| 摘要 | 第4-6页 |
| ABSTRACT | 第6-7页 |
| 第一章 绪论 | 第16-30页 |
| 1.1 研究背景简介 | 第16-17页 |
| 1.2 酶固定化的意义 | 第17-19页 |
| 1.2.1 固定化酶的优点 | 第17-18页 |
| 1.2.2 固定化酶的应用 | 第18-19页 |
| 1.3 酶固定的载体 | 第19-21页 |
| 1.3.1 酶固定载体的种类 | 第19-20页 |
| 1.3.2 纳米磁球载体的性质 | 第20-21页 |
| 1.3.3 纳米磁球载体的制备 | 第21页 |
| 1.4 酶固定方法 | 第21-25页 |
| 1.5 酶固定的研究进展 | 第25-27页 |
| 1.6 本课题的研究意义及方法 | 第27-30页 |
| 1.6.1 研究意义 | 第27-28页 |
| 1.6.2 研究方法 | 第28-30页 |
| 第二章 纳米磁球Fe_3O_4/壳-Ni~(2+)的制备 | 第30-40页 |
| 2.1 引言 | 第30页 |
| 2.2 实验材料 | 第30页 |
| 2.3 实验方法 | 第30-33页 |
| 2.3.1 Fe_3O_4@SiO_2(TMS-EDTA)-Ni~(2+)的制备 | 第30-32页 |
| 2.3.1.1 制备原理 | 第30-31页 |
| 2.3.1.2 制备步骤 | 第31-32页 |
| 2.3.2 Fe_3O_4/PVIM-Ni~(2+)的制备 | 第32-33页 |
| 2.3.2.1 制备原理 | 第32页 |
| 2.3.2.2 制备步骤 | 第32-33页 |
| 2.4 结果与讨论 | 第33-38页 |
| 2.4.1 Fe_3O_4@SiO_2(TMS-EDTA)-Ni~(2+)的FTIR表征及分析 | 第33-35页 |
| 2.4.2 Fe_3O_4/PVIM-Ni~(2+)的TEM表征及分析 | 第35-36页 |
| 2.4.3 磁球Fe_3O_4/PVIM-Ni~(2+)的进一步表征及分析 | 第36-38页 |
| 2.5 本章小结 | 第38-40页 |
| 第三章 Au包覆的核壳式纳米微球的制备 | 第40-50页 |
| 3.1 引言 | 第40页 |
| 3.2 实验材料 | 第40页 |
| 3.3 实验方法 | 第40-45页 |
| 3.3.1 Fe_3O_4-PEI-Au_(coat)的制备 | 第40-42页 |
| 3.3.1.1 制备原理 | 第40-41页 |
| 3.3.1.2 制备步骤 | 第41-42页 |
| 3.3.2 SiO_2/Au纳米微球的制备 | 第42-44页 |
| 3.3.2.1 制备原理 | 第42-43页 |
| 3.3.2.2 制备步骤 | 第43-44页 |
| 3.3.3 Fe_3O_4-Au纳米磁球的制备 | 第44-45页 |
| 3.3.3.1 制备原理 | 第44页 |
| 3.3.3.2 制备步骤 | 第44-45页 |
| 3.4 结果与讨论 | 第45-48页 |
| 3.4.1 Fe_3O_4-PEI-Aucoat的透镜表征及分析 | 第45页 |
| 3.4.2 SiO_2/Au纳米微球的透镜表征及分析 | 第45-46页 |
| 3.4.3 Fe_3O_4-Au纳米磁球的表征及分析 | 第46-48页 |
| 3.4.3.1 Fe_3O_4-Au纳米磁球的透镜表征及分析 | 第46-47页 |
| 3.4.3.2 Fe_3O_4-Au纳米磁球的红外表征及分析 | 第47-48页 |
| 3.5 本章小结 | 第48-50页 |
| 第四章 支架蛋白及融合荧光蛋白的基因构建和表达 | 第50-60页 |
| 4.1 引言 | 第50页 |
| 4.2 实验材料 | 第50-51页 |
| 4.3 实验方法 | 第51-56页 |
