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十字花科黑腐病菌双组分调控系统基因XC2229的鉴定

摘要第1-6页
Abstract第6-13页
第一章 前言第13-21页
   ·双组分调控系统第13-17页
     ·双组分调控系统简介第13-14页
     ·双组分调控系统的磷酸基团传递途径第14-15页
     ·双组分调控系统的分布第15页
     ·双组分调控系统调控病原菌的致病力第15-16页
     ·双组分调控系统是理想的药物候选靶标第16-17页
   ·十字花科黑腐病菌的简单介绍与基因组信息第17-18页
     ·十字花科黑腐病菌的简单介绍第17页
     ·十字花科黑腐病菌的基因组信息第17-18页
   ·十字花科黑腐病菌主要致病因子与致病作用第18-20页
     ·胞外多糖(EPS)第18页
     ·脂多糖(LPS)第18-19页
     ·胞外酶第19页
     ·致病效应物第19-20页
   ·十字花科黑腐病菌基因组注释的双组分调控系统基因第20页
   ·本工作的内容、目的及意义第20-21页
第二章 材料与方法第21-41页
   ·研究用的材料第21-25页
     ·菌株和质粒第21页
     ·抗生素和其它药剂第21-22页
     ·植物材料第22页
     ·细菌培养基第22-23页
     ·常用溶液与缓冲液第23-25页
   ·常规微生物学操作第25-30页
     ·培养条件及保存第25-26页
     ·突变体营养缺陷型检测第26页
     ·胞外多糖的检测第26页
     ·胞外蛋白酶的检测第26-27页
     ·胞外淀粉酶的检测第27-28页
     ·胞外纤维素酶的检测第28-29页
     ·细菌泳动性的检测第29页
     ·Xcc在培养基生长情况测定第29-30页
   ·分子操作技术第30-39页
     ·质粒的提取第30页
     ·十字花科黑腐病菌总DNA的提取第30页
     ·DNA片段的回收第30-32页
     ·限制性内切酶酶切第32页
     ·DNA连接第32-33页
     ·琼脂糖凝胶电泳第33页
     ·聚合酶链式反应(PCR)第33-35页
     ·十字花科黑腐病基因组总RNA的提取与纯度检测第35-36页
     ·细菌的转化与接合实验第36-38页
     ·Xcc 8004基因组上目标基因的缺失突变体的构建与互补第38-39页
   ·植株试验第39-40页
     ·植株的致病性试验第39-40页
     ·过敏反应第40页
   ·生物信息学分析方法第40-41页
第三章 结果与分析第41-60页
   ·XC2229的生物信息学分析第41-45页
     ·XC2229基因的基本特征第41页
     ·XC2229编码产物的结构域分析第41-42页
     ·XC2229编码产物的跨膜结构分析第42-43页
     ·XC2229编码产物的蛋白的疏水结构分析第43-44页
     ·XC2229基因推测编码蛋白的同源性比较第44-45页
   ·XC2229的Tn5-gusA5突变体筛选第45页
   ·XC2229的缺失突变体的构建第45-47页
     ·XC2229左右臂和Gm抗性基因的PCR扩增第45-46页
     ·连接与电转化第46页
     ·三亲接合与突变体的筛选及验证第46-47页
   ·XC2229突变体的功能互补第47-49页
     ·XC2229互补基因的扩增第47页
     ·将XC2229全基因克隆到载体pLAFR6上第47-48页
     ·三亲本接合子的获得第48-49页
   ·XC2229缺失突变体的基本培养特性第49-51页
     ·DM2229不是营养缺陷型突变体第49-50页
     ·缺失突变体DM2229在营养胁迫下生长速率下降第50-51页
   ·XC2229与Xcc 8004的致病性相关第51-53页
     ·DM2229在寄主上致病力降低第51-52页
     ·DM2229能诱导非寄主植物过敏反应第52-53页
   ·XC2229与Xcc的主要致病因子的关系第53-57页
     ·胞外蛋白酶活性检测第53-54页
     ·胞外纤维素酶活性检测第54-55页
     ·胞外淀粉酶活性检测第55-56页
     ·胞外多糖检测第56-57页
     ·XC2229与Xcc 8004游动性的关系第57页
     ·XC2229与Xcc 8004生物聚膜的关系第57页
   ·XC2229对相关基因的转录水平调控(RT-PCR方法)第57-60页
     ·总RNA的提取第58页
     ·反转录PCR第58页
     ·XC2229基因调控鞭毛合成及控制相关基因的表达第58-60页
第四章 讨论第60-63页
   ·XC2229是一个单独存在的双组分系统的感受蛋白基因第60页
   ·XC2229基因的突变体不是营养缺陷型第60页
   ·XC2229基因与EPS、胞外酶合成、细胞运动等有关第60-61页
   ·XC2229与部分编码鞭毛蛋白基因的表达调控关系第61页
   ·XC2229基因的突变影响十字花科黑腐病菌Xcc 8004侵染植物的能力第61-63页
参考文献第63-70页
致谢第70-71页
攻读学位期间发表论文情况第71页

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