| 摘要 | 第1-4页 |
| ABSTRACT | 第4-8页 |
| 插图及附表清单 | 第8-10页 |
| 縮略词表 | 第10-11页 |
| 第一章 引言 | 第11-23页 |
| ·鸡传染性法氏囊病 | 第11-15页 |
| ·鸡传染性法氏囊病背景 | 第11页 |
| ·鸡传染性法氏囊病毒病原学 | 第11页 |
| ·鸡传染性法氏囊病毒分子病原学 | 第11页 |
| ·病毒的繁殖 | 第11-12页 |
| ·免疫抑制 | 第12页 |
| ·鸡传染性法氏囊病毒的检测技术 | 第12-15页 |
| ·参考品概述 | 第15-16页 |
| ·定义 | 第15页 |
| ·特点 | 第15-16页 |
| ·分级 | 第16页 |
| ·作用 | 第16页 |
| ·生物参考品 | 第16-20页 |
| ·定义 | 第16页 |
| ·分级与种类 | 第16-17页 |
| ·国内外现状 | 第17页 |
| ·活疫苗标准品(参考品)使用情况统计 | 第17-19页 |
| ·生物参考品的稳定性 | 第19页 |
| ·疫苗参考品的定值 | 第19-20页 |
| ·课题研究的目的和意义 | 第20-23页 |
| 第二章 鸡传染性法氏囊病中等毒力活疫苗(B87株)国家参考品的制备 | 第23-36页 |
| ·前言 | 第23-24页 |
| ·实验材料 | 第24页 |
| ·试验用仪器 | 第24页 |
| ·试验用试剂 | 第24页 |
| ·试验用其他材料 | 第24页 |
| ·实验方法 | 第24-25页 |
| ·参考品制备与检验 | 第25-28页 |
| ·实验结果 | 第28-34页 |
| ·参考品候选物的筛选 | 第28-30页 |
| ·参考品制备和成品的检验 | 第30-34页 |
| ·讨论 | 第34-35页 |
| ·鸡传染性法氏囊病中等毒力活疫苗(B87株)国家参考品的制备与检验 | 第34-35页 |
| ·鸡传染性法氏囊病中等毒力活疫苗(B87株)国家参考品稳定性试验 | 第35页 |
| ·小结 | 第35-36页 |
| 第三章 鸡传染性法氏囊病中等毒力活疫苗(B87株)细胞间接免疫荧光方法的建立 | 第36-42页 |
| ·前言 | 第36页 |
| ·实验材料 | 第36-37页 |
| ·试验用仪器 | 第36页 |
| ·试验用试剂 | 第36页 |
| ·试验用其他材料 | 第36-37页 |
| ·实验方法 | 第37-38页 |
| ·Vero细胞的复苏 | 第37页 |
| ·间接免疫荧光方法的建立 | 第37-38页 |
| ·实验结果 | 第38-40页 |
| ·高免血清及二抗适宜稀释浓度的确定 | 第38页 |
| ·接毒量的确定 | 第38-39页 |
| ·敏感性试验 | 第39页 |
| ·ELD_(50)值与TCID_(50)值的对比 | 第39-40页 |
| ·讨论 | 第40-41页 |
| ·高免血清与荧光抗体使用浓度的确定 | 第40页 |
| ·传统ELD_(50)与TCID_(50)结果分析 | 第40-41页 |
| ·小结 | 第41-42页 |
| 第四章 鸡传染性法氏囊病中等毒力活疫苗(B87株)荧光定量RT-PCR方法的建立 | 第42-56页 |
| ·前言 | 第42页 |
| ·实验材料 | 第42-43页 |
| ·试验用仪器 | 第42页 |
| ·试验试剂 | 第42-43页 |
| ·试验用其他材料 | 第43页 |
| ·实验方法 | 第43-46页 |
| ·引物与探针的设计 | 第43页 |
| ·标准质粒的构建 | 第43-45页 |
| ·荧光定量RT-PCR反应条件的建立和优化 | 第45页 |
| ·引物特异性试验 | 第45页 |
| ·检验灵敏性试验 | 第45页 |
| ·稳定性试验 | 第45-46页 |
| ·重复性试验 | 第46页 |
| ·实验结果 | 第46-54页 |
| ·标准质粒的构建 | 第46-48页 |
| ·引物退火温度的优化 | 第48页 |
| ·引物、探针浓度的优化 | 第48页 |
| ·引物特异性试验 | 第48-49页 |
| ·检验灵敏性试验 | 第49-50页 |
| ·稳定性试验 | 第50-52页 |
| ·重复性试验 | 第52页 |
| ·不同效力值疫苗检测 | 第52-53页 |
| ·失活疫苗荧光定量检测 | 第53-54页 |
| ·ICC/荧光定量RT-PCR方法检测灭活样品中的IBDV RNA | 第54页 |
| ·讨论 | 第54-55页 |
| ·小结 | 第55-56页 |
| 第五章 鸡传染性法氏囊病中等毒力活疫苗(B87株)国家参考品协作标定 | 第56-60页 |
| ·前言 | 第56页 |
| ·实验材料 | 第56页 |
| ·实验方法 | 第56-57页 |
| ·定值方法 | 第56页 |
| ·协作单位的确定 | 第56页 |
| ·发放协作标定材料 | 第56-57页 |
| ·协作标定结果分析方法 | 第57页 |
| ·鸡胚半数致死量(ELD_(50)试验所有定值数据的格拉布斯(Grubbs)检验 | 第57页 |
| ·鸡胚半数致死量(ELD_(50))试验所有定值数据的正态性检验 | 第57页 |
| ·鸡胚半数致死量(ELD_(50))试验定值结果的确定及不确定度的评定 | 第57页 |
| ·实验结果 | 第57-59页 |
| ·定值数据的格拉布斯(Grubbs)检验 | 第57-58页 |
| ·定值数据的正态性检验 | 第58页 |
| ·定值 | 第58-59页 |
| ·讨论 | 第59页 |
| ·小结 | 第59-60页 |
| 第六章 结论 | 第60-61页 |
| 参考文献 | 第61-66页 |
| 致谢 | 第66-67页 |
| 附录一 鸡传染性法氏囊中等毒力活疫前(B87株)国家参考品研究技术路线 | 第67-68页 |
| 附录二 本实验用到的溶液和培养基 | 第68-70页 |
| 附录三 鸡传染性法氏囊中等毒力活疫苗(B87株)国家参考品协作标定方案 | 第70-72页 |
| 作者简历 | 第72页 |
