| 前言 | 第1-9页 |
| 第一章 文献综述 | 第9-22页 |
| ·B.subtilis 的PTS 系统 | 第9-10页 |
| ·B.subtilis 中心代谢途径 | 第10-12页 |
| ·B.subtilis 的CCR 效应及其调控机制 | 第12-20页 |
| ·ccpA 的调控机理 | 第12-14页 |
| ·cre boxes 共同序列的发现 | 第12-13页 |
| ·辅助因子HPr-Ser46-P 在CCR 中的作用 | 第13-14页 |
| ·CCR 对中心代谢的影响 | 第14-19页 |
| ·CCR 对EMP 途径的影响 | 第16页 |
| ·CCR 对TCA 循环的影响 | 第16-17页 |
| ·CCR 对溢流代谢的影响 | 第17页 |
| ·CCR 对磷酸戊糖途径的影响 | 第17-18页 |
| ·CCR 对产能代谢的影响 | 第18-19页 |
| ·ccpA 突变型的表型特点 | 第19-20页 |
| ·CCR 效应对核黄素发酵的影响 | 第20-21页 |
| ·研究目的 | 第21-22页 |
| 第二章 实验材料与方法 | 第22-37页 |
| ·实验材料 | 第22-27页 |
| ·菌种和质粒 | 第22页 |
| ·主要仪器 | 第22-23页 |
| ·主要药品 | 第23-25页 |
| ·培养基 | 第25-26页 |
| ·主要试剂 | 第26-27页 |
| ·实验方法 | 第27-37页 |
| ·枯草芽孢杆菌的染色体DNA 提取 | 第27页 |
| ·质粒的小规模提取 | 第27-28页 |
| ·B.subtilis24/pMX45 质粒的大规模提取 | 第28-29页 |
| ·DNA 的纯化和浓缩 | 第29页 |
| ·质粒载体去磷酸化 | 第29-30页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备与转化 | 第30页 |
| ·B.subtilis24 原生质体的制备与转化 | 第30-31页 |
| ·B.subtilis168 Spizzen 转化 | 第31页 |
| ·引物及PCR 反应 | 第31-32页 |
| ·引物 | 第31页 |
| ·PCR 反应 | 第31-32页 |
| ·DNA 琼脂糖凝胶电泳 | 第32页 |
| ·DNA 的酶切与连接 | 第32-33页 |
| ·B.subtilis 发酵产物的测定 | 第33-37页 |
| ·发酵液中乳酸、乙酸、3-羟基丁酮的分析 | 第33-34页 |
| ·发酵液中核黄素的测定 | 第34-35页 |
| ·发酵液中残糖的测定 | 第35-37页 |
| 第三章 结果与讨论 | 第37-61页 |
| ·B.subtilis168 的ccpA 基因的敲除 | 第37-43页 |
| ·ccpA 基因的敲除策略 | 第37-39页 |
| ·ccpA 基因的PCR 扩增 | 第39页 |
| ·重组质粒pUC-pA 的构建 | 第39-41页 |
| ·重组质粒pUC-pA::Km 的构建 | 第41-42页 |
| ·B.subtilis168 菌株ccpA 基因敲除及转化子筛选 | 第42-43页 |
| ·B.subtilis24 菌株ccpA 基因的敲除 | 第43-49页 |
| ·ccpA 基因的敲除策略 | 第43-45页 |
| ·erm 片段的制备 | 第45页 |
| ·重组质粒pUC-pA::Em 的构建 | 第45-46页 |
| ·ccpA::erm-recA 片段的连接 | 第46-47页 |
| ·B.subtilis24 菌株ccpA 基因敲除及转化子筛选 | 第47-48页 |
| ·质粒pMX45 的转化 | 第48-49页 |
| ·B.subtilis24A1/PMX45 发酵特性 | 第49-55页 |
| ·ccpA 基因敲除对生物量的影响 | 第49-51页 |
| ·ccpA 基因敲除菌株发酵过程pH 值的变化 | 第51-52页 |
| ·ccpA 基因敲除对溢流代谢的影响 | 第52-53页 |
| ·ccpA 基因敲除对葡萄糖吸收和核黄素产量的影响 | 第53-54页 |
| ·ccpA 基因敲除对蔗糖吸收的影响 | 第54-55页 |
| ·B.subtlis24A1/PMX45 发酵培养基氮源的优化 | 第55-61页 |
| ·正交实验设计 | 第55-56页 |
| ·多因子方差分析 | 第56-58页 |
| ·最优发酵条件下的核黄素产值估计 | 第58-59页 |
| ·验证实验 | 第59-61页 |
| 第四章 结论与展望 | 第61-62页 |
| ·主要结论 | 第61页 |
| ·展望 | 第61-62页 |
| 参考文献 | 第62-66页 |
| 附录 | 第66-69页 |
| 致谢 | 第69页 |
