盐角草热激蛋白90(SeHSP90)基因的克隆、表达及耐盐性分析
| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-9页 |
| 图表清单 | 第9-10页 |
| 1文献综述 | 第10-19页 |
| ·HSP及其耐盐性研究进展 | 第10-13页 |
| ·HSP的耐盐性研究背景 | 第10页 |
| ·HSP的研究进程 | 第10-11页 |
| ·HSP的诱导合成及分布 | 第11页 |
| ·HSP的种类 | 第11页 |
| ·植物 HSP基因在盐胁迫中的表达调控 | 第11-13页 |
| ·HSP90的研究进展 | 第13-19页 |
| ·HSP90的研究背景 | 第13-14页 |
| ·HSP90的结构特征 | 第14-15页 |
| ·HSP90参与了植物的生长发育 | 第15-16页 |
| ·HSP90介导了植物抗性响应过程 | 第16-18页 |
| ·植物 HSP90的研究意义 | 第18-19页 |
| 2 引言 | 第19-21页 |
| ·研究意义与目的 | 第19页 |
| ·研究内容和技术路线 | 第19-21页 |
| ·研究内容 | 第19-20页 |
| ·技术路线 | 第20-21页 |
| 3 材料与方法 | 第21-34页 |
| ·试验材料 | 第21页 |
| ·仪器与试剂 | 第21-23页 |
| ·主要实验仪器 | 第21页 |
| ·主要试剂 | 第21-22页 |
| ·自配溶液 | 第22页 |
| ·引物合成与测序 | 第22-23页 |
| ·试验方法 | 第23-34页 |
| ·盐角草总RNA提取和检测 | 第23-24页 |
| ·盐角草cDNA的合成 | 第24-25页 |
| ·盐角草Se HSP90基因片段的获得 | 第25-27页 |
| ·Se HSP90基因的3’和5’-RACE扩增 | 第27-30页 |
| ·序列拼接及生物信息学分析 | 第30-31页 |
| ·原核表达载体的构建 | 第31-32页 |
| ·SeHSP90蛋白的诱导表达 | 第32-33页 |
| ·重组菌耐盐性测定 | 第33-34页 |
| 4 结果分析 | 第34-47页 |
| ·盐角草总RNA的提取与检测 | 第34页 |
| ·总RNA的提取 | 第34页 |
| ·提取RNA的纯度检测 | 第34页 |
| ·SeHSP90基因全长序列的获得 | 第34-36页 |
| ·SeHSP90基因中间片段的获得 | 第34页 |
| ·SeHSP90基因3’和5’末端序列的获得 | 第34-35页 |
| ·序列拼接及开放阅读框架获得 | 第35-36页 |
| ·序列的生物信息学分析 | 第36-41页 |
| ·SeHSP90基因编码蛋白特征 | 第36页 |
| ·疏水性分析及跨膜结构预测 | 第36-37页 |
| ·磷酸化位点分析 | 第37-38页 |
| ·亚细胞定位分析 | 第38页 |
| ·SeHSP90蛋白的氨基酸序列特征及同源分析 | 第38-41页 |
| ·SeHSP90载体的构 建32 | 第41-42页 |
| ·克隆载体的构建 | 第41页 |
| ·表达载体的构建 | 第41-42页 |
| ·SeHSP90基因的原核表达 | 第42-47页 |
| ·SeHSP90蛋白的诱导表达 | 第42-43页 |
| ·IPTG浓度的优化 | 第43-45页 |
| ·盐角草SeHSP90基因耐盐性鉴定 | 第45-47页 |
| 5 讨论 | 第47-49页 |
| ·SeHSP90的全长克隆和序列分析 | 第47页 |
| ·SeHSP90氨基酸序列的生物信息学分析 | 第47页 |
| ·SeHSP90基因的原核表达和优化 | 第47-48页 |
| ·原核表达菌株的选择 | 第47-48页 |
| ·IPTG浓度的优化 | 第48页 |
| ·SeHSP90基因的耐盐性分析 | 第48-49页 |
| 6 结论 | 第49-50页 |
| 参考文献 | 第50-56页 |
| 附录A 中英文缩写与注释 | 第56-58页 |
| 致谢 | 第58-59页 |
| 作者简介 | 第59页 |
| 在读期间发表的学术论文清单 | 第59页 |