摘要 | 第1-7页 |
Abstract | 第7-14页 |
第1章 绪论 | 第14-26页 |
·癌症 | 第14-15页 |
·癌症概述 | 第14页 |
·癌症的转移 | 第14-15页 |
·上皮间质转化 | 第15-20页 |
·上皮间质转化概述 | 第15-16页 |
·上皮间质转化的功能 | 第16-18页 |
·调控肿瘤上皮间质转化的分子机制 | 第18-20页 |
·转录因子 | 第20-24页 |
·本论文的工作设想 | 第24-26页 |
第2章 FOXM1 的表达水平与肿瘤上皮间质特性相关 | 第26-36页 |
·前言 | 第26页 |
·实验部分 | 第26-27页 |
·实验材料 | 第26页 |
·实验试剂 | 第26-27页 |
·实验仪器 | 第27页 |
·实验方法 | 第27-31页 |
·细胞株培养、冻存与复苏 | 第27-28页 |
·Transwell 实验 | 第28页 |
·蛋白免疫印迹检测实验方法 | 第28-29页 |
·细胞免疫荧光染色 | 第29页 |
·荧光定量 PCR(quantitative real-time PCR,qPCR) | 第29-30页 |
·数据分析 | 第30-31页 |
·结果与讨论 | 第31-35页 |
·FOXM1 在乳腺癌间质细胞中高表达 | 第31-33页 |
·FOXM1 在肺癌间质细胞中高表达 | 第33-34页 |
·FOXM1 是临床肺转移癌潜在的标志物 | 第34-35页 |
·小结 | 第35-36页 |
第3章 FOXM1 影响 TGF-Β诱导的 EMT 过程 | 第36-42页 |
·前言 | 第36页 |
·实验部分 | 第36-37页 |
·实验材料 | 第36页 |
·实验试剂 | 第36-37页 |
·实验仪器 | 第37页 |
·实验方法 | 第37-38页 |
·细胞培养 | 第37页 |
·TGF-β诱导细胞发生 | 第37页 |
·Western Blot 实验 | 第37-38页 |
·半定量 PCR | 第38页 |
·Transwell 实验 | 第38页 |
·干扰 RNA 转染实验 | 第38页 |
·数据分析 | 第38页 |
·结果与讨论 | 第38-41页 |
·TGF-β诱导后 FOXM1 表达水平升高 | 第38-40页 |
·TGF-β诱导后干扰 FOXM1 的表达部分阻止了 EMT 的发生 | 第40-41页 |
·小结 | 第41-42页 |
第4章 FOXM1 影响肿瘤细胞的上皮间质特性 | 第42-56页 |
·前言 | 第42页 |
·实验部分 | 第42-43页 |
·实验材料 | 第42页 |
·实验试剂 | 第42-43页 |
·实验仪器 | 第43页 |
·实验方法 | 第43-46页 |
·细胞培养 | 第43页 |
·慢病毒的构建 | 第43-46页 |
·质粒共转染实验 | 第46页 |
·稳定表达 FOXM1 的细胞株和对照细胞株的构建 | 第46页 |
·Western Blot 实验 | 第46页 |
·Transwell 实验 | 第46页 |
·干扰 RNA 转染实验 | 第46页 |
·数据分析 | 第46页 |
·结果与讨论 | 第46-55页 |
·FOXM1 的缺失导致细胞由间质向上皮转变 | 第46-49页 |
·稳定表达 FOXM1 促使肿瘤上皮型细胞向间质型细胞转化 | 第49-55页 |
·小结 | 第55-56页 |
第5章 FOXM1 通过调节 SLUG 或 TWIST 的转录水平来促进肿瘤 EMT 的发生 | 第56-72页 |
·前言 | 第56页 |
·实验部分 | 第56-57页 |
·实验材料 | 第56页 |
·实验试剂 | 第56-57页 |
·实验仪器 | 第57页 |
·实验方法 | 第57-63页 |
·细胞培养 | 第57页 |
·Western Blot 实验 | 第57页 |
·半定量 PCR | 第57页 |
·Transwell 实验 | 第57-58页 |
·干扰 RNA 转染实验 | 第58页 |
·转录因子启动子的序列分析 | 第58页 |
·免疫共沉淀实验(Chip) | 第58-60页 |
·荧光定量 PCR 检测 ChIP 实验结果 | 第60页 |
·基因组 DNA 提取 | 第60页 |
·启动子克隆 | 第60-62页 |
·共转染实验 | 第62页 |
·荧光素酶活性测定 | 第62-63页 |
·结果与讨论 | 第63-71页 |
·FOXM1 通过调控 Slug 基因来促进乳腺癌的上皮间质转化 | 第63-68页 |
·FOXM1 通过调控 Twist 基因来促进肺癌的上皮间质转化 | 第68-71页 |
·小结 | 第71-72页 |
第6章 过表达 FOXM1 导致肿瘤在体内发生转移 | 第72-78页 |
·前言 | 第72页 |
·实验部分 | 第72-73页 |
·实验材料 | 第72页 |
·实验试剂 | 第72页 |
·实验仪器 | 第72-73页 |
·实验方法 | 第73-74页 |
·结果与讨论 | 第74-77页 |
·小结 | 第77-78页 |
结论 | 第78-80页 |
参考文献 | 第80-93页 |
附录 A 攻读学位期间所发表的学术论文目录 | 第93-94页 |
附录 B 常用缓冲液和试剂配方 | 第94-95页 |
致谢 | 第95页 |