| 中文摘要 | 第1-13页 |
| Abstract | 第13-16页 |
| 1 前言 | 第16-32页 |
| ·植物对硝态氮的吸收与转运 | 第16-20页 |
| ·高等植物对氮信号的响应和调控 | 第20-26页 |
| ·植物基因对硝态氮信号的响应 | 第21页 |
| ·植物基因对亚硝酸盐和有机氮代谢产物的响应 | 第21-22页 |
| ·植物基因对氮限制或饥饿的响应 | 第22页 |
| ·植物硝态氮信号转录水平的调控 | 第22-24页 |
| ·植物硝态氮信号转录后水平的调控 | 第24-26页 |
| ·植物体氮信号途径 | 第26-28页 |
| ·氮素水平影响植物根系构型 | 第28-31页 |
| ·氮素对侧根起始和侧根伸长的调节 | 第28-30页 |
| ·氮素对主根生长的调节 | 第30-31页 |
| ·研究的目的和意义 | 第31-32页 |
| 2 材料与方法 | 第32-52页 |
| ·实验材料 | 第32-35页 |
| ·植物材料与处理 | 第32-33页 |
| ·菌株与质粒 | 第33页 |
| ·酶及生化试剂 | 第33页 |
| ·PCR 引物 | 第33-34页 |
| ·培养基 | 第34-35页 |
| ·实验方法 | 第35-52页 |
| ·植物材料总 RNA 的提取 | 第35-36页 |
| ·反转录cDNA第一链的合成（用于3′RACE） | 第36页 |
| ·反转录 cDNA 第一链的合成（用于5′RACE） | 第36-37页 |
| ·cDNA 全长基因序列的获得 | 第37-38页 |
| ·3′端基因片段的克隆 | 第37页 |
| ·5′RACE 获得 5′ 端基因序列 | 第37-38页 |
| ·cDNA 全长基因序列的获得 | 第38-39页 |
| ·DNA 片段与克隆载体的连接 | 第39页 |
| ·凝胶电泳中 DNA 片段的回收 | 第39页 |
| ·碱法小量质粒 DNA 的提取 | 第39-40页 |
| ·DNA 序列测定 | 第40页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备和转化 | 第40-41页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第40-41页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的转化 | 第41页 |
| ·根癌农杆菌 LBA4404 感受态细胞的制备与转化 | 第41-42页 |
| ·感受态细胞的制备 | 第41页 |
| ·冻融法农杆菌转化 | 第41-42页 |
| ·基因组 DNA 提取 (CTAB 法) | 第42-43页 |
| ·表达载体的构建 | 第43-46页 |
| ·PpDOF1 正义表达载体的构建 | 第43-44页 |
| ·MhNRT1.5 和 2.1 正义表达载体的构建 | 第44-45页 |
| ·农杆菌介导的拟南芥的转化 | 第45-46页 |
| ·基因表达分析与转基因鉴定 | 第46-48页 |
| ·转基因植株的基因组 DNA 鉴定 | 第46页 |
| ·半定量表达分析 | 第46-47页 |
| ·实时荧光定量 PCR | 第47-48页 |
| ·数字基因表达谱分析 | 第48页 |
| ·转基因植株生理指标的测定 | 第48-51页 |
| ·可溶性糖和淀粉的测定 | 第48-49页 |
| ·硝态氮和游离氨基酸的测定 | 第49页 |
| ·抗坏血酸（AsA）和可滴定酸的测定 | 第49页 |
| ·酶提取及可溶性蛋白的测定 | 第49页 |
| ·SS, SPS 和 NR 酶活性测定 | 第49-50页 |
| ·SnRK1 和 ADPase 活性分析 | 第50-51页 |
| ·15N 丰度测定 | 第51页 |
