| 摘要 | 第1-8页 |
| ABSTRACT | 第8-16页 |
| 第一章 鱼类生长激素的研究概况 | 第16-36页 |
| ·淇河鲫简介 | 第16-18页 |
| ·分类地位 | 第16页 |
| ·生物学特性 | 第16-17页 |
| ·生态习性 | 第17-18页 |
| ·鱼类 GH 的研究进展 | 第18-35页 |
| ·GH 及其家族 | 第18页 |
| ·GH 的结构 | 第18-19页 |
| ·GH 的合成、分泌和释放 | 第19页 |
| ·GH 的生理功能 | 第19-22页 |
| ·GH 的作用机制 | 第22页 |
| ·GH 基因的分离、克隆、表达与序列分析 | 第22-24页 |
| ·GH 的表达调控 | 第24-27页 |
| ·GH 的测定方法 | 第27-29页 |
| ·外源 GH 引入鱼体的途径和方法研究进展 | 第29-31页 |
| ·GH 在水产养殖中的应用 | 第31-35页 |
| ·本文研究的目的和意义 | 第35-36页 |
| 第二章 淇河鲫肌肉营养成分分析及营养价值评定 | 第36-46页 |
| ·试验材料 | 第36页 |
| ·试验鱼 | 第36页 |
| ·试剂 | 第36页 |
| ·器具和仪器 | 第36页 |
| ·试验方法 | 第36-41页 |
| ·含肉率的测定 | 第36页 |
| ·生化成分分析 | 第36-41页 |
| ·结果 | 第41-44页 |
| ·含肉率 | 第41页 |
| ·常规营养成分及含量 | 第41-42页 |
| ·肌肉中氨基酸的组成及含量 | 第42-44页 |
| ·讨论 | 第44页 |
| ·淇河鲫和其它鱼类含肉率的比较 | 第44页 |
| ·淇河鲫和其它鱼类常规营养特性的比较分析 | 第44页 |
| ·小结 | 第44-46页 |
| 第三章 淇河鲫生长激素基因CDNA 的克隆与序列分析 | 第46-72页 |
| ·试验材料 | 第46-50页 |
| ·克隆质粒和菌株 | 第46页 |
| ·主要药品和试剂 | 第46-47页 |
| ·主要仪器设备 | 第47-48页 |
| ·培养基 | 第48页 |
| ·溶液 | 第48-50页 |
| ·试验鱼 | 第50页 |
| ·试验方法 | 第50-58页 |
| ·引物的设计和合成 | 第50-51页 |
| ·淇河鲫垂体总 RNA 的提取和检测 | 第51页 |
| ·淇河鲫脑垂体总 RNA 的反转录 | 第51-52页 |
| ·淇河鲫 GH cDNA 部分片段的扩增 | 第52页 |
| ·淇河鲫 GH cDNA 3’端（下游区）片段的扩增 | 第52-54页 |
| ·淇河鲫 GH cDNA 5’端（上游区）片段的扩增 | 第54-56页 |
| ·目的片段的回收纯化 | 第56页 |
| ·回收后 PCR 产物的连接反应 | 第56页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备及其转化 | 第56-57页 |
| ·重组质粒的筛选、克隆及保菌 | 第57页 |
| ·重组质粒DNA 的少量提取 | 第57页 |
| ·重组质粒的鉴定 | 第57-58页 |
| ·重组质粒DNA 序列测定、DNA 序列分析和氨基酸序列的比较及系统进化树的构建 | 第58页 |
| ·结果 | 第58-70页 |
| ·淇河鲫垂体总 RNA 的提取 | 第58页 |
| ·淇河鲫 GH cDNA 部分片段的扩增 | 第58-59页 |
| ·淇河鲫 GH cDNA 3’端序列的克隆 | 第59-60页 |
| ·淇河鲫 GH cDNA 5’端序列的克隆 | 第60-61页 |
