| 摘要 | 第1-7页 |
| ABSTRACT | 第7-9页 |
| 符号与缩略语说明 | 第9-10页 |
| 前言 | 第10-11页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-23页 |
| 一 纤维素酶基因的研究进展 | 第11-14页 |
| 1 纤维素酶的来源 | 第11页 |
| 2 纤维素酶结构研究现状 | 第11-13页 |
| 3 纤维素结合域(CBD)的应用 | 第13-14页 |
| 4 纤维素酶基因改造的研究现状 | 第14页 |
| 二 毕赤酵母表达研究进展 | 第14-18页 |
| 1 毕赤酵母表达系统 | 第14-17页 |
| 2 影响外源基因在毕赤酵母中表达的因素 | 第17-18页 |
| 三 纤维素酶的应用及发展 | 第18-19页 |
| 参考文献 | 第19-23页 |
| 第二章 cel5G基因与纤维素结合域基因的融合表达 | 第23-43页 |
| 1 材料与方法 | 第23-33页 |
| ·菌株与质粒 | 第23页 |
| ·培养基 | 第23页 |
| ·试剂与主要仪器 | 第23页 |
| ·常用溶液 | 第23-24页 |
| ·重组基因的扩增,纯化及TA克隆 | 第24-30页 |
| ·表达载体pET29a-cel5G-CBD的构建 | 第30-31页 |
| ·重组基因的表达 | 第31页 |
| ·重组基因的活性验证 | 第31-33页 |
| 2 结果与分析 | 第33-39页 |
| ·CBD基因的合成 | 第33-34页 |
| ·CBD基因的扩增 | 第34页 |
| ·重组基因的构建 | 第34-35页 |
| ·表达载体的构建 | 第35-36页 |
| ·表达载体酶活的测定 | 第36-38页 |
| ·与微晶纤维素结合力的测定 | 第38-39页 |
| 3 讨论 | 第39-41页 |
| ·重组基因在大肠杆菌中的表达 | 第39页 |
| ·融合表达后酶的活性 | 第39页 |
| ·重组酶对微晶纤维素的降解 | 第39-41页 |
| 参考文献 | 第41-43页 |
| 第三章 β-1,4-葡聚糖内切酶Cel5G在毕赤酵母中表达及酶学性质研究 | 第43-59页 |
| 1 材料与方法 | 第43-50页 |
| ·菌种与质粒 | 第43页 |
| ·培养基与常用溶液 | 第43-44页 |
| ·工具酶与试剂 | 第44页 |
| ·实验方法 | 第44-48页 |
| ·转化子鉴定 | 第48-49页 |
| ·酶学性质的研究 | 第49-50页 |
| 2 结果与分析 | 第50-57页 |
| ·重组质粒pEFaA-cel5G的构建策略 | 第50-53页 |
| ·重组纤维素酶Cel5G毕赤酵母菌株的构建 | 第53-54页 |
| ·酵母转化子的鉴定 | 第54-55页 |
| ·酵母表达酶酶学性质 | 第55-57页 |
| 3 讨论 | 第57-58页 |
| 参考文献 | 第58-59页 |
| 全文总结 | 第59-61页 |
| 本文创新之处 | 第61-63页 |
| 附录一：文中所用试剂配方 | 第63-64页 |
| 附录二：文中所合成的基因序列 | 第64-65页 |
| 致谢 | 第65页 |