| 中文摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6页 |
| 引言 | 第9-18页 |
| 1. 亲环素家族研究背景 | 第9-10页 |
| 2. 亲环素A | 第10-11页 |
| 3. 亲环素A与人类疾病 | 第11-12页 |
| 4. 细胞凋亡 | 第12-13页 |
| 5. 凋亡诱导因子 | 第13-15页 |
| 6. 双斑侧沟茧蜂及茧蜂病毒 | 第15-17页 |
| 7. 本研究的目的和意义 | 第17-18页 |
| 材料与方法 | 第18-35页 |
| 1. 材料 | 第18-22页 |
| 1.1 实验昆虫及细胞 | 第18页 |
| 1.2 菌株和载体 | 第18页 |
| 1.3 试剂 | 第18-19页 |
| 1.4 培养基 | 第19-20页 |
| 1.5 缓冲液 | 第20-22页 |
| 1.6 实验设备及仪器 | 第22页 |
| 2. 方法 | 第22-35页 |
| 2.1 斜纹夜蛾cDNA的获得 | 第22-23页 |
| 2.2 目的基因的扩增 | 第23-24页 |
| 2.3 目的基因纯化 | 第24页 |
| 2.4 目的基因与克隆载体pMD19-T-Vector连接 | 第24-25页 |
| 2.5 菌液PCR | 第25-26页 |
| 2.6 DNA序列测定 | 第26页 |
| 2.7 冻存甘油菌 | 第26页 |
| 2.8 甘油菌的复苏 | 第26页 |
| 2.9 普通质粒提取 | 第26-27页 |
| 2.10 无内毒素质粒提取 | 第27-28页 |
| 2.11 表达载体的构建 | 第28-29页 |
| 2.12 细胞复苏、传代、冻存 | 第29-30页 |
| 2.13 细胞转染(罗氏转染方法) | 第30-31页 |
| 2.14 细胞凋亡检测 | 第31页 |
| 2.15 细胞蛋白的提取 | 第31-32页 |
| 2.16 Western blot | 第32页 |
| 2.17 Elisa检测培养基中CypA蛋白表达量 | 第32页 |
| 2.18 活性氧检测 | 第32页 |
| 2.19 免疫细胞荧光定位 | 第32-33页 |
| 2.20 SpliCypA-siRNA转染 | 第33页 |
| 2.21 DNA Ladder | 第33-35页 |
| 结果 | 第35-50页 |
| 1. 斜纹夜蛾被寄生后血细胞中CypA蛋白表达增加 | 第35页 |
| 2. 斜纹夜蛾被寄生后6天血细胞发生凋亡 | 第35-36页 |
| 3. 茧蜂病毒感染Hi5细胞后,细胞中CypA蛋白的表达量增加,同时细胞发生凋亡 | 第36-38页 |
| 4. Hi5细胞过表达CypA蛋白,促进细胞发生凋亡 | 第38-39页 |
| 5. MbBV感染Hi5细胞后,CypA的沉默能够抑制细胞的凋亡 | 第39-41页 |
| 6. MbBV感染Hi5细胞后AIF表达增加 | 第41-42页 |
| 7. MbBV感染Hi5细胞后细胞质中AIF进入到细胞核 | 第42-43页 |
| 8. MbBV感染Hi5细胞后细胞质中CypA进入到细胞核 | 第43-44页 |
| 9. MbBV感染Hi5细胞后细胞质中AIF与CypA共同进入到细胞核 | 第44-45页 |
| 10. MbBV促使Hi5细胞DNA Ladder的检测 | 第45-46页 |
| 11. CypA沉默或抑制其活性能够阻止AIF从细胞质进入细胞核 | 第46-47页 |
| 12. CsA处理后的Hi5细胞经茧蜂病毒感染,CypA表达下调,凋亡细胞数减少 | 第47-50页 |
| 讨论 | 第50-54页 |
| 结论 | 第54页 |
| 总结 | 第54-55页 |
| 附录 | 第55-68页 |
| 1. 血管紧张素Ⅱ上调大鼠心肌细胞CypA的表达,然后增加ROS的产生 | 第55-58页 |
| 1.1 AngⅡ上调大鼠心肌细胞中CypA的表达,然后增加ROS的产生 | 第55-56页 |
| 1.2 抑制CypA的表达能够减少AngⅡ刺激大鼠心肌细胞产生的ROS | 第56页 |
| 1.3 ROS促进大鼠心肌细胞中CypA的表达 | 第56-57页 |
| 1.4 大鼠心肌细胞中CypA和ROS相互关系的信号通路假设 | 第57-58页 |
| 2. Cyp10表达载体构建及细胞定位 | 第58-63页 |
| 2.1 斜纹夜蛾Cyp10的生物信息学分析 | 第58-61页 |
| 2.2 斜纹夜蛾Cyp10基因的原核表达载体构建 | 第61-62页 |
| 2.3 斜纹夜蛾Cyp10基因的真核表达载体构建 | 第62-63页 |
| 2.4 亚细胞定位 | 第63页 |
| 3. CypF克隆及表达载体构建 | 第63-68页 |
| 3.1 斜纹夜蛾CyPF基因的克隆 | 第63-64页 |
| 3.2 斜纹夜蛾CyPF基因与pMD19-T Vector的连接 | 第64-65页 |
| 3.3 斜纹夜蛾CyPF基因的生物信息学分析 | 第65-66页 |
| 3.4 pET-32a-CyPF重组表达载体的构建 | 第66页 |
| 3.5 pET-32a-CyPF在原核细胞中的诱导表达 | 第66-67页 |
| 3.6 pIZT-CypF重组质粒的构建 | 第67-68页 |
| 参考文献 | 第68-75页 |
| 硕士期间完成的科研成果及获奖情况 | 第75-76页 |
| 致谢 | 第76页 |
