| 摘要 | 第4-6页 |
| ABSTRACT | 第6-8页 |
| 第一章 综述 | 第12-21页 |
| 1.1 胚胎干细胞 | 第12-14页 |
| 1.1.1 胚胎干细胞的定义 | 第12页 |
| 1.1.2 小鼠胚胎干细胞的研究历史 | 第12-13页 |
| 1.1.3 牛胚胎干细胞的研究进展 | 第13-14页 |
| 1.2 诱导多能性干细胞 | 第14-17页 |
| 1.2.1 诱导多能干细胞概述 | 第14-16页 |
| 1.2.2 体细胞重编程过程中的间质-上皮转化 | 第16页 |
| 1.2.3 家畜诱导多能干细胞的研究进展 | 第16-17页 |
| 1.3 Sox2 在胚胎干细胞及诱导多能干细胞中的作用 | 第17-19页 |
| 1.3.1 转录因子Sox2 的结构 | 第17-18页 |
| 1.3.2 Sox2 在胚胎干细胞及早期胚胎发育中的作用 | 第18-19页 |
| 1.3.3 Sox2 在诱导多能干细胞中的作用 | 第19页 |
| 1.4 展望 | 第19-20页 |
| 1.5 研究目的与意义 | 第20-21页 |
| 第二章 牛胎儿成纤维细胞的分离与体外培养 | 第21-38页 |
| 2.1 引言 | 第21页 |
| 2.2 实验材料与设备 | 第21-24页 |
| 2.2.1 试剂和材料 | 第21-23页 |
| 2.2.2 仪器和设备 | 第23-24页 |
| 2.3 实验方法 | 第24-28页 |
| 2.3.1 牛胎儿成纤维细胞的分离与体外培养 | 第24-25页 |
| 2.3.2 牛胎儿成纤维细胞生物学特性的研究 | 第25-28页 |
| 2.3.3 牛胎儿成纤维细胞对嘌呤霉素耐受性的检测 | 第28页 |
| 2.4 实验结果 | 第28-36页 |
| 2.4.1 牛胎儿成纤维细胞体外培养 | 第28-32页 |
| 2.4.2 牛胎儿成纤维细胞生物学特性的研究 | 第32-35页 |
| 2.4.3 牛胎儿成纤维细胞对嘌呤霉素耐受性的检测 | 第35-36页 |
| 2.5 小结 | 第36页 |
| 2.6 讨论 | 第36-38页 |
| 第三章 牛Sox2 启动子真核表达载体的构建 | 第38-58页 |
| 3.1 引言 | 第38页 |
| 3.2 实验材料与设备 | 第38-39页 |
| 3.2.1 试剂和材料 | 第38-39页 |
| 3.2.2 仪器和设备 | 第39页 |
| 3.3 实验方法 | 第39-51页 |
| 3.3.1 Sox2 表达载体构建流程图 | 第39-43页 |
| 3.3.2 真核表达载体pEGFP-N2-Puro的构建 | 第43-46页 |
| 3.3.3 真核表达载体pEGFP-N2-Sox2-T2A-Puro-T2A的构建 | 第46-51页 |
| 3.4 实验结果 | 第51-57页 |
| 3.4.1 克隆Puro基因的结果 | 第51页 |
| 3.4.2 构建p GEM-T-Puro-T2A载体的结果及鉴定 | 第51-52页 |
| 3.4.3 构建p EGFP-N2-Puro载体的结果及鉴定 | 第52-53页 |
| 3.4.4 克隆牛Sox2 基因的结果 | 第53-54页 |
| 3.4.5 构建p GEM-T-Sox2-T2A的结果及鉴定 | 第54-55页 |
| 3.4.6 真核表达型重组质粒pEGFP-N2-Sox2-T2A-Puro-T2A的构建结果及鉴定 | 第55-57页 |
| 3.5 小结 | 第57页 |
| 3.6 讨论 | 第57-58页 |
| 第四章 过表达Sox2 对牛胎儿成纤维细胞重编程作用的研究 | 第58-91页 |
| 4.1 引言 | 第58-59页 |
| 4.2 实验材料与设备 | 第59-61页 |
| 4.2.1 试剂和材料 | 第59-61页 |
| 4.2.2 仪器和设备 | 第61页 |
| 4.3 实验方法 | 第61-70页 |
| 4.3.1 牛胎儿成纤维细胞的外源基因转染 | 第61-62页 |
| 4.3.2 阳性细胞筛选 | 第62-63页 |
| 4.3.3 牛胎儿成纤维细胞的诱导 | 第63页 |
| 4.3.4 诱导牛胎儿成纤维细胞重编程过程中的生物学分析 | 第63-70页 |
| 4.3.5 统计学分析 | 第70页 |
| 4.4 实验结果 | 第70-89页 |
| 4.4.1 电转染牛胎儿成纤维细胞及阳性细胞筛选结果 | 第70-72页 |
| 4.4.2 诱导牛胎儿成纤维细胞重编程过程的形态图 | 第72-74页 |
| 4.4.3 诱导牛胎儿成纤维细胞重编程过程中的生物学分析结果 | 第74-89页 |
| 4.5 小结 | 第89页 |
| 4.6 讨论 | 第89-91页 |
| 结论 | 第91-92页 |
| 参考文献 | 第92-98页 |
| 附录 | 第98-101页 |
| 1 缩略词表 | 第98-99页 |
| 2 重要溶液配制 | 第99-101页 |
| 致谢 | 第101页 |
