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氮素调控化感水稻相关基因差异表达与作用机制研究

摘要第1-8页
Abstract第8-10页
1.前言第10-19页
   ·国内外的研究现状第10-14页
     ·水稻化感种质资源的筛选第10-11页
     ·环境胁迫下化感作用潜力的变化第11-12页
     ·化感作用的分子生物学研究第12-14页
   ·基因差异表达的研究方法第14-19页
     ·减法杂交(subtractive hybridization)第14页
     ·mRNA差异显示PCR(mRNA differential display reverse transcription PCR)第14页
     ·cDNA代表性差异分析(cDNA representaiional difference analysis,cDNA-RDA)第14-15页
     ·cDNA-AFLP技术第15页
     ·基因芯片技术第15-16页
     ·抑制消减杂交技术(suppression subtractive hybridzation,SSH)第16-17页
     ·实时荧光定量PCR(Real-time Flurescent Quantitative Polymerase Chain Reaction)第17-19页
   ·本研究的目的和意义第19页
2.材料与方法第19-34页
   ·实验材料第19-22页
     ·供试材料第19页
     ·主要试剂及试剂盒第19-20页
     ·主要仪器第20-21页
     ·主要试剂溶液及配制方法第21-22页
   ·实验设计第22页
   ·实验方法第22-34页
     ·总RNA提取第22页
     ·痕量基因组DNA的DNase处理第22-23页
     ·抑制差减文库构建第23-27页
     ·PCR产物的连接转化第27-29页
     ·重组子的鉴定第29-33页
     ·克隆子的测序及序列分析第33页
     ·基因差异表达分析第33-34页
3.结果与分析第34-42页
   ·抑制消减杂交结果第34-40页
     ·RNA的含量和质量第34页
     ·双链cDNA的合成第34页
     ·双链cDNA的RsaⅠ酶切分析第34-35页
     ·SSH的结果第35页
     ·差异表达基因的T载体克隆第35-36页
     ·对差异表达基因的进一步筛选第36页
     ·差异基因的测序与序列分析第36-40页
   ·实时荧光定量分析第40-42页
     ·PCR产物的特异性检验第40-41页
     ·PAL和细胞色素P450的相对表达量分析第41-42页
4.讨论第42-46页
   ·SSH结合FQ-PCR技术在分析植物对逆境响应的分子机制的优越性第42-43页
   ·氮营养胁迫诱导水稻化感作用增强的分子机理第43-45页
   ·本实验今后的研究方向第45-46页
参考文献第46-54页
致谢第54-55页
在学期间发表的论文第55页

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