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鸡传染性支气管炎病毒生产用种毒的分子生物学鉴定方法的研究

摘要第1-6页
ABSTRACT第6-11页
插图与附表清单第11-13页
缩略语中英文对照表第13-14页
第一章 引言第14-27页
   ·国内外研究现状第14-24页
     ·鸡传染性支气管炎流行病学研究概况第14-15页
     ·鸡传染性支气管炎病毒病原学特点第15-20页
     ·IBV各毒株的鉴定方法第20-22页
     ·鸡传染性支气管炎的免疫机理第22-24页
     ·国内外IBV疫苗研究进展第24页
   ·研究内容与技术路线第24-26页
     ·研究内容第24-25页
     ·技术路线第25-26页
   ·研究目的和意义第26-27页
第二章 鸡传染性支气管炎病毒种毒的S1基因变异情况分析第27-45页
   ·试验材料第27-31页
     ·毒株第27-30页
     ·鸡胚第30页
     ·主要试剂及其配制方法第30-31页
     ·主要仪器设备第31页
     ·试验用材料第31页
   ·试验方法第31-33页
     ·病毒的繁殖第31页
     ·引物设计第31-32页
     ·病毒RNA的提取第32页
     ·病毒S1基因的扩增第32页
     ·PCR产物鉴定及纯化回收第32-33页
     ·S1基因序列的测定、比对、分析序列差异第33页
     ·S1基因序列的分析、比较第33页
   ·试验结果第33-43页
     ·IBV各个种毒株S1基因的扩增结果第33-35页
     ·IBV S1基因序列比较及不同毒株间序列差异分析第35-37页
     ·不同基因型IBV毒株在S1基因部分碱基差异第37-43页
   ·讨论与小结第43-45页
     ·IBV毒株特异性鉴定第43页
     ·IBV种毒株S1基因序列分析第43-45页
第三章 IBV毒株分子生物学鉴别方法的研究第45-57页
   ·试验材料第45-47页
     ·毒株第45-46页
     ·鸡胚第46页
     ·主要酶与试剂第46页
     ·主要仪器设备第46-47页
   ·试验方法第47-51页
     ·病毒RNA的提取第47页
     ·参考序列下载第47页
     ·引物的设计第47-49页
     ·反转录及PCR第49页
     ·PCR产物凝胶电泳及电泳图谱拍照第49页
     ·PCR产物纯化第49-50页
     ·引物对B(NaeⅠ(+)、Nae Ⅰ(-))的PCR纯化产物的酶切第50页
     ·引物特异性鉴定第50页
     ·引物敏感性鉴定第50-51页
     ·建立的分子生物学鉴定方法的验证第51页
   ·结果第51-55页
     ·引物对A的PCR扩增产物检测结果第51页
     ·引物对B的PCR扩增产物检测结果第51-52页
     ·引物对B扩增的PCR产物酶切结果第52页
     ·引物对C扩增的PCR产物检测结果第52页
     ·引物的特异性鉴定第52-53页
     ·引物的敏感性鉴定第53-55页
   ·讨论与小结第55-57页
     ·IBV不同基因型之间的分子生物学鉴别方法第55-56页
     ·引物特异性及敏感性分析第56页
     ·建立的分子生物学鉴定方法的验证分析第56-57页
第四章 分子生物学鉴别方法的市场应用第57-65页
   ·试验材料第57-58页
     ·IBV疫苗第57页
     ·主要酶与试剂第57-58页
     ·主要仪器设备第58页
   ·试验方法第58-61页
     ·病毒RNA的提取第58页
     ·反转录及PCR第58-59页
     ·PCR产物凝胶电泳及电泳图谱拍照第59页
     ·PCR产物纯化第59页
     ·引物对B(Nae Ⅰ(+)、Nae Ⅰ(-))的PCR纯化产物的酶切第59-60页
     ·IBV活疫苗样品第60-61页
   ·结果第61-63页
     ·特异性引物对疫苗的检测结果第62页
     ·引物对C和引物对D经巢式PCR扩增出的4/91毒株的序列第62-63页
   ·讨论与小结第63-65页
第五章 结论第65-66页
   ·主要结论第65页
   ·创新点第65页
   ·有待进一步解决的问题第65-66页
参考文献第66-71页
致谢第71-72页
作者简历第72页

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