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拟南芥中三个未知功能基因的克隆和分析

目录第1-7页
缩写词表第7-8页
摘要第8-9页
ABSTRACT第9-10页
第一章 前言第10-16页
 一、油菜素内酯研究进展第10-13页
  1.BR的生物合成第10-11页
  2.BR突变体类型第11页
  3.BR的信号在膜上的感知第11-12页
   ·BRI1第11-12页
   ·BAK1第12页
   ·BRS1第12页
  4.BR的信号传导模式第12-13页
 二、植物一氧化氮研究进展第13-15页
  1.NO的生物合成第13页
  2.NO与植物抗逆性第13-14页
  3.植物NO信号传递途径第14页
  4.NO与植物激素的相互作用第14-15页
 三、本论文研究目的第15-16页
第二章 材料和方法第16-24页
 一、实验材料第16-17页
  1.材料处理第16-17页
  2.主要试剂第17页
  3.菌种和载体第17页
 二、实验方法第17-24页
  1.Real-Time PCR检测基因表达第17-19页
   ·RNA的提取第17-18页
   ·cDNA第一链合成第18页
   ·Real-Time PCR第18-19页
  2.目的蛋白的亚细胞定位和基因过表达第19-24页
   ·目的序列的扩增第19-20页
   ·PCR产物回收第20页
   ·入门克隆的构建第20页
   ·表达载体的构建第20-22页
   ·农杆菌介导拟南芥转化第22-23页
   ·花序浸染法转化拟南芥第23页
   ·转基因拟南芥的筛选和鉴定第23-24页
第三章 结果与分析第24-46页
 一、不同环境胁迫对基因表达的影响第24-30页
  1.环境胁迫对AtBN12基因表达的影响第24-26页
  2.环境胁迫对AtBN15基因表达的影响第26-28页
  3.环境胁迫对AtBN16基因表达的影响第28-30页
 二、NO和BR对基因表达的影响第30-39页
  1.NO和BR对AtBN12基因表达的影响第30-33页
  2.NO和BR对AtBN15基因表达的影响第33-36页
  3.NO和BR对AtBN16基因表达的影响第36-39页
 三、亚细胞定位及基因过表达第39-46页
  1.PCR扩增cDNA第39-40页
  2.入门克隆的鉴定第40页
  3.入门克隆的序列分析第40-41页
  4.入门克隆的线性化第41-42页
  5.亚细胞定位表达载体的鉴定第42页
  6.过表达载体的鉴定第42-43页
  7.导入重组质粒的农杆菌阳性克隆的鉴定第43-44页
  8.转基因拟南芥筛选结果第44-46页
第四章 讨论第46-53页
 一、拟南芥AtBN12基因的功能分析第46-48页
  1.环境因子对拟南芥AtBN12基因表达的调控第46-47页
  2.BR和NO对AtBR12基因表达的调控第47-48页
 二、拟南芥AtBN15基因的功能分析第48-50页
  1.拟南芥AtBN15基因的表达受多种环境因子的抑制第48-49页
  2.NO对AtBN15表达的调节受到BR的影响第49-50页
 三、拟南芥AtBN16基因的功能分析第50-52页
  1.多种环境胁迫均诱导AtBN16基因的表达第50页
  2.NO对AtBN16表达的调控受BR的影响第50-52页
 四、基因的亚细胞定位和过表达第52-53页
第五章 结论第53-54页
参考文献第54-59页
致谢第59页

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