| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-11页 |
| 1 引言 | 第11-23页 |
| ·立题的背景和意义 | 第11-12页 |
| ·蜡样芽孢杆菌简介 | 第12-14页 |
| ·蜡样芽孢杆菌生物学特征 | 第13页 |
| ·蜡样芽孢杆菌致病性 | 第13-14页 |
| ·蜡样芽孢杆菌临床症状 | 第14页 |
| ·蜡样芽孢杆菌流行病学 | 第14页 |
| ·食源性致病菌的相关检测方法 | 第14-16页 |
| ·微生物专用酶快速反应系统的检测技术 | 第14-15页 |
| ·利用肠毒素的快速检测方法 | 第15-16页 |
| ·食品中蜡样芽孢杆菌检测方法研究现状 | 第16-17页 |
| ·常规的检测方法 | 第16页 |
| ·肠毒素的快速检测方法 | 第16-17页 |
| ·环介导等温扩增(LAMP)技术及应用 | 第17-22页 |
| ·LAMP的基本特点 | 第17页 |
| ·LAMP反应的特殊性及其反应体系 | 第17-19页 |
| ·LAMP工作原理 | 第19-21页 |
| ·环介导等温扩增技术(LAMP)的应用 | 第21-22页 |
| ·研究内容 | 第22-23页 |
| 2 材料与方法 | 第23-35页 |
| ·试验材料 | 第23-24页 |
| ·试验菌株 | 第23页 |
| ·仪器和设备 | 第23页 |
| ·主要培养基 | 第23-24页 |
| ·样品与生化试剂 | 第24页 |
| ·基因组的提取 | 第24-25页 |
| ·菌种的培养 | 第24-25页 |
| ·蜡样芽孢杆菌基因组的提取 | 第25页 |
| ·LAMP引物设计及LAMP的主要操作 | 第25-28页 |
| ·引物设计 | 第25-27页 |
| ·LAMP主要操作 | 第27-28页 |
| ·LAMP检测条件优化 | 第28-29页 |
| ·适宜Mg~(2+)浓度选择 | 第28页 |
| ·添加甜菜碱对试验结果的影响 | 第28页 |
| ·添加BST酶量对试验结果的影响 | 第28-29页 |
| ·温度梯度 | 第29页 |
| ·时间梯度 | 第29页 |
| ·引物对LAMP反应的影响 | 第29页 |
| ·引物特异性的检测 | 第29-30页 |
| ·蜡样芽孢杆菌的灵敏度检测 | 第30页 |
| ·LAMP反应灵敏度 | 第30页 |
| ·PCR反应灵敏度 | 第30页 |
| ·LAMP结果检测 | 第30-31页 |
| ·LAMP结果检测 | 第30页 |
| ·LAMP结果酶切分析 | 第30页 |
| ·凝胶成像方法检测LAMP结果 | 第30-31页 |
| ·LAMP检测人工污染的蜡样芽孢杆菌的方法比较 | 第31-33页 |
| ·溶剂提取热裂解法 | 第31页 |
| ·普通热裂解法 | 第31页 |
| ·试剂盒提取法 | 第31-32页 |
| ·FDA提取DNA法 | 第32页 |
| ·饱和酚提取法 | 第32-33页 |
| ·FTA滤膜法 | 第33页 |
| ·LAMP从食品(消毒乳)中检测蜡样芽孢杆菌的方法评价 | 第33-35页 |
| ·人工污染消毒乳中蜡样芽孢杆菌的DNA提取 | 第33页 |
| ·人工污染消毒乳中蜡样芽孢杆菌LAMP检测检出限 | 第33-34页 |
| ·实样消毒乳中蜡样芽孢杆菌检测 | 第34页 |
| ·实样消毒乳中蜡样芽孢杆菌检测方法比较 | 第34-35页 |
| 3 结果与分析 | 第35-49页 |
| ·基因组DNA结果分析 | 第35页 |
| ·基因组DNA的提取 | 第35页 |
| ·LAMP分析 | 第35-39页 |
| ·第一套引物建立体系 | 第35-37页 |
| ·第二套引物建立体系 | 第37-39页 |
| ·LAMP反应条件优化结果 | 第39-42页 |
| ·最适Mg~(2+)浓度选择 | 第39页 |
| ·添加甜菜碱对试验结果的影响 | 第39-40页 |
| ·添加BST酶量对试验结果的影响 | 第40页 |
| ·温度梯度 | 第40-41页 |
| ·时间梯度 | 第41页 |
| ·引物对试验的影响 | 第41-42页 |
| ·特异性的研究 | 第42-43页 |
| ·蜡样芽孢杆菌的灵敏度 | 第43-44页 |
| ·LAMP检测蜡样芽孢杆菌的灵敏度 | 第43页 |
| ·PCR方法检测蜡样芽孢杆菌的灵敏度 | 第43-44页 |
| ·酶切分析 | 第44-46页 |
| ·LAMP产物酶切原理 | 第44-45页 |
| ·LAMP酶切理论分析 | 第45页 |
| ·LAMP产物酶切结果 | 第45-46页 |
| ·LAMP产物结果荧光分析 | 第46页 |
| ·LAMP检测人工污染的蜡样芽孢杆菌的方法比较 | 第46-47页 |
| ·实际样品中的检测 | 第47-49页 |
| 4 讨论 | 第49-52页 |
| ·LAMP反应程序优化 | 第49-50页 |
| ·引物的确定 | 第49页 |
| ·体系优化的确定 | 第49-50页 |
| ·LAMP方法检测蜡样芽孢杆菌方法学评价 | 第50-51页 |
| ·本研究的经验总结 | 第50-51页 |
| ·与先前已发表过的研究工作的异同 | 第51页 |
| ·本研究的意义及价值 | 第51-52页 |
| 5 结论 | 第52-53页 |
| 参考文献 | 第53-59页 |
| 在读期间发表的学术论文 | 第59-60页 |
| 作者简历 | 第60-61页 |
| 致谢 | 第61页 |