54-55页 |
| ·甘蔗RNAi转化植株与pDI-ShSAP1转化植株的表型分析 | 第55页 |
| ·ShSAP1在甘蔗中沉默和增强表达对甘蔗抗逆性的影响 | 第55-56页 |
| 3 结果与分析 | 第56-98页 |
| ·ShSAP1的生物信息学与系统发育树分析 | 第56-59页 |
| ·ShSAP1的生物信息学分析 | 第56-57页 |
| ·ShSAP1的系统发育树分析 | 第57-59页 |
| ·ShSAP1基因组全长的分离与基因结构分析 | 第59-60页 |
| ·ShSAP1的5'端上游调控序列的克隆与分析 | 第60-65页 |
| ·染色体步移法扩增ShSAP1 5'端上游调控序列 | 第60-61页 |
| ·ShSAP1上游序列测序结果分析 | 第61-62页 |
| ·ShSAP1上游序列的核心启动子区域和转录起始位点预测 | 第62页 |
| ·ShSAP1调控序列的顺式作用元件分析 | 第62-65页 |
| ·ShSAP1的表达分析 | 第65-68页 |
| ·ShSAP1在甘蔗不同部位中的表达分析 | 第65-66页 |
| ·ShSAP1在甘蔗不同逆境下的表达分析 | 第66-68页 |
| ·ShSAP1的原核表达与多克隆抗体的制备 | 第68-71页 |
| ·ShSAP1的原核表达的构建 | 第68页 |
| ·ShSAP1的小量表达与表达模式的确定 | 第68-69页 |
| ·ShSAP1的大量表达及纯化 | 第69-70页 |
| ·ShSAP1抗血清的效价测定 | 第70-71页 |
| ·ShSAP1的亚细胞定位分析 | 第71-74页 |
| ·ShSAP1-GFP在洋葱表皮细胞中的定位 | 第71-72页 |
| ·ShSAP1-GFP-GUS在洋葱表皮和原生质体中的定位 | 第72-74页 |
| ·pDI-ShSAP1转化烟草 | 第74-78页 |
| ·T0代ShSAP1转基因烟草的获得 | 第74-75页 |
| ·ShSAP1转基因烟草的PCR检测 | 第75-76页 |
| ·ShSAP1转基因烟草的southern blotting检测 | 第76页 |
| ·ShSAP1转基因烟草的RT-PCR检测 | 第76-77页 |
| ·ShSAP1转基因烟草的Western blotting检测 | 第77页 |
| ·T2代转ShSAP1基因烟草纯合系的获得 | 第77-78页 |
| ·转基因烟草的抗旱性和抗盐性分析 | 第78-85页 |
| ·萌发时期的抗旱性和抗盐性分析 | 第78-79页 |
| ·幼苗时期的抗旱性和抗盐性分析 | 第79-82页 |
| ·ShSAP1转基因烟草株系在成苗时期的抗旱性分析 | 第82-85页 |
| ·干旱胁迫后ShSAP1转基因植株抗逆相关基因的表达分析 | 第85-87页 |
| ·甘蔗ShSAP1的RNAi载体构建及对甘蔗的转化 | 第87-91页 |
| ·ShSAP1锌指区域的扩增 | 第87页 |
| ·中间载体pTCK-iShSAP1的构建 | 第87-88页 |
| ·RNAi植物表达载体pCAMBIA-iShSAP1的构建 | 第88-89页 |
| ·农杆菌介导的甘蔗遗传转化和PPT抗性筛选 | 第89-90页 |
| ·甘蔗RNAi转化植株的DNA提取和PCR鉴定 | 第90-91页 |
| ·pDI-ShSAP1甘蔗转化植株的PCR鉴定 | 第91-92页 |
| ·甘蔗RNAi转化植株与pDI-ShSAP1转化植株的表达分析 | 第92-93页 |
| ·甘蔗RNAi转化植株与pDI-ShSAP1转化植株的田间表型分析 | 第93-94页 |
| ·ShSAP1部分沉默和增强表达对甘蔗抗旱性和抗盐性的影响 | 第94-98页 |
| 4 讨论 | 第98-102页 |
| ·ShSAP1是逆境相关蛋白家族的成员 | 第98页 |
| ·ShSAP1与甘蔗的成熟、糖分累积和逆境应答有关 | 第98-99页 |
| ·ShSAP1可能通过蛋白间的相互作用来行使功能 | 第99-100页 |
| ·ShSAP1的表达可以提高转基因烟草的抗旱和抗盐能力 | 第100页 |
| ·ShSAP1可以提高转基因烟草中多个抗逆相关基因的表达 | 第100-101页 |
| ·ShSAP1在甘蔗中增强表达对甘蔗光合能力和抗逆性具有促进作用 | 第101-102页 |
| 5 结论 | 第102-104页 |
| 参考文献 | 第104-118页 |
| 后记 | 第118-119页 |
| 致谢 | 第119页 |
