摘要 | 第1-6页 |
Abstract | 第6-13页 |
第一章 前言 | 第13-21页 |
·双组分调控系统 | 第13-17页 |
·双组分调控系统简介 | 第13-14页 |
·双组分调控系统的磷酸基团传递途径 | 第14-15页 |
·双组分调控系统的分布 | 第15页 |
·双组分调控系统调控病原菌的致病力 | 第15-16页 |
·双组分调控系统是理想的药物候选靶标 | 第16-17页 |
·十字花科黑腐病菌的简单介绍与基因组信息 | 第17-18页 |
·十字花科黑腐病菌的简单介绍 | 第17页 |
·十字花科黑腐病菌的基因组信息 | 第17-18页 |
·十字花科黑腐病菌主要致病因子与致病作用 | 第18-20页 |
·胞外多糖(EPS) | 第18页 |
·脂多糖(LPS) | 第18-19页 |
·胞外酶 | 第19页 |
·致病效应物 | 第19-20页 |
·十字花科黑腐病菌基因组注释的双组分调控系统基因 | 第20页 |
·本工作的内容、目的及意义 | 第20-21页 |
第二章 材料与方法 | 第21-41页 |
·研究用的材料 | 第21-25页 |
·菌株和质粒 | 第21页 |
·抗生素和其它药剂 | 第21-22页 |
·植物材料 | 第22页 |
·细菌培养基 | 第22-23页 |
·常用溶液与缓冲液 | 第23-25页 |
·常规微生物学操作 | 第25-30页 |
·培养条件及保存 | 第25-26页 |
·突变体营养缺陷型检测 | 第26页 |
·胞外多糖的检测 | 第26页 |
·胞外蛋白酶的检测 | 第26-27页 |
·胞外淀粉酶的检测 | 第27-28页 |
·胞外纤维素酶的检测 | 第28-29页 |
·细菌泳动性的检测 | 第29页 |
·Xcc在培养基生长情况测定 | 第29-30页 |
·分子操作技术 | 第30-39页 |
·质粒的提取 | 第30页 |
·十字花科黑腐病菌总DNA的提取 | 第30页 |
·DNA片段的回收 | 第30-32页 |
·限制性内切酶酶切 | 第32页 |
·DNA连接 | 第32-33页 |
·琼脂糖凝胶电泳 | 第33页 |
·聚合酶链式反应(PCR) | 第33-35页 |
·十字花科黑腐病基因组总RNA的提取与纯度检测 | 第35-36页 |
·细菌的转化与接合实验 | 第36-38页 |
·Xcc 8004基因组上目标基因的缺失突变体的构建与互补 | 第38-39页 |
·植株试验 | 第39-40页 |
·植株的致病性试验 | 第39-40页 |
·过敏反应 | 第40页 |
·生物信息学分析方法 | 第40-41页 |
第三章 结果与分析 | 第41-60页 |
·XC2229的生物信息学分析 | 第41-45页 |
·XC2229基因的基本特征 | 第41页 |
·XC2229编码产物的结构域分析 | 第41-42页 |
·XC2229编码产物的跨膜结构分析 | 第42-43页 |
·XC2229编码产物的蛋白的疏水结构分析 | 第43-44页 |
·XC2229基因推测编码蛋白的同源性比较 | 第44-45页 |
·XC2229的Tn5-gusA5突变体筛选 | 第45页 |
·XC2229的缺失突变体的构建 | 第45-47页 |
·XC2229左右臂和Gm抗性基因的PCR扩增 | 第45-46页 |
·连接与电转化 | 第46页 |
·三亲接合与突变体的筛选及验证 | 第46-47页 |
·XC2229突变体的功能互补 | 第47-49页 |
·XC2229互补基因的扩增 | 第47页 |
·将XC2229全基因克隆到载体pLAFR6上 | 第47-48页 |
·三亲本接合子的获得 | 第48-49页 |
·XC2229缺失突变体的基本培养特性 | 第49-51页 |
·DM2229不是营养缺陷型突变体 | 第49-50页 |
·缺失突变体DM2229在营养胁迫下生长速率下降 | 第50-51页 |
·XC2229与Xcc 8004的致病性相关 | 第51-53页 |
·DM2229在寄主上致病力降低 | 第51-52页 |
·DM2229能诱导非寄主植物过敏反应 | 第52-53页 |
·XC2229与Xcc的主要致病因子的关系 | 第53-57页 |
·胞外蛋白酶活性检测 | 第53-54页 |
·胞外纤维素酶活性检测 | 第54-55页 |
·胞外淀粉酶活性检测 | 第55-56页 |
·胞外多糖检测 | 第56-57页 |
·XC2229与Xcc 8004游动性的关系 | 第57页 |
·XC2229与Xcc 8004生物聚膜的关系 | 第57页 |
·XC2229对相关基因的转录水平调控(RT-PCR方法) | 第57-60页 |
·总RNA的提取 | 第58页 |
·反转录PCR | 第58页 |
·XC2229基因调控鞭毛合成及控制相关基因的表达 | 第58-60页 |
第四章 讨论 | 第60-63页 |
·XC2229是一个单独存在的双组分系统的感受蛋白基因 | 第60页 |
·XC2229基因的突变体不是营养缺陷型 | 第60页 |
·XC2229基因与EPS、胞外酶合成、细胞运动等有关 | 第60-61页 |
·XC2229与部分编码鞭毛蛋白基因的表达调控关系 | 第61页 |
·XC2229基因的突变影响十字花科黑腐病菌Xcc 8004侵染植物的能力 | 第61-63页 |
参考文献 | 第63-70页 |
致谢 | 第70-71页 |
攻读学位期间发表论文情况 | 第71页 |