| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-9页 |
| 英文缩略词 | 第9-10页 |
| 第一部分 引言 | 第10-23页 |
| 1. 本研究的目的及意义 | 第10-11页 |
| 2. 植物蔗糖磷酸合成酶(SPS)研究进展 | 第11-16页 |
| ·蔗糖磷酸合成酶的作用及分类 | 第11-14页 |
| ·蔗糖磷酸合成酶基因的克隆及遗传转化植株的表现 | 第14-15页 |
| ·蔗糖磷酸合成酶基因的表达研究 | 第15-16页 |
| 3. 植物基因分离方法研究进展 | 第16-23页 |
| ·序列克隆法 | 第16-17页 |
| ·根据已知基因的序列 | 第16-17页 |
| ·根据 DNA 测序结果 | 第17页 |
| ·功能克隆法 | 第17-18页 |
| ·根据基因表达的蛋白质 | 第17-18页 |
| ·根据基因的表型突变互补功能 | 第18页 |
| ·DNA插入分离法 | 第18-19页 |
| ·图位克隆技术 | 第19-20页 |
| ·消减杂交法 | 第20页 |
| ·差异表达分析法 | 第20-23页 |
| ·cDNA-RAPD分析法 | 第20-21页 |
| ·mRNA差别显示法 | 第21页 |
| ·代表性差式分析法 | 第21-22页 |
| ·抑制消减杂交法 | 第22-23页 |
| 第二部分 番茄果实蔗糖磷酸合成酶基因的克隆 | 第23-42页 |
| 1. 材料与方法 | 第23-29页 |
| ·番茄果实总RNA的提取 | 第23-24页 |
| ·提取RNA所用器皿的处理及溶液配制 | 第23-24页 |
| ·提取的方法与步骤 | 第24页 |
| ·RNA 浓度的测定与质量鉴定 | 第24页 |
| ·番茄果实蔗糖磷酸合成酶基因的克隆 | 第24-29页 |
| ·RT-PCR反应 | 第24-25页 |
| ·目的片段的回收 | 第25-26页 |
| ·连接反应 | 第26页 |
| ·转化 | 第26-27页 |
| ·重组子的 PCR 鉴定 | 第27-29页 |
| ·克隆 cDNA 片段的测序及序列分析 | 第29页 |
| 2. 结果与分析 | 第29-39页 |
| ·番茄果实 RNA 的提取 | 第29页 |
| ·SPS 基因的RT-PCR扩增 | 第29-30页 |
| ·RT-PCR产物的克隆 | 第30页 |
| ·SPS 基因cDNA的测序与分析 | 第30-39页 |
| 3. 讨论 | 第39-42页 |
| · 番茄果实SPS基因序列在品种间存在差异 | 第39页 |
| · 番茄果实SPS基因全长cDNA的获得 | 第39页 |
| · SPS的功能研究 | 第39-40页 |
| ·关于连接反应 | 第40页 |
| ·关于番茄果实总RNA的提取 | 第40-41页 |
| ·RNA的提取难点及对策 | 第41-42页 |
| 第三部分 番茄遗传转化体系的研究 | 第42-51页 |
| 1. 番茄自交系T6 再生体系的优化 | 第42-47页 |
| ·材料与方法 | 第42-44页 |
| ·无菌苗的获得 | 第42-43页 |
| ·外植体的接种 | 第43页 |
| ·分化培养基的优化 | 第43页 |
| ·培养条件 | 第43-44页 |
| ·生根培养基的筛选 | 第44页 |
| ·再生植株驯化移栽 | 第44页 |
| ·结果与分析 | 第44-47页 |
| ·不同表面消毒处理对番茄种子灭菌及萌发的影响 | 第44-45页 |
| ·不同外植体对愈伤诱导及不定芽分化的影响 | 第45页 |
| ·不同的激素配比对愈伤组织的诱导及不定芽分化的影响 | 第45-46页 |
| ·再生植株生根 | 第46-47页 |
| ·再生植株的驯化移栽 | 第47页 |
| 2. 甜瓜果实反义酸性转化酶基因转化番茄自交系T6 的研究 | 第47-50页 |
| ·材料与方法 | 第47-48页 |
| ·卡那霉素的敏感性试验 | 第47-48页 |
| ·菌株、质粒和细菌培养基 | 第48页 |
| ·甜瓜果实反义酸性转化酶基因转化 T6 实验程序 | 第48页 |
| ·结果与分析 | 第48-50页 |
| ·筛选压的确定 | 第48-49页 |
| ·甜瓜果实反义酸性转化酶基因转化T6 的初步结果 | 第49-50页 |
| 3. 讨论 | 第50-51页 |
| ·影响番茄离体再生体系的一些主要因素 | 第50页 |
| ·关于子叶离体培养过程中产生的畸形芽、盲芽的问题 | 第50页 |
| ·关于生根壮苗的问题 | 第50-51页 |
| ·未转化细胞对卡那霉素的抗性问题 | 第51页 |
| 第四部分结论 | 第51-52页 |
| 参考文献 | 第52-60页 |
| 致谢 | 第60-61页 |
| 攻读硕士期间发表论文情况 | 第61页 |