| 摘要 | 第3-7页 |
| Abstract | 第7-11页 |
| 英文缩写词表 | 第17-19页 |
| 第1章 绪论 | 第19-33页 |
| 1.1 引言 | 第19-20页 |
| 1.2 HCV的基因组结构与生物学特性 | 第20-21页 |
| 1.3 丙型肝炎的诊断方法 | 第21-26页 |
| 1.3.1 血清HCV抗体检测 | 第21-23页 |
| 1.3.2 血清HCV核心抗原检测 | 第23-24页 |
| 1.3.3 HCV RNA检测 | 第24-26页 |
| 1.3.4 其他检测方法 | 第26页 |
| 1.4 HCV传播途径 | 第26-28页 |
| 1.4.1 血液、血制品传播 | 第27页 |
| 1.4.2 经性传播 | 第27页 |
| 1.4.3 母婴传播 | 第27-28页 |
| 1.5 丙型肝炎病毒抗原抗体一体化检测试剂盒的国内外研究现状 | 第28页 |
| 1.6 丙型肝炎病毒抗原抗体一体化检测试剂盒的研究意义 | 第28-29页 |
| 1.7 技术路线 | 第29-33页 |
| 1.7.1 用于检测针对丙型肝炎病毒抗体的融合蛋白抗原的表达及纯化 | 第29页 |
| 1.7.2 携带丙型肝炎病毒核心不同抗原表位蛋白的表达及纯化 | 第29-30页 |
| 1.7.3 针对人IgG Fc段单克隆抗体的制备 | 第30-31页 |
| 1.7.4 针对丙型肝炎病毒核心HCV C101-115抗原表位小肽单克隆抗体的制备 | 第31-33页 |
| 第2章 用于检测针对丙型肝炎病毒抗体的融合蛋白抗原的表达及纯化 | 第33-49页 |
| 2.1 实验材料 | 第33-37页 |
| 2.1.1 菌株及质粒载体 | 第33-34页 |
| 2.1.2 材料及试剂 | 第34页 |
| 2.1.3 试剂配制 | 第34-36页 |
| 2.1.4 主要仪器设备 | 第36-37页 |
| 2.2 实验方法 | 第37-44页 |
| 2.2.1 HCV core-NS3-5基因的克隆 | 第37-40页 |
| 2.2.2 大肠杆菌DH5α感受态细胞的制备 | 第40-41页 |
| 2.2.3 连接产物转化E. coli DH5α感受态细胞 | 第41页 |
| 2.2.4 pGEMT/HCV core-NS3-5阳性克隆质粒的获得和鉴定 | 第41-42页 |
| 2.2.5 携带6His-HCV core-NS3-5融合蛋白原核表达载体的构建 | 第42页 |
| 2.2.6 6His-HCV core-NS3-5融合蛋白的原核表达与纯化 | 第42-43页 |
| 2.2.7 6His-HCV core-NS3-5融合蛋白的Western Blot检测 | 第43-44页 |
| 2.3 实验结果 | 第44-47页 |
| 2.3.1 HCV core-NS3-5基因的克隆 | 第44-45页 |
| 2.3.2 携带6His-HCV core-NS3-5融合蛋白原核表达载体的构建 | 第45-46页 |
| 2.3.3 6His-HCV core-NS3-5融合蛋白的原核表达与纯化 | 第46-47页 |
| 2.3.4 6His-HCV core-NS3-5融合蛋白的Western Blot检测 | 第47页 |
| 2.4 讨论 | 第47-49页 |
| 第3章 携带丙型肝炎病毒核心抗原表位HCV C8-22及HCV C101-115的融合蛋白的表达与纯化 | 第49-77页 |
| 3.1 实验材料 | 第50-52页 |
| 3.1.1 菌株及质粒载体 | 第50页 |
| 3.1.2 材料及试剂 | 第50页 |
| 3.1.3 试剂配制 | 第50-51页 |
| 3.1.4 主要仪器设备 | 第51-52页 |
| 3.2 实验方法 | 第52-61页 |
| 3.2.1 HCV C8-22小肽的获得 | 第52-53页 |
| 3.2.2 HBc-HCV C8-22融合蛋白原核表达载体的构建 | 第53-54页 |
| 3.2.3 HBc-HCV C8-22融合蛋白的诱导表达与纯化 | 第54-55页 |
| 3.2.4 Grn E-HCV C8-22融合蛋白原核表达载体的构建 | 第55页 |
| 3.2.5 Grn E-HCV C8-22融合蛋白的诱导表达与纯化 | 第55-56页 |
| 3.2.6 Western Blot检测原核表达的HCV C8-22融合蛋白 | 第56页 |
| 3.2.7 携带HCV C8-22小肽真核表达载体的构建 | 第56-57页 |
