| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-7页 |
| 插图和附表清单 | 第7-9页 |
| 缩略词表 | 第9-11页 |
| 第一章 引言 | 第11-29页 |
| ·猪繁殖与呼吸综合征病毒概述 | 第11-18页 |
| ·猪繁殖与呼吸综合征 | 第11页 |
| ·猪繁殖与呼吸综合征病毒 | 第11-14页 |
| ·猪繁殖与呼吸综合征疫苗 | 第14-16页 |
| ·PRRSV的免疫学进展 | 第16-18页 |
| ·猪繁殖与呼吸综合征诊断方法研究进展 | 第18-23页 |
| ·诊断原则 | 第18页 |
| ·诊断方法 | 第18-22页 |
| ·分型诊断 | 第22-23页 |
| ·实时荧光定量PCR简介 | 第23-27页 |
| ·实时荧光定量PCR原理 | 第23页 |
| ·两个重要参数 | 第23-24页 |
| ·实时荧光定量PCR的定量方法 | 第24-25页 |
| ·实时荧光定量PCR的检测方法 | 第25-26页 |
| ·实时荧光定量PCR技术的展望 | 第26-27页 |
| ·研究目的与意义 | 第27页 |
| ·研究内容 | 第27-28页 |
| ·外周血淋巴细胞亚群分析 | 第27-28页 |
| ·双重荧光定量RT-PCR方法的建立 | 第28页 |
| ·技术路线 | 第28-29页 |
| 第二章 高致病性PRRSV GD强弱毒感染猪外周血淋巴细胞亚群的变化 | 第29-40页 |
| ·材料 | 第29页 |
| ·实验动物和毒株 | 第29页 |
| ·试剂 | 第29页 |
| ·方法 | 第29-31页 |
| ·动物实验 | 第29-30页 |
| ·猪外周血淋巴细胞亚群数量的测定 | 第30页 |
| ·粒细胞及单核细胞数量的确定 | 第30页 |
| ·B细胞数量的测定 | 第30页 |
| ·三色流式细胞术测定猪外周血T淋巴细胞亚群数量 | 第30-31页 |
| ·血清中抗体的检测 | 第31页 |
| ·结果 | 第31-39页 |
| ·病毒接种后实验猪的体温测定结果 | 第31-32页 |
| ·PRRSV GD强弱毒感染后外周血白细胞数量的变化 | 第32页 |
| ·PRRSV GD强弱毒感染后外周血淋巴细胞的数量的变化 | 第32-33页 |
| ·PRRSV GD强弱毒感染后外周血单核细胞的数量的变化 | 第33-34页 |
| ·PRRSV GD强弱毒感染后外周血粒细胞的数量的变化 | 第34页 |
| ·PRRSV GD强弱毒感染后外周血B细胞的数量的变化 | 第34-35页 |
| ·PRRSV GD强弱毒感染后外周血T细胞亚群数量的变化 | 第35-38页 |
| ·PRRSV GD强弱毒感染后外周血中抗体检测的结果 | 第38-39页 |
| ·讨论 | 第39-40页 |
| 第三章 HP-PRRSVGD强、弱毒双重荧光定量RT-PCR鉴别方法的建立 | 第40-64页 |
| ·材料 | 第40-42页 |
| ·毒株以及组织和血清样品 | 第40-41页 |
| ·载体和菌株 | 第41页 |
| ·主要试剂 | 第41-42页 |
| ·方法 | 第42-51页 |
| ·Taqman MGB探针的设计及其引物 | 第42-44页 |
| ·病毒RNA的提取 | 第44页 |
| ·标准品的制备 | 第44-49页 |
| ·反应条件的优化 | 第49-50页 |
| ·标准曲线的绘制及敏感性测定 | 第50-51页 |
| ·方法评价 | 第51页 |
| ·结果 | 第51-63页 |
| ·引物筛选结果 | 第51-52页 |
| ·标准品的制备 | 第52-54页 |
| ·优化的反应体系 | 第54-57页 |
| ·标准曲线的绘制和敏感性实验结果 | 第57-58页 |
| ·可行性实验 | 第58-60页 |
| ·特异性实验 | 第60-61页 |
| ·重复性实验 | 第61-62页 |
| ·与病毒分离方法的比较 | 第62-63页 |
| ·结果 | 第63-64页 |
| 第四章 结论与创新 | 第64-65页 |
| ·结论 | 第64页 |
| ·PRRSV GD强弱毒对淋巴细胞亚群的影响 | 第64页 |
| ·建立高致病性PRRS GD疫苗株与强毒株双重荧光定量RT-PCR鉴别方法的建立 | 第64页 |
| ·评价高致病性PRRS GD疫苗株与强毒株双得荧光定量RT-PCR鉴别方法的建立 | 第64页 |
| ·创新 | 第64-65页 |
| 参考文献 | 第65-70页 |
| 致谢 | 第70-71页 |
| 作者简介 | 第71页 |
