独创性声明 | 第1页 |
学位论文版权使用授权书 | 第3-6页 |
中文摘要 | 第6-8页 |
英文摘要 | 第8-10页 |
第一章 文献综述 | 第10-35页 |
1、蛋白质感染因子(prions)的定义 | 第10页 |
2、蛋白质感染因子(prions)的研究背景 | 第10-22页 |
·蛋白质感染因子(prions)的结构研究 | 第11-13页 |
·蛋白质感染因子(prions)的功能研究 | 第13-15页 |
·蛋白质致病因子的发生模型研究 | 第15-16页 |
·蛋白质感染因子传播的种间障碍研究 | 第16页 |
·蛋白质感染因子病害的预防和治疗 | 第16-17页 |
·其他类型的蛋白质感染因子 | 第17-18页 |
·Prion-like 和shadoo prion | 第18-19页 |
·鱼类蛋白质感染因子研究现状 | 第19-22页 |
3、真核生物基因表达调控研究进展 | 第22-34页 |
·真核生物基因表达调控的特点 | 第22-23页 |
·真核生物基因调控的顺式作用元件 | 第23-27页 |
·真核生物基因调控的反式作用因子 | 第27-29页 |
·真核生物基因转录的启动和调节 | 第29-30页 |
·启动子的检测 | 第30-32页 |
·DNA 结合蛋白的检测 | 第32-33页 |
·基因转录活性的检测 | 第33-34页 |
4、本研究的意义与内容 | 第34-35页 |
第二章 鲈鱼和牙鲆 Prion基因的克隆与分析 | 第35-54页 |
1 材料与方法 | 第35-41页 |
·材料 | 第35页 |
·总RNA 的提取 | 第35-36页 |
·cDNA 的合成及cDNA PCR 文库的构建 | 第36-39页 |
·引物设计 | 第39页 |
·鲈鱼、牙鲆PrP 编码基因片段扩增 | 第39-40页 |
·连接测序 | 第40页 |
·PrP cDNA 的3’RACE 与5’RACE | 第40页 |
·数据处理 | 第40-41页 |
2 结果 | 第41-49页 |
·鲈鱼和牙鲆全序列PrP 基因的克隆 | 第41-44页 |
·鲈鱼、牙鲆PrP 基因结构组成分析 | 第44-49页 |
3 讨论 | 第49-54页 |
·PrP 基因的克隆方法 | 第49-50页 |
·PrP 基因的结构变化与功能 | 第50-51页 |
·序列进化与鱼类感染Prions 的风险性分析 | 第51-54页 |
第三章 牙鲆PrP 基因结构及5’侧翼序列的克隆与分析 | 第54-74页 |
1 材料方法 | 第54-60页 |
·材料 | 第54页 |
·DNA 的提取 | 第54-55页 |
·引物设计与合成 | 第55-56页 |
·Genome Walking 文库的构建 | 第56-60页 |
·序列的拼接 | 第60页 |
2 结果与分析 | 第60-65页 |
3 讨论 | 第65-74页 |
·基因组水平上的进化 | 第65页 |
·5’侧翼序列分析 | 第65-67页 |
·启动区域的比较 | 第67-74页 |
第四章 PrP 基因在牙鲆组织中的表达 | 第74-90页 |
1 材料与方法 | 第74-78页 |
·材料 | 第74页 |
·样品处理 | 第74-75页 |
·总RNA 的提取 | 第75-76页 |
·逆转录反应 | 第76页 |
·引物设计 | 第76-77页 |
·牙鲆Prp 基因的表达分析 | 第77-78页 |
·图像处理 | 第78页 |
2 结果 | 第78-87页 |
·总RNA 的提取 | 第78-79页 |
·组织表达特异 | 第79-80页 |
·肿瘤相关性分析 | 第80-82页 |
·Ca~(2+)对PrpC 的影响分析 | 第82-87页 |
3 讨论 | 第87-90页 |
总结 | 第90-91页 |
参考文献 | 第91-108页 |
致谢 | 第108-109页 |
发表文章 | 第109页 |