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海水养殖鱼蛋白质感染因子(PrPC)的研究

独创性声明第1页
学位论文版权使用授权书第3-6页
中文摘要第6-8页
英文摘要第8-10页
第一章 文献综述第10-35页
 1、蛋白质感染因子(prions)的定义第10页
 2、蛋白质感染因子(prions)的研究背景第10-22页
   ·蛋白质感染因子(prions)的结构研究第11-13页
   ·蛋白质感染因子(prions)的功能研究第13-15页
   ·蛋白质致病因子的发生模型研究第15-16页
   ·蛋白质感染因子传播的种间障碍研究第16页
   ·蛋白质感染因子病害的预防和治疗第16-17页
   ·其他类型的蛋白质感染因子第17-18页
   ·Prion-like 和shadoo prion第18-19页
   ·鱼类蛋白质感染因子研究现状第19-22页
 3、真核生物基因表达调控研究进展第22-34页
   ·真核生物基因表达调控的特点第22-23页
   ·真核生物基因调控的顺式作用元件第23-27页
   ·真核生物基因调控的反式作用因子第27-29页
   ·真核生物基因转录的启动和调节第29-30页
   ·启动子的检测第30-32页
   ·DNA 结合蛋白的检测第32-33页
   ·基因转录活性的检测第33-34页
 4、本研究的意义与内容第34-35页
第二章 鲈鱼和牙鲆 Prion基因的克隆与分析第35-54页
 1 材料与方法第35-41页
   ·材料第35页
   ·总RNA 的提取第35-36页
   ·cDNA 的合成及cDNA PCR 文库的构建第36-39页
   ·引物设计第39页
   ·鲈鱼、牙鲆PrP 编码基因片段扩增第39-40页
   ·连接测序第40页
   ·PrP cDNA 的3’RACE 与5’RACE第40页
   ·数据处理第40-41页
 2 结果第41-49页
   ·鲈鱼和牙鲆全序列PrP 基因的克隆第41-44页
   ·鲈鱼、牙鲆PrP 基因结构组成分析第44-49页
 3 讨论第49-54页
   ·PrP 基因的克隆方法第49-50页
   ·PrP 基因的结构变化与功能第50-51页
   ·序列进化与鱼类感染Prions 的风险性分析第51-54页
第三章 牙鲆PrP 基因结构及5’侧翼序列的克隆与分析第54-74页
 1 材料方法第54-60页
   ·材料第54页
   ·DNA 的提取第54-55页
   ·引物设计与合成第55-56页
   ·Genome Walking 文库的构建第56-60页
   ·序列的拼接第60页
 2 结果与分析第60-65页
 3 讨论第65-74页
   ·基因组水平上的进化第65页
   ·5’侧翼序列分析第65-67页
   ·启动区域的比较第67-74页
第四章 PrP 基因在牙鲆组织中的表达第74-90页
 1 材料与方法第74-78页
   ·材料第74页
   ·样品处理第74-75页
   ·总RNA 的提取第75-76页
   ·逆转录反应第76页
   ·引物设计第76-77页
   ·牙鲆Prp 基因的表达分析第77-78页
   ·图像处理第78页
 2 结果第78-87页
   ·总RNA 的提取第78-79页
   ·组织表达特异第79-80页
   ·肿瘤相关性分析第80-82页
   ·Ca~(2+)对PrpC 的影响分析第82-87页
 3 讨论第87-90页
总结第90-91页
参考文献第91-108页
致谢第108-109页
发表文章第109页

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