| 4.3.1 蛋白基因构建设计 | 第51-52页 |
| 4.3.1.1 融合蛋白基因构建原理 | 第51-52页 |
| 4.3.1.2 Ⅱ类支架蛋白基因构建原理 | 第52页 |
| 4.3.2 引物序列设计 | 第52-53页 |
| 4.3.3 蛋白基因构建 | 第53-55页 |
| 4.3.4 蛋白的过表达及其定性表征过程 | 第55-56页 |
| 4.3.4.1 蛋白的发酵表达 | 第55-56页 |
| 4.3.4.2 蛋白的SDS-PAGE定性表征 | 第56页 |
| 4.4 结果与讨论 | 第56-59页 |
| 4.4.1 构建的质粒 | 第56-57页 |
| 4.4.2 蛋白表达验证 | 第57-59页 |
| 4.5 本章小结 | 第59-60页 |
| 第五章 支架蛋白的尺寸优化及功能验证 | 第60-70页 |
| 5.1 引言 | 第60页 |
| 5.2 实验材料 | 第60页 |
| 5.3 实验方法 | 第60-62页 |
| 5.3.1 基于Ⅰ类支架蛋白的尺寸优化研究 | 第60-62页 |
| 5.3.1.1 Ⅰ类支架蛋白pET22b-olpB系列及荧光蛋白的表达 | 第60-61页 |
| 5.3.1.2 考马斯亮蓝染色法(Bradford法)测定蛋白含量 | 第61页 |
| 5.3.1.3 荧光蛋白标准曲线的测定 | 第61页 |
| 5.3.1.4 磁性镍球固定pET28A-eGFP荧光蛋白 | 第61页 |
| 5.3.1.5 镍球固定pET22b-olpB系列及pETDuet-GFP-docCipA蛋白 | 第61-62页 |
| 5.3.2 基于Ⅱ类支架蛋白的功能验证研究 | 第62页 |
| 5.4 结果与讨论 | 第62-69页 |
| 5.4.1 基于Ⅰ类支架蛋白的尺寸优化分析 | 第62-66页 |
| 5.4.1.1 pET22b-olpB系列支架及荧光蛋白的表达 | 第62-64页 |
| 5.4.1.2 镍球固定pET28A-eGFP荧光蛋白定性表征 | 第64页 |
| 5.4.1.3 镍球固定pET22b-olpB系列及pETDuet-GFP-docCipA定量表征 | 第64-66页 |
| 5.4.2 基于Ⅱ类支架蛋白的功能验证分析 | 第66-69页 |
| 5.4.2.1 Ⅱ类支架及相应融合荧光蛋白的表达 | 第66页 |
| 5.4.2.2 镍球固定pET22b-GFP-docC和pET22b-DsRed-docA的定性表征 | 第66页 |
| 5.4.2.3 镍球固定pET22b-GFP-docC和pET22b-DsRed-docA的定量表征 | 第66-69页 |
| 5.5 本章小结 | 第69-70页 |
| 第六章 双荧光蛋白的比例可控式共固定研究 | 第70-76页 |
| 6.1 引言 | 第70页 |
| 6.2 实验材料 | 第70页 |
| 6.3 实验方法 | 第70-71页 |
| 6.3.1 磁球负载支架蛋白 | 第70页 |
| 6.3.2 磁球负载荧光蛋白的定性测定 | 第70页 |
| 6.3.3 磁球负载荧光蛋白的定量测定 | 第70-71页 |
| 6.4 结果与讨论 | 第71-74页 |
| 6.4.1 磁球负载支架蛋白的表征 | 第71页 |
| 6.4.2 磁球负载荧光蛋白的定性表征 | 第71-72页 |
| 6.4.3 磁球负载荧光蛋白的定量表征 | 第72-74页 |
| 6.5 本章小结 | 第74-76页 |
| 第七章 结论及展望 | 第76-78页 |
| 7.1 结论 | 第76-77页 |
| 7.2 展望 | 第77-78页 |
| 参考文献 | 第78-86页 |
| 附录 | 第86-92页 |
| 致谢 | 第92-94页 |
| 研究成果及发表的学术论文 | 第94-96页 |
| 作者及导师简介 | 第96-97页 |
| 附件 | 第97-98页 |
