| 摘要 | 第1-5页 |
| ABSTRACT | 第5-6页 |
| 缩写符号说明 | 第6-11页 |
| 第1章 文献综述 | 第11-27页 |
| ·微生物油脂 | 第11-12页 |
| ·微生物油脂特点 | 第12页 |
| ·产油脂微生物的种类 | 第12-14页 |
| ·细菌 | 第12-13页 |
| ·真菌 | 第13页 |
| ·藻类 | 第13-14页 |
| ·微生物发酵产多不饱和脂肪酸的研究进展 | 第14-20页 |
| ·多不饱和脂肪酸的合成途径 | 第14-16页 |
| ·微生物生产γ-亚麻酸（GLA） | 第16-17页 |
| ·微生物生产 ARA | 第17-18页 |
| ·微生物生产 EPA | 第18页 |
| ·微生物生产 DHA | 第18-20页 |
| ·脂肪酸脱氢酶 | 第20-21页 |
| ·Δ6-脂肪酸脱氢酶的研究进展 | 第21-24页 |
| ·微生物育种 | 第24-26页 |
| ·微生物诱变育种 | 第24页 |
| ·微生物诱变的方法 | 第24-26页 |
| ·本研究内容 | 第26-27页 |
| 第2章 产油脂微生物的筛选 | 第27-40页 |
| ·实验材料 | 第27-29页 |
| ·菌种 | 第27-28页 |
| ·主要仪器设备 | 第28页 |
| ·主要试剂及培养基 | 第28-29页 |
| ·实验方法 | 第29-31页 |
| ·菌种的活化与保存 | 第29页 |
| ·发酵培养 | 第29页 |
| ·生物量的测定 | 第29-30页 |
| ·油脂提取 | 第30页 |
| ·脂肪酸的甲酯化 | 第30页 |
| ·脂肪酸检测 | 第30-31页 |
| ·圆红冬孢酵母的气相色谱-质谱联用分析 | 第31页 |
| ·实验结果 | 第31-35页 |
| ·不同菌种的总脂肪酸测定 | 第31-32页 |
| ·不同菌种的脂肪酸组成分析 | 第32-33页 |
| ·圆红冬孢酵母的脂肪酸 GC-MS 检测结果 | 第33-35页 |
| ·小结 | 第35-40页 |
| 第3章 圆红冬孢酵母高产脂肪酸突变株的诱变选育 | 第40-50页 |
| ·实验材料 | 第40-41页 |
| ·菌种 | 第40页 |
| ·主要仪器设备 | 第40页 |
| ·主要试剂及培养基 | 第40-41页 |
| ·实验方法 | 第41-43页 |
| ·圆红冬孢酵母生长曲线的绘制 | 第41页 |
| ·圆红冬孢酵母的发酵培养 | 第41页 |
| ·种子液的制备 | 第41页 |
| ·NTG 诱变 | 第41-42页 |
| ·磷酸香草醛法标准曲线的绘制 | 第42-43页 |
| ·实验结果 | 第43-46页 |
| ·圆红冬孢酵母的生长曲线 | 第43页 |
| ·NTG 诱变作用时间 | 第43-44页 |
| ·NTG 诱变浓度 | 第44-45页 |
| ·磷酸香草醛法标准曲线 | 第45页 |
| ·磷酸香草醛法筛选突变株的油脂含量 | 第45-46页 |
| ·小结 | 第46-50页 |
| 第4章 圆红冬孢酵母高产α-亚麻酸突变株的选育 | 第50-57页 |
| ·实验材料 | 第50-51页 |
| ·菌种 | 第50页 |
| ·主要仪器设备 | 第50-51页 |
| ·主要试剂及培养基 | 第51页 |
| ·实验方法 | 第51-52页 |
| ·LiCl 诱变浓度和紫外线诱变时间的确定 | 第51页 |
| ·紫外线和 LiCl 复合诱变法 | 第51-52页 |
| ·α-亚麻酸突变株的初筛方法 | 第52页 |
| ·α-亚麻酸突变株的复筛方法 | 第52页 |
| ·实验结果 | 第52-55页 |
| ·LiCl 浓度的确定 | 第52-53页 |
| ·紫外线和 LiCl 复合诱变条件的确定实验 | 第53-54页 |
| ·TTC 法筛选结果 | 第54页 |
| ·气相色谱检测结果 | 第54-55页 |
| ·遗传稳定性试验 | 第55页 |
| ·小结 | 第55-57页 |
| 第5章 Δ6-脂肪酸脱氢酶基因的克隆 | 第57-75页 |
| ·实验材料 | 第57-58页 |
| ·菌株 | 第57页 |
| ·主要仪器设备 | 第57-58页 |
| ·试剂盒、试剂和酶 | 第58页 |
| ·主要试剂及培养基 | 第58页 |
| ·实验方法 | 第58-67页 |
| ·深黄被孢霉的发酵培养 | 第58-59页 |
| ·总 RNA 的提取 | 第59页 |
| ·RNA 定量 | 第59-60页 |
| ·RNA 凝胶电泳 | 第60页 |
| ·逆转录 PCR | 第60-61页 |
| ·PCR 扩增Δ6-脂肪酸脱氢酶基因的保守区 | 第61-62页 |
| ·High-efficiency TAIL-PCR | 第62-63页 |
| ·PCR 产物回收 | 第63-64页 |
| ·PCR 产物与 PGEM-T 载体连接 | 第64页 |
| ·转化 | 第64-66页 |
| ·质粒的提取 | 第66-67页 |
| ·实验结果 | 第67-73页 |
| ·RNA 的定量 | 第67页 |
| ·RNA 凝胶电泳 | 第67-68页 |
| ·PCR 扩增Δ6-脂肪酸脱氢酶基因的保守区 | 第68-69页 |
| ·High-efficiency TAIL-PCR 扩增Δ6-脂肪酸脱氢酶基因的上下游序列 | 第69-71页 |
| ·Δ6-脂肪酸脱氢酶基因全长的克隆 | 第71-73页 |
| ·小结 | 第73-75页 |
| 第6章 结论与展望 | 第75-79页 |
| ·本研究的主要结论 | 第75-76页 |
| ·本研究的创新之处 | 第76-77页 |
| ·展望 | 第77-79页 |
| 参考文献 | 第79-87页 |
| 致谢 | 第87-88页 |
| 攻读学位期间的研究成果 | 第88页 |