| ·光合速率测定 | 第51页 |
| ·本研究使用的软件 | 第51-52页 |
| 3 结果与分析 | 第52-85页 |
| ·NO_3ˉ浓度增加过程中桃苗根系氮信号和代谢相关基因表达的变化 | 第52-56页 |
| ·标签概况 | 第52页 |
| ·差异表达基因的确认与功能分析 | 第52-54页 |
| ·未知基因的功能预测 | 第54页 |
| ·新转录本的发现 | 第54页 |
| ·桃硝态氮信号调控基因 | 第54-56页 |
| ·桃DOF 编码基因(PpDOF1)的分离 | 第56-64页 |
| ·PpDOF1 3′端基因片段的分离 | 第56页 |
| ·PpDOF1 5′端基因片段的分离 | 第56页 |
| ·PpDOF1 全长 cDNA 的分离 | 第56-57页 |
| ·PpDOF1的序列分析 | 第57-59页 |
| ·PpDOF1的表达特性 | 第59页 |
| ·PpDOF1 在桃不同器官中的表达 | 第59页 |
| ·PpDOF1 对 NO_3ˉ的响应 | 第59页 |
| ·转基因达载体pBI121- PpDOF1的构建及转基因拟南芥的鉴定 | 第59-60页 |
| ·转基因拟南芥根和叶片中全氮和 NO_3ˉ含量 | 第60-61页 |
| ·转基因拟南芥主花序果荚数统计 | 第61-62页 |
| ·转基因拟南芥基因表达变化 | 第62-64页 |
| ·平邑甜茶MhSnRK1对番茄碳、氮代谢的调节 | 第64-72页 |
| ·转基因番茄SnRK1 活性变化 | 第64页 |
| ·转基因番茄淀粉和可溶性糖含量均高于野生型 | 第64-67页 |
| ·转基因番茄叶片光合速率、气孔导度和胞间CO2浓度的变化 | 第67-68页 |
| ·MhSnRK1调节氮代谢 | 第68页 |
| ·MhSnRK1参与可滴定酸和抗坏血酸 (维生素c；AsA) 代谢 | 第68页 |
| ·NR, SPS, SS 和 ADPase 活性的测定 | 第68-70页 |
| ·硝态氮对转基因番茄碳、氮代谢物及关键酶活性的影响 | 第70页 |
| ·MhSnRK1 参与调节 NO_3ˉ吸收效率并促进番茄生长 | 第70-72页 |
| ·MhSnRK1超表达番茄与光合作用基因表达变化 | 第72页 |
| ·平邑甜茶 NRT 编码基因（MhNRTs）的分离 | 第72-85页 |
| ·MhNRTs 3′端基因片段的分离 | 第72-73页 |
| ·MhNRTs 5′端基因片段的分离 | 第73-75页 |
| ·MhNRTs 全长 cDNA 的分离 | 第75页 |
| ·MhNRTs 在平邑甜茶不同组织中的表达 | 第75-76页 |
| ·平邑甜茶的 NO_3ˉ吸收效率 | 第76-78页 |
| ·转基因达载体 pBI121-MhNRTs 的构建及转基因拟南芥的鉴定 | 第78-80页 |
| ·转基因拟南芥根和叶片中15N 含量 | 第80-81页 |
| ·转基因拟南芥根和叶片中 NO_3ˉ含量 | 第81页 |
| ·转基因拟南芥 NO_3ˉ吸收速率变化 | 第81-83页 |
| ·转基因拟南芥植株中其他成员的表达 | 第83-84页 |
| ·转基因拟南芥主花序果荚数统计 | 第84-85页 |
| 4 讨论 | 第85-94页 |
| ·桃新根中受硝态氮调控的基因 | 第85-87页 |
| ·PpDOF1 转录因子影响拟南芥根系氮含量和花序发育 | 第87-88页 |
| ·MhSnRK1促进番茄碳同化和氮吸收 | 第88-92页 |
| ·MhNRT 促进拟南芥对 NO_3ˉ的吸收 | 第92-94页 |
| 5 结论 | 第94-95页 |
| 参考文献 | 第95-111页 |
| 附表 | 第111-121页 |
| 论文表格中用到的公式 | 第121-122页 |
| 致谢 | 第122-123页 |
| 攻读学位期间发表论文情况 | 第123页 |
