| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-7页 |
| 第一章 绪论 | 第7-17页 |
| ·研究背景 | 第7-15页 |
| ·肿瘤化疗药物 | 第8-10页 |
| ·肿瘤多药耐药机制 | 第10-13页 |
| ·真核细胞蛋白质翻译起始机制 | 第13-15页 |
| ·IRES 与多药耐药相关性研究 | 第15页 |
| ·研究意义 | 第15-16页 |
| ·课题研究内容 | 第16-17页 |
| 第二章 P-gp 在野生型和耐药型MCF-7 细胞中的表达情况检测 | 第17-28页 |
| ·材料 | 第17-19页 |
| ·细胞株 | 第17-18页 |
| ·试剂 | 第18页 |
| ·仪器 | 第18-19页 |
| ·方法 | 第19-22页 |
| ·细胞培养液配置 | 第19页 |
| ·细胞培养 | 第19页 |
| ·扫描电镜 | 第19-20页 |
| ·磺酰罗丹明B 染色法 | 第20页 |
| ·药敏性检测 | 第20页 |
| ·耐药相关蛋白免疫细胞化学检测 | 第20-21页 |
| ·Western blot 分析 | 第21-22页 |
| ·结果与讨论 | 第22-27页 |
| ·扫描电镜观察细胞形态 | 第22页 |
| ·药敏性检测 | 第22-23页 |
| ·耐药相关蛋白免疫细胞化学检测 | 第23-26页 |
| ·Western blot 检测P-gp 的表达情况 | 第26-27页 |
| ·本章小结 | 第27-28页 |
| 第三章 用于检测IRES 活性的工具质粒的构建 | 第28-46页 |
| ·材料 | 第28-29页 |
| ·载体质粒与宿主菌株 | 第28页 |
| ·试剂 | 第28-29页 |
| ·仪器 | 第29页 |
| ·方法 | 第29-33页 |
| ·JM109 感受态细胞的制备及转化 | 第29页 |
| ·质粒提取 | 第29-30页 |
| ·PCR 产物纯化 | 第30页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳 | 第30-31页 |
| ·酶切片段割胶回收 | 第31页 |
| ·质粒构建 | 第31-33页 |
| ·结果与讨论 | 第33-44页 |
| ·构建的重组质粒示意图 | 第33-34页 |
| ·pG 质粒构建 | 第34-35页 |
| ·pG-R 质粒构建 | 第35-36页 |
| ·pG-EMCV-R 质粒构建 | 第36-38页 |
| ·pR 质粒构建 | 第38-39页 |
| ·pR-G 质粒构建 | 第39-40页 |
| ·pR-EMCV-G 质粒构建 | 第40-41页 |
| ·pR-EMCVG 质粒构建 | 第41-43页 |
| ·pG-EMCVR、pG-MDR1R 质粒构建 | 第43-44页 |
| ·本章小结 | 第44-46页 |
| 第四章 P-gp mRNA 中IRES 活性序列的鉴定 | 第46-55页 |
| ·材料 | 第46-47页 |
| ·细胞株 | 第46页 |
| ·试剂 | 第46页 |
| ·仪器 | 第46-47页 |
| ·方法 | 第47-48页 |
| ·细胞培养 | 第47页 |
| ·细胞转染 | 第47页 |
| ·荧光显微镜检测 | 第47页 |
| ·荧光分光光度计检测 | 第47页 |
| ·用于检测EMCV 5’-UTR 启动子活性的质粒构建 | 第47-48页 |
| ·结果与讨论 | 第48-54页 |
| ·用于检测P-gp mRNA 中IRES 活性的工具质粒的表达分析 | 第48-50页 |
| ·EMCV 5’-UTR 的启动子活性检测 | 第50-51页 |
| ·MDR1 5’-UTR 的IRES 活性检测 | 第51-54页 |
| ·本章小结 | 第54-55页 |
| 第五章 总结与展望 | 第55-57页 |
| ·主要结论 | 第55页 |
| ·问题与展望 | 第55-57页 |
| 致谢 | 第57-58页 |
| 参考文献 | 第58-62页 |
| 附录：作者在攻读硕士学位期间发表的论文 | 第62页 |
