| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-10页 |
| 1 引言 | 第10-22页 |
| ·布鲁氏菌细胞膜结构及组成成分 | 第10-16页 |
| ·光滑型布鲁氏菌的脂多糖 | 第11-12页 |
| ·外膜蛋白 | 第12-14页 |
| ·布鲁氏菌表面蛋白成分 | 第14-15页 |
| ·多糖B 和半抗原多糖 | 第15-16页 |
| ·游离脂 | 第16页 |
| ·抗体生成的理论 | 第16-17页 |
| ·抗体生成的侧链学说 | 第16页 |
| ·抗体生成的模板学说 | 第16-17页 |
| ·自然选择学说 | 第17页 |
| ·克隆选择学说 | 第17页 |
| ·鼠源单克隆抗体的产生历史和原理 | 第17-18页 |
| ·鼠源单克隆抗体的产生历史 | 第17-18页 |
| ·鼠源单克隆抗体的原理 | 第18页 |
| ·单克隆抗体制备技术路线 | 第18-19页 |
| ·单克隆抗体的应用 | 第19-21页 |
| ·单克隆抗体在基础研究中的应用 | 第19-21页 |
| ·单克隆抗体在生物医学研究及疾病诊断中的应用 | 第21页 |
| ·实验的目的和意义 | 第21-22页 |
| 2 材料和方法 | 第22-34页 |
| ·抗原 | 第22页 |
| ·动物 | 第22页 |
| ·细胞株 | 第22页 |
| ·主要仪器 | 第22-23页 |
| ·主要试剂与耗材 | 第23页 |
| ·试剂配制 | 第23-25页 |
| ·酶联免疫吸附试验用试剂 | 第23页 |
| ·SDS-PAGE 及 Western-blot 用试剂 | 第23-24页 |
| ·细胞培养液和冻存液 | 第24-25页 |
| ·兔抗牛布鲁氏菌A19疫苗多克隆抗体IgG的制备 | 第25-27页 |
| ·家兔免疫方法 | 第25页 |
| ·兔血清效价测定 | 第25页 |
| ·血清IgG 的分离 | 第25-26页 |
| ·蛋白质含量测定 | 第26页 |
| ·IgG 蛋白SDS-PAGE 电泳 | 第26-27页 |
| ·布鲁氏菌单克隆抗体制备方法 | 第27-34页 |
| ·包被用抗原制备 | 第27页 |
| ·动物免疫 | 第27-28页 |
| ·小鼠血清效价的检测 | 第28页 |
| ·骨髓瘤细胞的复苏和培养 | 第28-29页 |
| ·饲养层细胞的制备 | 第29页 |
| ·免疫小鼠脾细胞悬液的制备 | 第29页 |
| ·细胞的融合 | 第29-30页 |
| ·杂交瘤细胞株筛选培养 | 第30页 |
| ·阳性杂交瘤细胞株的筛选 | 第30-31页 |
| ·杂交瘤细胞的克隆化(有限稀释法) | 第31页 |
| ·杂交瘤细胞的扩大培养 | 第31页 |
| ·杂交瘤细胞的冻存 | 第31-32页 |
| ·单克隆抗体腹水的制备 | 第32页 |
| ·单克隆抗体的稳定性鉴定 | 第32页 |
| ·腹水中单克隆抗体的纯化 | 第32页 |
| ·单克隆抗体的抗原识别位点分析 | 第32-33页 |
| ·单克隆抗体的SDS-PAGE 电泳 | 第33页 |
| ·蛋白印迹(Western-blot)检测 | 第33-34页 |
| 3 结果 | 第34-41页 |
| ·多克隆抗体制备结果 | 第34-35页 |
| ·兔抗体试管凝集实验测定结果 | 第34页 |
| ·血清分离IgG 含量测定 | 第34页 |
| ·多克隆抗体IgG SDS-PAGE 结果 | 第34-35页 |
| ·单克隆抗体制备结果 | 第35-41页 |
| ·方阵滴定法探索最佳条件 | 第35页 |
| ·免疫小鼠抗体效价测定 | 第35-36页 |
| ·杂交瘤细胞株的建立 | 第36-38页 |
| ·细胞培养液上清和腹水效价测定 | 第38页 |
| ·单克隆抗体位点分析 | 第38-39页 |
| ·杂交瘤细胞稳定性鉴定 | 第39页 |
| ·单克隆抗体SDS-PAGE | 第39页 |
| ·Western-blot 鉴定单抗识别抗原特异性 | 第39-41页 |
| 4 讨论 | 第41-46页 |
| ·抗原和动物免疫 | 第41页 |
| ·细胞融合 | 第41-43页 |
| ·杂交瘤细胞筛选 | 第43页 |
| ·杂交瘤细胞克隆化培养 | 第43-44页 |
| ·杂交瘤细胞建株 | 第44页 |
| ·在杂交瘤细胞制备过程中污染问题 | 第44-45页 |
| ·单克隆抗体 western-blot 分析 | 第45-46页 |
| 5 结论 | 第46-47页 |
| 参考文献 | 第47-53页 |
| 在读期间发表的学术论文 | 第53-54页 |
| 作者简历 | 第54-55页 |
| 致谢 | 第55页 |