摘要 | 第5-7页 |
Abstract | 第7-9页 |
第一章 绪论 | 第14-36页 |
1.1 维生素K_2简介 | 第14-15页 |
1.2 黄杆菌的诱变选育 | 第15-20页 |
1.2.1 离子束诱变 | 第15-17页 |
1.2.2 亚硝基胍诱变 | 第17-18页 |
1.2.3 生物磁效应在微生物发酵中的应用 | 第18-19页 |
1.2.4 复合诱变 | 第19-20页 |
1.3 表面活性剂在微生物发酵中的应用 | 第20-25页 |
1.3.1 表面活性剂对微生物细胞活性的影响 | 第21-23页 |
1.3.2 表面活性剂对微生物细胞膜通透性的影响 | 第23-25页 |
1.4 超声波在微生物发酵中的应用 | 第25-28页 |
1.4.1 超声波对微生物细胞活性的影响 | 第26-27页 |
1.4.2 超声波对微生物细胞膜通透性的影响 | 第27-28页 |
1.5 微生物细胞膜通透性变化的研究方法 | 第28-29页 |
1.6 微生物的蛋白组学研究 | 第29-33页 |
1.6.1 微生物蛋白质组学主要技术 | 第30-31页 |
1.6.2 压力环境下微生物膜蛋白的合成与表达 | 第31-32页 |
1.6.3 蛋白质组学在产物耐受性研究中的应用 | 第32-33页 |
1.7 研究意义、目的和研究内容 | 第33-36页 |
1.7.1 研究意义和目的 | 第33-34页 |
1.7.2 研究内容 | 第34-36页 |
第二章 菌株复合诱变选育 | 第36-48页 |
2.1 材料和方法 | 第36-40页 |
2.1.1 菌种 | 第36页 |
2.1.2 主要试剂与仪器设备 | 第36-37页 |
2.1.3 实验方法 | 第37-40页 |
2.2 结果与分析 | 第40-45页 |
2.2.1 低能氮离子注入对黄杆菌的诱变效应 | 第40-41页 |
2.2.2 亚硝基胍对黄杆菌的诱变效应 | 第41-42页 |
2.2.3 低能氮离子束-亚硝基胍对黄杆菌的复合诱变 | 第42-44页 |
2.2.4 低能氮离子束-亚硝基胍-强磁场复合诱变 | 第44-45页 |
2.2.5 突变菌株遗传稳定性的验证 | 第45页 |
2.3 本章小结 | 第45-48页 |
第三章 稳态磁场对维生素K_2合成的影响 | 第48-58页 |
3.1 材料与方法 | 第48-51页 |
3.1.1 菌种 | 第48页 |
3.1.2 主要试剂与仪器设备 | 第48-49页 |
3.1.3 实验方法 | 第49-51页 |
3.2 结果与分析 | 第51-57页 |
3.2.1 稳态磁场对细胞生长和维生素K_2合成的影响 | 第51-52页 |
3.2.2 稳态磁场对菌体活力的影响 | 第52-53页 |
3.2.3 稳态磁场对细胞形态的影响 | 第53-55页 |
3.2.4 稳态磁场条件下黄杆菌ATP变化 | 第55-56页 |
3.2.5 稳态磁场条件下黄杆菌G6PDH变化 | 第56-57页 |
3.3 本章小结 | 第57-58页 |
第四章 表面活性剂对维生素K_2合成的影响 | 第58-76页 |
4.1 材料与方法 | 第58-62页 |
4.1.1 菌种 | 第58页 |
4.1.2 主要试剂与仪器设备 | 第58-59页 |
4.1.3 实验方法 | 第59-62页 |
4.2 结果与分析 | 第62-75页 |
4.2.1 不同表面活性剂的初步遴选 | 第62-63页 |
4.2.2 表面活性剂对菌体生长的影响 | 第63-65页 |
4.2.3 表面活性剂对维生素K_2产量的影响 | 第65-66页 |
4.2.4 表面活性剂对表面张力的影响 | 第66-67页 |
4.2.5 表面活性剂对N3-13细胞形态的影响 | 第67-69页 |
4.2.6 表面活性剂对N3-13细胞膜透性的影响 | 第69-71页 |
4.2.7 表面活性剂体系的优化 | 第71-75页 |
4.3 本章小结 | 第75-76页 |
