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甘蓝型油菜中RGS基因(BnRGS1)的克隆及功能研究

摘要第1-7页
Abstract第7-9页
中英文对照词第9-10页
1 文献综述第10-22页
   ·动物G蛋白信号转导途径第10-12页
   ·植物G蛋白信号转导途径第12-14页
     ·植物G蛋白信号转导途径的组分第12-13页
     ·G蛋白在植物发育中的作用第13-14页
   ·G蛋白信号转导调节蛋白(Regulator of G protein signaling,RGS)第14-18页
     ·RGS蛋白的结构第15页
     ·RGS蛋白的分类与家族成员第15-18页
     ·RGS蛋白的作用机制第18页
   ·植物中的RGS蛋白第18-21页
     ·拟南芥RGS蛋白(AtRGS1)第18-19页
     ·大豆RGS蛋白(GmRGS1)第19-21页
   ·本研究的研究目的及内容第21-22页
2 材料与方法第22-29页
   ·BnRGS1基因的克隆第22-23页
     ·实验材料及试剂第22页
     ·实验仪器第22页
     ·实验方法第22-23页
       ·甘蓝型油菜总RNA的提取及cDNA第一链的合成第22页
       ·PCR扩增BnRGS1基因全长cDNA第22-23页
       ·BnRGS1基因的克隆与鉴定第23页
   ·BnRGS1的亚细胞定位第23-25页
     ·实验材料第23页
     ·实验设备第23页
     ·实验方法第23-25页
       ·定位重组载体的构建第23-24页
       ·农杆菌GV3101的转化第24页
       ·洋葱表皮细胞瞬时表达第24-25页
       ·烟草表皮细胞瞬时表达第25页
   ·BnRGS1与BnGA1的蛋白相互作用第25-26页
     ·实验材料第25页
     ·实验方法第25-26页
       ·载体构建第25页
       ·酵母感受态细胞的制备及转化第25-26页
   ·BnRGS1基因的表达分析第26-29页
     ·实验材料第26页
     ·实验方法第26-29页
       ·甘蓝型油菜籽苗生长、处理及RNA提取方法第26-27页
       ·定量PCR体系及程序第27-29页
3 实验结果与分析第29-43页
   ·BnRGS1的克隆及生物信息学分析第29-35页
     ·油菜RGS蛋白的预测第29页
     ·RNA完整性检测第29-30页
     ·BnRGS1的PCR扩增第30页
     ·BnRGS1的TA克隆及鉴定第30-31页
     ·BnRGS1的生物信息学分析第31-35页
   ·BnRGS1的亚细胞定位第35-37页
     ·定位载体的构建和农杆菌GV3101转化第35页
     ·BnRGS1的亚细胞荧光定位第35-37页
   ·BnRGS1与BnGA1的相互作用第37-39页
     ·互作载体的构建第37-38页
     ·BnRGS1与BnGA1的相互作用第38-39页
   ·BnRGS1的表达水平分析第39-43页
     ·BnRGS1在不同组织和不同发育阶段的表达水平分析第39-40页
     ·外源激素处理时BnRGS1的表达水平分析第40-41页
     ·非生物胁迫处理时BnRGS1的表达水平分析第41-43页
4 讨论第43-47页
   ·BnRGS1和已鉴定出的植物RGS蛋白结构和功能相似,具有GAP活性第43-44页
   ·双子叶植物大多具有RGS蛋白,单子叶植物RGS蛋白可能在进化过程中丢失了第44页
   ·BnRGS1涉及植物生长发育,并参与植物激素响应和非生物胁迫的应答过程第44-45页
   ·总结第45-46页
   ·展望第46-47页
参考文献第47-53页
附录第53-56页
致谢第56-57页

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