| ·淇河鲫 GH cDNA 碱基序列与其它动物的同源性比较 | 第61-63页 |
| ·淇河鲫 GH 氨基酸成分分析 | 第63-66页 |
| ·不同动物 GH 氨基酸序列的同源性比较分析 | 第66-69页 |
| ·鱼类 GH 和其它脊椎动物 GH 的进化分析 | 第69-70页 |
| ·讨论 | 第70-71页 |
| ·小结 | 第71-72页 |
| 第四章 淇河鲫生长激素基因在大肠杆菌中的表达研究 | 第72-86页 |
| ·试验材料 | 第72-74页 |
| ·菌株与质粒 | 第72页 |
| ·主要药品和试剂 | 第72-73页 |
| ·主要仪器设备 | 第73页 |
| ·培养基 | 第73页 |
| ·常用溶液及缓冲液 | 第73-74页 |
| ·试验方法 | 第74-79页 |
| ·构建淇河鲫GH 基因原核表达载体的PCR 引物设计 | 第74-75页 |
| ·淇河鲫GH 成熟肽序列的PCR 扩增 | 第75页 |
| ·低溶点琼脂糖凝胶电泳回收、纯化、PCR 产物连接至pMD19-T 载体、转化及蓝白斑筛选、克隆及保菌 | 第75页 |
| ·菌落PCR，检测菌落中插入片段的长度 | 第75-76页 |
| ·将阳性菌落提取质粒DNA | 第76页 |
| ·淇河鲫GH 基因原核表达载体的构建 | 第76-78页 |
| ·重组工程菌的诱导表达 | 第78页 |
| ·SDS-PAGE 电泳检测 | 第78-79页 |
| ·结果 | 第79-83页 |
| ·淇河鲫GH 成熟肽PCR 扩增 | 第79页 |
| ·菌落PCR，检测菌落中插入片段的长度 | 第79-80页 |
| ·淇河鲫GH 原核表达质粒PQE30－GH 的构建及检测 | 第80-82页 |
| ·重组菌的诱导表达 | 第82-83页 |
| ·讨论 | 第83-85页 |
| ·小结 | 第85-86页 |
| 第五章 淇河鲫生长激素基因在毕赤酵母菌中的表达研究 | 第86-105页 |
| ·试验材料 | 第86-90页 |
| ·菌株与质粒 | 第86页 |
| ·主要药品和试剂 | 第86-87页 |
| ·主要仪器设备 | 第87页 |
| ·储液和培养基 | 第87-90页 |
| ·试验方法 | 第90-97页 |
| ·构建淇河鲫GH 基因真核表达载体的PCR 引物设计 | 第90-91页 |
| ·淇河鲫GH 成熟肽序列的PCR 扩增 | 第91页 |
| ·低溶点琼脂糖凝胶电泳回收、纯化、PCR 产物连接至pMD19-T 载体、转化及蓝白斑筛选、克隆及保菌 | 第91页 |
| ·菌落PCR，检测菌落中插入片段的长度 | 第91-92页 |
| ·将阳性菌落提取质粒DNA | 第92页 |
| ·表达质粒pPIC9k－GH 的构建 | 第92-94页 |
| ·重组毕赤酵母工程菌的制备 | 第94-96页 |
| ·重组毕赤酵母工程菌的诱导表达条件筛选 | 第96-97页 |
| ·表达产物的纯化和活性检测 | 第97页 |
| ·结果 | 第97-103页 |
| ·淇河鲫GH 成熟肽PCR 扩增 | 第97-98页 |
| ·菌落PCR，检测菌落中插入片段的长度 | 第98页 |
| ·淇河鲫GH 基因真核表达载体构建 | 第98-101页 |
| ·重组毕赤酵母工程菌的诱导表达 | 第101-103页 |
| ·讨论 | 第103-104页 |
| ·小结 | 第104-105页 |
| 结论 | 第105-106页 |
| 参考文献 | 第106-122页 |
| 附表 | 第122-124页 |
| 附图 | 第124-128页 |
| 致谢 | 第128-129页 |
| 个人简介 | 第129-132页 |