第五章 超声波对维生素K_2合成的影响 | 第76-92页 |
5.1 材料和方法 | 第76-79页 |
5.1.1 菌种 | 第76页 |
5.1.2 主要试剂与仪器设备 | 第76-77页 |
5.1.3 实验方法 | 第77-79页 |
5.2 结果与分析 | 第79-91页 |
5.2.1 Flavobacterium sp. N3-13生长曲线 | 第79页 |
5.2.2 超声作用时期对N3-13生长及产VK_2的影响 | 第79-81页 |
5.2.3 超声功率幅度对N3-13的生长及产VK_2的影响 | 第81-82页 |
5.2.4 超声处理时间对N3-13生长及产VK_2的影响 | 第82-83页 |
5.2.5 超声波对N3-13细胞形态的影响 | 第83-85页 |
5.2.6 超声波对N3-13细胞膜透性的影响 | 第85-86页 |
5.2.7 超声波条件的优化 | 第86-90页 |
5.2.8 超声波工艺条件优化后VK_2发酵的结果 | 第90-91页 |
5.3 本章小结 | 第91-92页 |
第六章 超声和表面活性剂协同对维生素K_2合成的影响 | 第92-108页 |
6.1 材料与方法 | 第92-94页 |
6.1.1 菌种 | 第92页 |
6.1.2 主要试剂与仪器设备 | 第92-93页 |
6.1.3 实验方法 | 第93-94页 |
6.2 结果与分析 | 第94-106页 |
6.2.1 超声和表面活性剂的协同作用对表面张力的影响 | 第94-95页 |
6.2.2 超声和表面活性剂的协同作用对胞外蛋白和VK_2产量的影响 | 第95-96页 |
6.2.3 超声和表面活性剂的协同作用对N3-13细胞形态的影响 | 第96-98页 |
6.2.4 超声和表面活性剂的协同作用对N3-13细胞膜透性的影响 | 第98-100页 |
6.2.5 响应面分析法优化渗漏发酵条件 | 第100-106页 |
6.2.6 POE和超声对菌体发酵的协同增效作用 | 第106页 |
6.3 本章小结 | 第106-108页 |
第七章 维生素K_2耐受型黄杆菌蛋白质组学研究 | 第108-128页 |
7.1 材料与方法 | 第108-113页 |
7.1.1 菌种 | 第108页 |
7.1.2 主要试剂与仪器设备 | 第108-110页 |
7.1.3 人工模拟生物进化 | 第110页 |
7.1.4 ~(60)Co-γ射线诱变 | 第110页 |
7.1.5 黄杆菌蛋白质的提取 | 第110-111页 |
7.1.6 Bradford法测定蛋白浓度 | 第111页 |
7.1.7 蛋白酶解 | 第111页 |
7.1.8 肽段标记 | 第111页 |
7.1.9 肽段分离 | 第111页 |
7.1.10 高效液相色谱分离 | 第111-112页 |
7.1.11 质谱检测 | 第112页 |
7.1.12 黄杆菌蛋白质组的生物信息学分析 | 第112-113页 |
7.2 结果与分析 | 第113-126页 |
7.2.1 MK-4胁迫驯化提高黄杆菌的MK-4耐受性 | 第113-114页 |
7.2.2 MK-4耐受性黄杆菌的诱变筛选和鉴定 | 第114-115页 |
7.2.3 蛋白质鉴定和iTRAQ定量结果评估 | 第115-119页 |
7.2.4 MK-4耐受菌和原始菌的差异蛋白分析 | 第119-120页 |
7.2.5 差异蛋白的GO富集分析 | 第120-121页 |
7.2.6 差异表达蛋白的COG注释 | 第121-122页 |
7.2.7 差异蛋白的Pathway富集分析 | 第122-123页 |
7.2.8 差异表达蛋白亚细胞定位 | 第123页 |
7.2.9 MK-4胁迫下显著差异蛋白表达分析 | 第123-126页 |
7.3 本章小结 | 第126-128页 |
第八章 总结与展望 | 第128-130页 |
参考文献 | 第130-144页 |
致谢 | 第144-146页 |
攻读博士期间论文发表情况 | 第146页 |