| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-8页 |
| 第一章 绪论 | 第8-17页 |
| ·概述 | 第8-9页 |
| ·琥珀酸及其应用 | 第8-9页 |
| ·琥珀酸的生产方法 | 第9页 |
| ·微生物发酵法生产琥珀酸 | 第9-13页 |
| ·琥珀酸生产菌株 | 第9-10页 |
| ·琥珀酸合成途径 | 第10-11页 |
| ·琥珀酸生产菌株的代谢工程研究进展 | 第11-13页 |
| ·系统代谢工程 | 第13-15页 |
| ·系统代谢工程策略 | 第13-14页 |
| ·基因组规模代谢网络模型 | 第14页 |
| ·GSMM 在微生物代谢工程研究中的应用 | 第14-15页 |
| ·本论文的研究背景 | 第15页 |
| ·本文主要研究内容 | 第15-17页 |
| 第二章 材料与方法 | 第17-25页 |
| ·菌种和质粒 | 第17页 |
| ·主要试剂和仪器 | 第17-18页 |
| ·主要试剂 | 第17-18页 |
| ·主要仪器设备 | 第18页 |
| ·培养条件 | 第18-19页 |
| ·培养基 | 第18页 |
| ·培养方法 | 第18-19页 |
| ·重组菌株的构建方法 | 第19-22页 |
| ·树干毕赤酵母感受态的制备和转化 | 第19页 |
| ·大肠杆菌感受态的制备和转化 | 第19-20页 |
| ·重组菌株 FPLppc 的构建 | 第20页 |
| ·重组菌株 FPLpck 的构建 | 第20页 |
| ·重组菌株 FPLicl 的构建 | 第20-21页 |
| ·对照菌 FPLpy26 的构建 | 第21页 |
| ·重组菌株 FPL sdh 的构建 | 第21页 |
| ·重组菌株 FPL sdh-icl 的构建 | 第21-22页 |
| ·分析方法 | 第22-23页 |
| ·酶活的测定方法 | 第22-23页 |
| ·发酵及代谢物分析 | 第23页 |
| ·GSMM 模拟方法 | 第23-25页 |
| 第三章 结果与讨论 | 第25-44页 |
| ·合成琥珀酸的最优代谢途径的设计 | 第25-30页 |
| ·基于 GSMM 的琥珀酸代谢途径分析 | 第25-26页 |
| ·琥珀酸合成途径通量分析 | 第26-28页 |
| ·高效合成琥珀酸的关键代谢节点及其代谢改造的结果模拟 | 第28-29页 |
| ·小结 | 第29-30页 |
| ·强化琥珀酸还原途径对琥珀酸积累的影响 | 第30-35页 |
| ·过量表达 ppc 和 pck 基因重组菌株的构建 | 第30-32页 |
| ·重组菌株的相关酶活 | 第32页 |
| ·重组菌株对产琥珀酸的影响 | 第32-33页 |
| ·碳酸盐对重组菌株生长和产酸的影响 | 第33-35页 |
| ·小结 | 第35页 |
| ·TCA-乙醛酸循环对琥珀酸生产的影响 | 第35-44页 |
| ·TCA-乙醛酸循环生产琥珀酸途径 | 第35-36页 |
| ·重组菌株 FPLicl、FPL sdh 和 FPL sdh-icl 的构建 | 第36-39页 |
| ·重组菌株 FPLicl、FPL sdh 和 FPL sdh-icl 酶活测定 | 第39-40页 |
| ·重组菌株在不同底物上的生理特性 | 第40-43页 |
| ·小结 | 第43-44页 |
| 主要结论与展望 | 第44-46页 |
| 主要结论 | 第44-45页 |
| 展望 | 第45-46页 |
| 致谢 | 第46-47页 |
| 参考文献 | 第47-51页 |
| 附录：作者在攻读硕士学位期间发表的论文 | 第51-52页 |
| 附图 | 第52页 |
