空肠弯曲菌未知基因cj1199对红霉素耐药性和适应性的功能研究
| 目录 | 第1-8页 |
| 摘要 | 第8-11页 |
| Abstract | 第11-15页 |
| 缩略语表 | 第15-16页 |
| 1 前言 | 第16-21页 |
| ·研究背景 | 第16-18页 |
| ·研究进展 | 第18-19页 |
| ·研究内容和目的意义 | 第19-21页 |
| 2 材料与方法 | 第21-40页 |
| ·抗菌药物及配制 | 第21-22页 |
| ·培养基与试剂 | 第22-24页 |
| ·仪器设备 | 第24-25页 |
| ·载体的构建 | 第25-32页 |
| ·载体构建方案 | 第25-28页 |
| ·空肠弯曲菌基因组的提取 | 第28-29页 |
| ·扩增所需片段 | 第29-31页 |
| ·反向扩增 | 第31页 |
| ·载体的连接 | 第31-32页 |
| ·突变体的构建 | 第32-33页 |
| ·自然转化 | 第32页 |
| ·电转化 | 第32-33页 |
| ·突变体鉴定 | 第33-34页 |
| ·差异基因筛选 | 第34-35页 |
| ·细菌总RNA的提取 | 第34-35页 |
| ·差异表达基因的检测与分析(基因芯片) | 第35页 |
| ·实时荧光定量PCR验证 | 第35-36页 |
| ·cDNA的合成 | 第35页 |
| ·Real-time RT-PCR验证 | 第35-36页 |
| ·表型检测 | 第36-40页 |
| ·生长力 | 第36页 |
| ·竞争生长力 | 第36-37页 |
| ·在药物环境下的竞争生长力 | 第37页 |
| ·亮氨酸缺失培养实验 | 第37页 |
| ·耐药性 | 第37-38页 |
| ·细菌细胞膜通透性 | 第38页 |
| ·红霉素诱导耐药 | 第38-40页 |
| 3 结果与分析 | 第40-53页 |
| ·载体的确证 | 第40页 |
| ·突变体的确证 | 第40-42页 |
| ·总RNA质量 | 第42页 |
| ·芯片结果分析 | 第42-44页 |
| ·差异片段序列分析 | 第44-45页 |
| ·实时荧光定量PCR验证 | 第45-46页 |
| ·表型结果 | 第46-53页 |
| ·生长力 | 第46-47页 |
| ·竞争生长力 | 第47-48页 |
| ·在红霉素中的竞争生长力 | 第48页 |
| ·在亮氨酸缺失培养基中的生长力 | 第48-49页 |
| ·耐药性检测 | 第49-50页 |
| ·通透性检测 | 第50-51页 |
| ·诱导耐药过程分析 | 第51-53页 |
| 4 讨论 | 第53-61页 |
| ·cj1199缺失突变体构建的探讨 | 第53-54页 |
| ·相关差异基因分析及cj1199功能推测 | 第54-61页 |
| ·氨基酸合成相关酶 | 第55-57页 |
| ·转运相关蛋白 | 第57-58页 |
| ·铁相关基因 | 第58-59页 |
| ·cj1199对细菌与适应性的影响 | 第59-61页 |
| 5 小结 | 第61-62页 |
| 文献综述 | 第62-74页 |
| 参考文献 | 第74-85页 |
| 致谢 | 第85-86页 |
| 个人简介 | 第86-87页 |
| 附录 | 第87-100页 |
