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酪蛋白激酶2结合并磷酸化ataxin-3

摘要第1-5页
ABSTRACT第5-8页
缩略词第8-10页
第一章 绪论(Ataxin-3 的研究进展)第10-17页
   ·Ataxin-3 与脊髓小脑共济失调Ⅲ型(SCA3)/马查多-约瑟夫病(MJD)第10-12页
     ·SCA3/MJD 概述第10-11页
     ·Ataxin-3第11-12页
     ·突变的Ataxin-3 与SCA3/MJD第12页
   ·磷酸化以及酪蛋白激酶2(CK2)与神经退行性疾病第12-17页
     ·磷酸化与神经退行性疾病第12-14页
     ·酪蛋白激酶2(CK2)的结构和功能第14-15页
     ·CK2 底物磷酸化与神经退行性疾病第15-17页
第二章 材料与方法第17-32页
   ·大肠杆菌(JM109 和BL21(DE3))化学感受态细胞的制备第17页
   ·大肠杆菌感受态细胞的转化第17-18页
   ·大肠杆菌质粒DNA 小量抽提第18页
   ·细胞总RNA 的提取及逆转录cDNA第18-19页
   ·聚合酶链式反应(Polymerase Chain Reaction, PCR)第19-20页
   ·DNA 样品的琼脂糖凝胶电泳第20页
   ·从琼脂糖凝胶上回收DNA 片段(TaKaRa Agrose Gel DNA Purification Kit)第20-21页
   ·质粒DNA 或DNA 片段的限制内切性酶酶切第21页
   ·DNA 片段的连接第21页
   ·本论文中所用的质粒载体的构建第21-22页
   ·大肠杆菌中蛋白质诱导表达第22-23页
   ·蛋白质的SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)第23-25页
   ·GST-Tag 融合蛋白的小量纯化第25页
   ·His-Tag 融合蛋白的小量纯化第25-26页
   ·GST Pull-down第26页
   ·体外磷酸化反应(In Vitro Phosphorylation Assay)第26-27页
   ·Western Blot第27-28页
   ·细胞培养第28-29页
   ·细胞转染(脂质体转染法)第29-30页
   ·免疫共沉淀(Co-immunocipitation, Co-IP)第30-32页
第三章 结果与讨论第32-40页
   ·结果第32-38页
     ·体外ataxin-3 与CK2 的相互作用第32-34页
     ·在293 细胞中正常和扩展突变型ataxin-3 只和CK2β亚单位相互作用,而与α亚单位没有结合第34-36页
     ·正常和扩展突变型ataxin-3 都可以被CK2 磷酸化第36-38页
   ·讨论第38-40页
参考文献第40-44页
致谢第44-45页
在读期间发表的学术论文与取得的其他研究成果第45页

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