| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-11页 |
| 缩略语表(Abbreviation) | 第11-12页 |
| 1 前言 | 第12-16页 |
| ·地黄概述 | 第12页 |
| ·地黄中基因克隆及植物 ARGOS 基因概述 | 第12-14页 |
| ·研究目的和意义 | 第14-16页 |
| 2 材料与方法 | 第16-34页 |
| ·材料 | 第16-20页 |
| ·植物材料 | 第16页 |
| ·引物 | 第16页 |
| ·菌株和载体 | 第16页 |
| ·主要仪器设备 | 第16-18页 |
| ·主要试剂及药品 | 第18-19页 |
| ·常用溶液配方 | 第19-20页 |
| ·方法 | 第20-34页 |
| ·总 RNA 的提取 | 第20页 |
| ·总 RNA 的检测 | 第20页 |
| ·cDNA 第一链的制备（按试剂盒说明书） | 第20-21页 |
| ·基于 ARGOS 基因保守区序列克隆怀地黄基因 | 第21-22页 |
| ·3′-RACE | 第22-25页 |
| ·5′-RACE | 第25-27页 |
| ·地黄 RgKAT 和 RghBNG 基因的 ORF 扩增 | 第27页 |
| ·地黄 RgVP、RgKAT 和 RghBNG 基因的序列分析 | 第27-28页 |
| ·地黄 RgKAT 和 RghBNG 基因的组织特异表达分析 | 第28-29页 |
| ·地黄 RgKAT 和 RghBNG 基因的原核表达分析 | 第29-34页 |
| 3 结果与分析 | 第34-56页 |
| ·地黄 RgVP、RgKAT 和 RghBNG 基因序列的克隆 | 第34-38页 |
| ·总 RNA 的提取 | 第34页 |
| ·地黄 RgVP、RgKAT 和 RghBNG 基因序列保守区片段的克隆 | 第34-35页 |
| ·地黄 RgVP、RgKAT 和 RghBNG 基因 3′-RACE 反应 | 第35-36页 |
| ·地黄 RgVP、RgKAT 和 RghBNG 基因 5′-RACE 反应 | 第36-37页 |
| ·地黄 RgKAT 和 RghBNG 基因 ORF 反应 | 第37-38页 |
| ·地黄 RgVP、RgKAT 和 RghBNG 基因的生物信息学分析 | 第38-50页 |
| ·地黄 RgVP、RgKAT 和 RghBNG 基因 cDNA 序列分析 | 第38-41页 |
| ·地黄 RgKAT 和 RghBNG 蛋白多序列比对与系统进化树分析 | 第41-45页 |
| ·地黄 RgKAT 和 RghBNG 蛋白序列分析 | 第45-50页 |
| ·地黄 RgKAT 和 RghBNG 基因的组织特异表达分析 | 第50-52页 |
| ·地黄不同营养组织的 RNA 提取 | 第50页 |
| ·实时定量 RT-PCR | 第50-52页 |
| ·地黄 RgKAT 和 RghBNG 基因的原核表达分析 | 第52-56页 |
| ·地黄 RgKAT 和 RghBNG 基因与克隆载体连接后的双酶切鉴定 | 第52页 |
| ·地黄 RgKAT 和 RghBNG 基因与表达载体连接后的双酶切鉴定与测序 | 第52-54页 |
| ·地黄 RgKAT 和 RghBNG 基因的诱导表达 | 第54-56页 |
| 4 讨论 | 第56-64页 |
| ·地黄 RgVP、RgKAT、RghBNG 基因的克隆与生物信息学分析 | 第56-60页 |
| ·地黄 RgVP、RgKAT、RghBNG 基因的克隆 | 第56-58页 |
| ·地黄 RgVP、RgKAT、RghBNG 基因的生物信息学分析 | 第58-60页 |
| ·地黄 RgKAT、RghBNG 基因的实时定量 RT-PCR 分析 | 第60-61页 |
| ·地黄 RgKAT 基因的实时定量 RT-PCR 分析 | 第60-61页 |
| ·地黄 RghBNG 基因的实时定量 RT-PCR 分析 | 第61页 |
| ·地黄 RgKAT、RghBNG 基因的原核表达分析 | 第61-64页 |
| ·地黄 RgKAT 基因的原核表达分析 | 第62页 |
| ·地黄 RghBNG 基因的原核表达分析 | 第62-64页 |
| 5 结论 | 第64-66页 |
| 参考文献 | 第66-72页 |
| 致谢 | 第72-73页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第73-74页 |
