摘要 | 第3-5页 |
Abstract | 第5-7页 |
绪言 | 第10-17页 |
第1章 材料与方法 | 第17-41页 |
1.1 实验材料 | 第17-24页 |
1.1.1 粉尘螨 | 第17页 |
1.1.2 菌种及质粒 | 第17页 |
1.1.3 粉尘螨高通量测序 | 第17页 |
1.1.4 血清样本 | 第17-18页 |
1.1.5 主要实验试剂 | 第18-19页 |
1.1.6 主要实验仪器 | 第19-20页 |
1.1.7 主要溶液配制 | 第20-24页 |
1.2 实验方法 | 第24-41页 |
1.2.1 粉尘螨虫卵分离 | 第24-27页 |
1.2.2 粉尘螨虫卵基因组DNA测序 | 第27页 |
1.2.3 粉尘螨RNA提取及cDNA文库构建 | 第27-28页 |
1.2.4 粉尘螨转录组测序数据与WHO/IUIS过敏原数据库比对 | 第28页 |
1.2.5 从粉尘螨cDNA文库中获取目的基因 | 第28-32页 |
1.2.6 目的基因的克隆表达和纯化 | 第32-38页 |
1.2.7 ELISA检测目的蛋白IgE活性 | 第38页 |
1.2.8 目的蛋白IgE点杂交实验 | 第38-39页 |
1.2.9 WesternBlot检测目的蛋白的IgE活性 | 第39-40页 |
1.2.10 Derf23蛋白结构解析 | 第40-41页 |
第2章 结果 | 第41-55页 |
2.1 粉尘螨虫卵分离及基因组测序 | 第41-46页 |
2.1.1 粉尘螨的人工纯化培养及物种鉴定 | 第41-42页 |
2.1.2 粉尘螨虫体和粉尘螨虫卵的分离 | 第42-43页 |
2.1.3 粉尘螨虫卵基因组DNA测序 | 第43-46页 |
2.2 生物信息比对筛选粉尘螨新过敏原 | 第46-53页 |
2.2.1 粉尘螨cDNA文库构建 | 第46-47页 |
2.2.2 目的基因获取 | 第47-50页 |
2.2.3 目的蛋白表达纯化 | 第50-51页 |
2.2.4 ELISA检测蛋白与IgE结合活性 | 第51-52页 |
2.2.5 Western Blot检测蛋白与过敏患者血清IgE结合活性. | 第52-53页 |
2.3 Derf23蛋白结构解析 | 第53-55页 |
2.3.1 Derf23蛋白表达纯化 | 第53-54页 |
2.3.2 Derf23蛋白结构解析 | 第54-55页 |
第3章 讨论 | 第55-58页 |
第4章 结论 | 第58-59页 |
参考文献 | 第59-65页 |
缩略词表 | 第65-66页 |
附录1 已接收拟发表的综述 | 第66-85页 |
References | 第78-85页 |
附录2 | 第85-90页 |
附录3 | 第90-91页 |
致谢 | 第91-92页 |
攻读硕士学位期间的研究成果 | 第92页 |