| 目录 | 第1-8页 |
| 摘要 | 第8-9页 |
| Abstract | 第9-11页 |
| 第一章 前言 | 第11-20页 |
| 1 果胶甲基酯酶 | 第11-14页 |
| ·果胶甲基酯酶的结构 | 第11-12页 |
| ·植物PME的调节 | 第12-13页 |
| ·PME在植物中的生理作用 | 第13页 |
| ·植物PME的分子生物学研究 | 第13-14页 |
| 2.植物激素油菜素内酯 | 第14-17页 |
| ·油菜素内酯的结构 | 第14-15页 |
| ·油菜素内酯的生理作用 | 第15-16页 |
| ·BR在拟南芥中的合成及信号传导 | 第16-17页 |
| 3.一氧化氮 | 第17-19页 |
| ·植物体内NO的产生及功能 | 第17-18页 |
| ·NO的信号转导 | 第18-19页 |
| 4.本研究的目的和意义 | 第19-20页 |
| 第二章 PME基因的表达及非生物胁迫对其表达的调节 | 第20-32页 |
| 1.材料与方法 | 第20-23页 |
| ·植物材料 | 第20页 |
| ·用于PCR扩增的actin2和PME基因的引物 | 第20页 |
| ·RT-PCR | 第20-23页 |
| ·植物总RNA的提取 | 第20-21页 |
| ·RNA样品的电泳检测 | 第21页 |
| ·反转录 | 第21-22页 |
| ·试剂 | 第21-22页 |
| ·步骤 | 第22页 |
| ·PCR扩增 | 第22-23页 |
| ·PCR反应体系 | 第22-23页 |
| ·PCR反应程序 | 第23页 |
| ·1%琼脂糖凝胶电泳,成像 | 第23页 |
| ·样品模板浓度的调节 | 第23页 |
| 2.结果分析 | 第23-30页 |
| ·BR和NO对拟南芥PME基因的表达调控 | 第23-26页 |
| ·BR、SNP及GSNO对拟南芥表达的影响 | 第24页 |
| ·BR和NO对拟南芥PME基因的表达调控 | 第24-26页 |
| ·拟南芥PME基因的表达特性及非生物胁迫对该基因的表达的调节 | 第26-30页 |
| ·PME在拟南芥组织中的表达 | 第26-27页 |
| ·盐胁迫 | 第27-28页 |
| ·渗透胁迫 | 第28页 |
| ·冷胁迫 | 第28-29页 |
| ·热胁迫 | 第29-30页 |
| 3 讨论 | 第30-32页 |
| ·拟南芥PME基因对BR和NO的响应 | 第30-31页 |
| ·BR在非生物胁迫中对拟南芥PME基因的表达的调节 | 第31-32页 |
| 第三章 PME基因的克隆表达研究 | 第32-45页 |
| 1 材料与方法 | 第32-38页 |
| ·植物材料 | 第32页 |
| ·载体构建 | 第32-38页 |
| ·引物与模板 | 第32-33页 |
| ·克隆PME启动子区 | 第32-33页 |
| ·克隆PME CDS区 | 第33页 |
| ·试剂 | 第33页 |
| ·PCR扩增 | 第33-34页 |
| ·PCR反应体系 | 第33-34页 |
| ·PCR反应程序 | 第34页 |
| ·凝胶回收 | 第34页 |
| ·入门克隆BP反应 | 第34-35页 |
| ·BP反应体系 | 第34-35页 |
| ·转化 | 第35页 |
| ·质粒提取 | 第35页 |
| ·PCR鉴定 | 第35页 |
| ·酶切 | 第35-36页 |
| ·LR重组反应 | 第36-37页 |
| ·LR反应体系 | 第36页 |
| ·大肠杆菌转化 | 第36-37页 |
| ·质粒提取 | 第37页 |
| ·PCR鉴定 | 第37页 |
| ·农杆菌转化 | 第37-38页 |
| ·农杆菌感受态的制备 | 第37页 |
| ·农杆菌转化目的质粒 | 第37-38页 |
| ·目的质粒的提取 | 第38页 |
| ·PCR鉴定 | 第38页 |
| 2 结果与分析 | 第38-43页 |
| ·果胶甲基酯酶总RNA及DNA的提取 | 第38页 |
| ·拟南芥PME基因的PCR扩增 | 第38-39页 |
| ·PME基因表达载体的构建 | 第39-43页 |
| ·入门克隆 | 第39-40页 |
| ·阳性克隆的筛选和PCR鉴定 | 第40页 |
| ·拟南芥PME基因的测序分析 | 第40页 |
| ·酶切反应 | 第40-41页 |
| ·重组反应 | 第41-42页 |
| ·阳性克隆的筛选和PCR鉴定 | 第42-43页 |
| ·农杆菌转化目的质粒 | 第43页 |
| 3 讨论 | 第43-45页 |
| ·对拟南芥PME基因启动子分析载体构建的讨论 | 第44页 |
| ·对拟南芥PME基因CDS区的克隆以及细胞定位表达载体构建的讨论 | 第44-45页 |
| 参考文献 | 第45-50页 |
| 致谢 | 第50页 |
