| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-7页 |
| 缩略表 | 第7-11页 |
| 第一章 绪论 | 第11-19页 |
| 1 纤维素 | 第11-13页 |
| ·纤维素的存在 | 第11页 |
| ·纤维素的利用 | 第11-12页 |
| ·纤维素的结构 | 第12-13页 |
| 2 纤维素酶 | 第13-16页 |
| ·纤维素酶的定义 | 第13页 |
| ·纤维素酶的来源 | 第13-14页 |
| ·纤维素酶的研究现状 | 第14-15页 |
| ·纤维素酶的应用 | 第15-16页 |
| ·纤维素酶在饮料业中的应用 | 第15页 |
| ·纤维素酶在发酵、酿造工业的应用 | 第15页 |
| ·纤维素酶在饲料工业中的应用 | 第15页 |
| ·纤维素酶在医药业中的应用 | 第15-16页 |
| ·纤维素酶在新能源中的应用 | 第16页 |
| ·纤维素酶在其他领域的应用 | 第16页 |
| 3 枯草芽孢杆菌 | 第16-17页 |
| ·枯草芽孢杆菌的基本性质 | 第16-17页 |
| ·枯草芽孢杆菌表达系统的优势 | 第17页 |
| 4 生物过程优化 | 第17-18页 |
| ·单次单因子法 | 第17页 |
| ·响应面法 | 第17-18页 |
| ·响应面法的概念 | 第17-18页 |
| ·Plackett-Burman 实验 | 第18页 |
| ·Box-Behnken 实验 | 第18页 |
| 5 本文研究的目的和意义 | 第18-19页 |
| 第二章 纤维素酶 EGA 在枯草芽孢杆菌中的表达 | 第19-31页 |
| 1 引言 | 第19页 |
| 2 材料试剂 | 第19-21页 |
| ·菌体基质 | 第19页 |
| ·主要试剂 | 第19-20页 |
| ·主要仪器 | 第20页 |
| ·大肠杆菌 DH5α感受态细胞的制备方法 | 第20-21页 |
| ·连接质粒转化大肠杆菌 DH5α的方法 | 第21页 |
| ·枯草芽孢杆菌转化相关试剂的配制 | 第21页 |
| 3 纤维素酶 EGA 在枯草芽孢杆菌中的表达 | 第21-28页 |
| ·纤维素酶 EGA 重组表达质粒的构建 | 第21-27页 |
| ·纤维素酶 EGA 基因的克隆 | 第21-23页 |
| ·pAsp 质粒的构建及以及在大肠杆菌 DH5α中的扩增 | 第23页 |
| ·pAsp+ega 质粒的构建以及在大肠杆菌 DH5α中的扩增 | 第23-24页 |
| ·穿梭载体 pAsp+ega+pUB110 构建及其在大肠杆菌 DH5α中的扩增 | 第24页 |
| ·重组表达载体的构建 | 第24-27页 |
| ·纤维素酶 EGA 表达质粒转化枯草芽孢杆菌 | 第27页 |
| ·纤维素酶 EGA 在枯草芽孢杆菌中的表达 | 第27-28页 |
| ·纤维素酶 EGA 的活力测定 | 第28页 |
| 4 结果与讨论 | 第28-31页 |
| ·穿梭质粒的正反鉴定 | 第28-29页 |
| ·ega 基因的克隆 | 第29页 |
| ·纤维素酶 EGA 的表达测定结果 | 第29-30页 |
| ·讨论 | 第30-31页 |
| 第三章 用响应面法优化纤维素酶 EGA 重组枯草芽孢杆菌产酶条件及发酵罐扩大培养 | 第31-44页 |
| 1 引言 | 第31页 |
| 2 材料与方法 | 第31-33页 |
| ·材料、试剂和仪器 | 第31-32页 |
| ·菌种 | 第31页 |
| ·主要试剂 | 第31-32页 |
| ·主要仪器与设备 | 第32页 |
| ·实验方法 | 第32-33页 |
| ·培养基 | 第32页 |
| ·摇瓶培养方法 | 第32-33页 |
| ·发酵罐培养方法 | 第33页 |
| ·发酵罐培养取样 | 第33页 |
| ·纤维素酶 EGA 酶活力测定方法 | 第33页 |
| 3 结果与讨论 | 第33-44页 |
| ·单因素试验设计 | 第33-37页 |
| ·淀粉浓度对纤维素酶 EGA 重组枯草芽孢杆菌产酶影响 | 第33-34页 |
| ·酵母粉浓度对纤维素酶 EGA 重组枯草芽孢杆菌产酶影响 | 第34-35页 |
| ·蛋白胨浓度对纤维素酶 EGA 重组枯草芽孢杆菌产酶影响 | 第35页 |
| ·磷酸盐浓度对纤维素酶 EGA 重组枯草芽孢杆菌产酶影响 | 第35-36页 |
| ·MgSO_4·7H_2O 浓度对纤维素酶 EGA 重组枯草芽孢杆菌产酶影响 | 第36-37页 |
| ·CaCl_2浓度对纤维素酶 EGA 重组枯草芽孢杆菌产酶影响 | 第37页 |
| ·Plackett-Burman 实验设计 | 第37-39页 |
| ·Box-Behnken 实验设计 | 第39-42页 |
| ·发酵罐扩大培养 | 第42-43页 |
| ·讨论 | 第43-44页 |
| 第四章 纤维素酶 EGA 的酶学性质分析 | 第44-50页 |
| 1 引言 | 第44页 |
| 2 材料与方法 | 第44-45页 |
| ·材料、试剂和仪器 | 第44-45页 |
| ·菌种 | 第44页 |
| ·主要试剂 | 第44页 |
| ·主要仪器与设备 | 第44-45页 |
| 3 实验与方法 | 第45-46页 |
| ·溶液配制方法 | 第45页 |
| ·DNS 溶液配制方法 | 第45页 |
| ·Britton-Robinson 缓冲溶液 | 第45页 |
| ·纤维素酶 EGA 的活力测定 | 第45页 |
| ·纤维素酶 EGA 的性质分析 | 第45-46页 |
| ·pH 对纤维素酶 EGA 的活性以及稳定性的影响 | 第45-46页 |
| ·温度对纤维素酶 EGA 的活性以及稳定性的影响 | 第46页 |
| 4 结果与讨论 | 第46-50页 |
| ·pH 对纤维素酶 EGA 的活性以及稳定性的影响 | 第46-47页 |
| ·温度对纤维素酶 EGA 的活性以及稳定性的影响 | 第47-49页 |
| ·讨论 | 第49-50页 |
| 第五章 结论与展望 | 第50-51页 |
| 1 结论 | 第50页 |
| 2 展望 | 第50-51页 |
| 参考文献 | 第51-55页 |
| 攻读学位期间的研究成果 | 第55-56页 |
| 致谢 | 第56页 |