| 3.2.8 HCV C101-115小肽的获得 | 第57-58页 |
| 3.2.9 HBc-HCV C101-115融合蛋白原核表达载体的构建 | 第58页 |
| 3.2.10 HBc-HCV C101-115融合蛋白的诱导表达与纯化 | 第58页 |
| 3.2.11 Grn E-HCV C101-115融合蛋白原核表达载体的构建 | 第58-59页 |
| 3.2.12 Gm E-HCV C101-115融合蛋白的诱导表达与纯化 | 第59页 |
| 3.2.13 Western Blot检测原核表达的HCV C101-115融合蛋白 | 第59页 |
| 3.2.14 携带HCV C101-115小肽真核表达载体的构建 | 第59页 |
| 3.2.15 HCV C8-160基因的克隆 | 第59-60页 |
| 3.2.16 GST-HCV C8-160融合蛋白原核表达载体的构建及其表达纯化 | 第60-61页 |
| 3.3 实验结果 | 第61-74页 |
| 3.3.1 HBc-HCV C8-22融合蛋白原核表达载体的构建 | 第61-62页 |
| 3.3.2 HBc-HCV C8-22融合蛋白的原核表达及纯化 | 第62页 |
| 3.3.3 Gm E-HCV C8-22融合蛋白原核表达载体的构建 | 第62-64页 |
| 3.3.4 Gm E-HCV C8-22融合蛋白的原核表达及纯化 | 第64页 |
| 3.3.5 Western Blot检测原核表达的HCV C8-22融合蛋白 | 第64-65页 |
| 3.3.6 携带HCV C8-22小肽真核表达载体的构建及表达 | 第65-67页 |
| 3.3.7 HBc-HCV C101-115融合蛋白原核表达载体的构建 | 第67页 |
| 3.3.8 HBc-HCV C101-115融合蛋白的原核表达及纯化 | 第67-68页 |
| 3.3.9 Gm E-HCV C101-115融合蛋白原核表达载体的构建 | 第68-69页 |
| 3.3.10 Gm E-HCV C101-115融合蛋白的原核表达及纯化 | 第69-70页 |
| 3.3.11 Western Blot检测原核表达的HCV C101-115融合蛋白 | 第70页 |
| 3.3.12 携带HCV C101-115小肽真核表达载体的构建及表达 | 第70-71页 |
| 3.3.13 HCV C8-160基因的克隆 | 第71-72页 |
| 3.3.14 GST-HCV C8-160融合蛋白原核表达载体的构建及其表达纯化 | 第72-74页 |
| 3.4 讨论 | 第74-77页 |
| 第4章 针对人IgG Fc段以及丙型肝炎病毒核心抗原不同表位单克隆抗体的制备 | 第77-95页 |
| 4.1 实验材料 | 第77-80页 |
| 4.1.1 细胞系 | 第77-78页 |
| 4.1.2 材料及试剂 | 第78页 |
| 4.1.3 试剂配制 | 第78-80页 |
| 4.1.4 主要仪器设备 | 第80页 |
| 4.2 实验方法 | 第80-85页 |
| 4.2.1 抗人IgG单克隆抗体的制备 | 第80-81页 |
| 4.2.2 抗人IgG单克隆抗体可特异性结合Fc段的鉴定 | 第81-82页 |
| 4.2.3 抗人IgG单克隆抗体的亚类测定和纯化 | 第82-83页 |
| 4.2.4 抗HCV C101-115单克隆抗体的制备 | 第83-84页 |
| 4.2.5 抗HCV C101-115单克隆抗体的鉴定 | 第84-85页 |
| 4.2.6 抗HCV C101-115单克隆抗体的亚类测定和纯化 | 第85页 |
| 4.3 实验结果 | 第85-92页 |
| 4.3.1 制备抗人IgG单克隆抗体免疫鼠血清效价测定 | 第85-86页 |
| 4.3.2 抗人IgG单克隆抗体可特异性结合Fc段的鉴定 | 第86页 |
| 4.3.3 抗人IgG单克隆抗体的亚类测定和纯化 | 第86-87页 |
| 4.3.4 制备抗HCV C101-115单克隆抗体免疫鼠血清效价测定 | 第87-89页 |
| 4.3.5 抗HCV C101-115单克隆抗体特异性的鉴定 | 第89-91页 |
| 4.3.6 抗HCV C101-115单克隆抗体亚类测定和纯化 | 第91-92页 |
| 4.4 讨论 | 第92-95页 |
| 第5章 结论 | 第95-97页 |
| 参考文献 | 第97-105页 |
| 附录 | 第105-109页 |
| 致谢 | 第109-111页 |
| 攻读硕士学位期间获奖情况 | 第111页 |
