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转录因子FOXM1在肿瘤细胞上皮间质转化过程中的功能研究

摘要第1-7页
Abstract第7-14页
第1章 绪论第14-26页
   ·癌症第14-15页
     ·癌症概述第14页
     ·癌症的转移第14-15页
   ·上皮间质转化第15-20页
     ·上皮间质转化概述第15-16页
     ·上皮间质转化的功能第16-18页
     ·调控肿瘤上皮间质转化的分子机制第18-20页
   ·转录因子第20-24页
   ·本论文的工作设想第24-26页
第2章 FOXM1 的表达水平与肿瘤上皮间质特性相关第26-36页
   ·前言第26页
   ·实验部分第26-27页
     ·实验材料第26页
     ·实验试剂第26-27页
     ·实验仪器第27页
   ·实验方法第27-31页
     ·细胞株培养、冻存与复苏第27-28页
     ·Transwell 实验第28页
     ·蛋白免疫印迹检测实验方法第28-29页
     ·细胞免疫荧光染色第29页
     ·荧光定量 PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)第29-30页
     ·数据分析第30-31页
   ·结果与讨论第31-35页
     ·FOXM1 在乳腺癌间质细胞中高表达第31-33页
     ·FOXM1 在肺癌间质细胞中高表达第33-34页
     ·FOXM1 是临床肺转移癌潜在的标志物第34-35页
   ·小结第35-36页
第3章 FOXM1 影响 TGF-Β诱导的 EMT 过程第36-42页
   ·前言第36页
   ·实验部分第36-37页
     ·实验材料第36页
     ·实验试剂第36-37页
     ·实验仪器第37页
   ·实验方法第37-38页
     ·细胞培养第37页
     ·TGF-β诱导细胞发生第37页
     ·Western Blot 实验第37-38页
     ·半定量 PCR第38页
     ·Transwell 实验第38页
     ·干扰 RNA 转染实验第38页
     ·数据分析第38页
   ·结果与讨论第38-41页
     ·TGF-β诱导后 FOXM1 表达水平升高第38-40页
     ·TGF-β诱导后干扰 FOXM1 的表达部分阻止了 EMT 的发生第40-41页
   ·小结第41-42页
第4章 FOXM1 影响肿瘤细胞的上皮间质特性第42-56页
   ·前言第42页
   ·实验部分第42-43页
     ·实验材料第42页
     ·实验试剂第42-43页
     ·实验仪器第43页
   ·实验方法第43-46页
     ·细胞培养第43页
     ·慢病毒的构建第43-46页
     ·质粒共转染实验第46页
     ·稳定表达 FOXM1 的细胞株和对照细胞株的构建第46页
     ·Western Blot 实验第46页
     ·Transwell 实验第46页
     ·干扰 RNA 转染实验第46页
     ·数据分析第46页
   ·结果与讨论第46-55页
     ·FOXM1 的缺失导致细胞由间质向上皮转变第46-49页
     ·稳定表达 FOXM1 促使肿瘤上皮型细胞向间质型细胞转化第49-55页
   ·小结第55-56页
第5章 FOXM1 通过调节 SLUG 或 TWIST 的转录水平来促进肿瘤 EMT 的发生第56-72页
   ·前言第56页
   ·实验部分第56-57页
     ·实验材料第56页
     ·实验试剂第56-57页
     ·实验仪器第57页
   ·实验方法第57-63页
     ·细胞培养第57页
     ·Western Blot 实验第57页
     ·半定量 PCR第57页
     ·Transwell 实验第57-58页
     ·干扰 RNA 转染实验第58页
     ·转录因子启动子的序列分析第58页
     ·免疫共沉淀实验(Chip)第58-60页
     ·荧光定量 PCR 检测 ChIP 实验结果第60页
     ·基因组 DNA 提取第60页
     ·启动子克隆第60-62页
     ·共转染实验第62页
     ·荧光素酶活性测定第62-63页
   ·结果与讨论第63-71页
     ·FOXM1 通过调控 Slug 基因来促进乳腺癌的上皮间质转化第63-68页
     ·FOXM1 通过调控 Twist 基因来促进肺癌的上皮间质转化第68-71页
   ·小结第71-72页
第6章 过表达 FOXM1 导致肿瘤在体内发生转移第72-78页
   ·前言第72页
   ·实验部分第72-73页
     ·实验材料第72页
     ·实验试剂第72页
     ·实验仪器第72-73页
   ·实验方法第73-74页
   ·结果与讨论第74-77页
   ·小结第77-78页
结论第78-80页
参考文献第80-93页
附录 A 攻读学位期间所发表的学术论文目录第93-94页
附录 B 常用缓冲液和试剂配方第94-95页
致谢第95页

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