| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-9页 |
| 英文缩写 | 第9-14页 |
| 第1章 绪论 | 第14-27页 |
| ·癌症简述 | 第14-15页 |
| ·基因治疗 | 第15-17页 |
| ·基因治疗的概念 | 第15页 |
| ·基因治疗的分类 | 第15-16页 |
| ·基因治疗的发展现状 | 第16-17页 |
| ·腺病毒载体 | 第17-21页 |
| ·腺病毒载体简介 | 第17-20页 |
| ·腺病毒载体在肿瘤基因治疗中的应用 | 第20-21页 |
| ·转录因子 FOXM1 | 第21-25页 |
| ·FOXM1 基因介绍 | 第21页 |
| ·FOXM1 的生物学功能 | 第21-23页 |
| ·FOXM1 与肿瘤 | 第23-25页 |
| ·本文构思及研究内容 | 第25-27页 |
| 第2章 FOXM1 在肿瘤组织和细胞中的表达水平检测 | 第27-39页 |
| ·实验材料 | 第28-29页 |
| ·临床样本 | 第28页 |
| ·细胞 | 第28页 |
| ·抗体与主要试剂 | 第28-29页 |
| ·主要实验仪器 | 第29页 |
| ·实验方法 | 第29-34页 |
| ·细胞培养 | 第29页 |
| ·免疫组织化学染色实验 | 第29-30页 |
| ·WESTERN BLOTTING | 第30-32页 |
| ·实时荧光定量 PCR 实验 | 第32-34页 |
| ·数据分析 | 第34页 |
| ·结果与讨论 | 第34-38页 |
| ·FOXM1 在癌组织中的蛋白表达水平检测 | 第34-36页 |
| ·FOXM1 在肿瘤细胞中的表达水平检测 | 第36-38页 |
| ·小结 | 第38-39页 |
| 第3章 重组腺病毒 ADFOXM1SHRNA 的制备及检测 | 第39-50页 |
| ·实验材料 | 第40页 |
| ·细胞培养 | 第40页 |
| ·主要试剂 | 第40页 |
| ·主要实验仪器 | 第40页 |
| ·实验方法 | 第40-44页 |
| ·重组腺病毒的大量制备 | 第40-41页 |
| ·重组腺病毒的纯化 | 第41-42页 |
| ·A260 紫外吸收法测病毒颗粒数 | 第42页 |
| ·TCID50 法检测病毒滴度 | 第42-43页 |
| ·RCA 检测 | 第43-44页 |
| ·病毒感染实验 | 第44页 |
| ·X-GAL 染色实验 | 第44页 |
| ·WESTERN BLOTTING | 第44页 |
| ·数据分析 | 第44页 |
| ·结果与讨论 | 第44-48页 |
| ·重组腺病毒 ADFOXM1SHRNA 的质量检测 | 第44-46页 |
| ·重组腺病毒 ADLACZ 在肿瘤细胞中的感染效率 | 第46-47页 |
| ·重组腺病毒 ADFOXM1SHRNA 在细胞中对 FOXM1 的干扰效果 | 第47-48页 |
| ·小结 | 第48-50页 |
| 第4章 FOXM1 对肿瘤细胞增殖的影响 | 第50-60页 |
| ·实验材料 | 第50-51页 |
| ·主要试剂 | 第50-51页 |
| ·主要实验仪器 | 第51页 |
| ·实验方法 | 第51-53页 |
| ·脂质体转染实验 | 第51页 |
| ·半定量 RT-PCR | 第51-52页 |
| ·细胞计数 | 第52页 |
| ·Annexin V-FITC 凋亡试剂盒检测细胞凋亡 | 第52-53页 |
| ·流式检验细胞周期 | 第53页 |
| ·数据分析 | 第53页 |
| ·结果与讨论 | 第53-59页 |
| ·干扰 FOXM1 的表达降低了细胞周期相关基因的表达水平 | 第53-55页 |
| ·AdFOXM1shRNA 能有效抑制肿瘤细胞的增殖 | 第55-56页 |
| ·FOXM1 的缺失对细胞凋亡的影响 | 第56-58页 |
| ·FOXM1 的缺失对细胞周期的影响 | 第58-59页 |
| ·小结 | 第59-60页 |
| 第5章 ADFOXM1SHRNA 对肿瘤发生的影响 | 第60-66页 |
| ·实验材料 | 第60-61页 |
| ·实验动物 | 第60页 |
| ·主要试剂 | 第60页 |
| ·主要实验仪器 | 第60-61页 |
| ·实验方法 | 第61-62页 |
| ·软琼脂克隆形成实验 | 第61页 |
| ·动物模型的建立 | 第61-62页 |
| ·结果与讨论 | 第62-65页 |
| ·ADFOXM1SHRNA 在体外对肿瘤细胞形成克隆能力的影响 | 第62-64页 |
| ·ADFOXM1SHRNA 在体内对肿瘤细胞成瘤能力的影响 | 第64-65页 |
| ·小结 | 第65-66页 |
| 第6章 ADFOXM1SHRNA 对肿瘤生长的影响 | 第66-77页 |
| ·实验材料 | 第66-67页 |
| ·实验动物 | 第66页 |
| ·主要试剂 | 第66页 |
| ·主要实验仪器 | 第66-67页 |
| ·实验方法 | 第67-71页 |
| ·裸鼠肿瘤模型的建立 | 第67-68页 |
| ·WESTERN BLOTTING | 第68页 |
| ·半定量 RT-PCR | 第68-69页 |
| ·石蜡切片制作 | 第69-70页 |
| ·石蜡切片 HE 染色 | 第70页 |
| ·免疫组织化学染色实验 | 第70页 |
| ·数据分析 | 第70-71页 |
| ·结果与讨论 | 第71-76页 |
| ·ADFOXM1SHRNA 能抑制 CNE 细胞移植瘤的生长 | 第71-73页 |
| ·ADFOXM1SHRNA 能抑制 ZR-75-30 细胞移植瘤的生长 | 第73-76页 |
| ·小结 | 第76-77页 |
| 结论 | 第77-79页 |
| 参考文献 | 第79-90页 |
| 附录 A 常用缓冲液和试剂配方 | 第90-92页 |
| 附录 B 攻读学位期间发表的学术论文目录 | 第92-93页 |
| 致谢 | 第93页 |
