| 摘要 | 第3-4页 |
| abstract | 第4-5页 |
| 第1章 文献综述 | 第9-18页 |
| 1.1 放线菌素D的研究进展 | 第9-14页 |
| 1.1.1 放线菌素D产生菌株简介 | 第9-11页 |
| 1.1.2 放线菌素D的生物学活性 | 第11页 |
| 1.1.3 优化菌株发酵放线菌素D产量研究进展 | 第11-12页 |
| 1.1.4 放线菌素D的生物合成基因簇 | 第12-14页 |
| 1.2 转录组测序与转录组应用简介 | 第14-15页 |
| 1.3 铁营养胁迫及双组份系统简介 | 第15-17页 |
| 1.3.1 微生物与铁营养简介 | 第15-16页 |
| 1.3.2 双组分信号转导系统简介 | 第16-17页 |
| 1.4 论文设计思路 | 第17-18页 |
| 第2章 硫酸亚铁胁迫对放线菌素D代谢的影响 | 第18-25页 |
| 2.1 材料与方法 | 第18-21页 |
| 2.1.1 实验材料 | 第18-19页 |
| 2.1.2 实验方法 | 第19-21页 |
| 2.2 结果与分析 | 第21-24页 |
| 2.2.1 不同浓度硫酸亚铁对放线菌素D产量的影响 | 第21-22页 |
| 2.2.2 不同浓度络合剂对放线菌素D产量的影响 | 第22-24页 |
| 2.3 小结与讨论 | 第24-25页 |
| 第3章 铁胁迫下黄色链霉菌TRM45540转录组分析 | 第25-43页 |
| 3.1 材料与方法 | 第25-30页 |
| 3.1.1 菌株 | 第25页 |
| 3.1.2 主要培养基表 | 第25页 |
| 3.1.3 主要仪器和试剂 | 第25页 |
| 3.1.4 转录组测序 | 第25页 |
| 3.1.5 转录组样本的准备 | 第25-26页 |
| 3.1.6 总RNA的提取及检测 | 第26页 |
| 3.1.7 文库构建及RNA测序 | 第26-27页 |
| 3.1.8 生物信息学分析 | 第27页 |
| 3.1.9 测序数据质量评估 | 第27页 |
| 3.1.10 KEGG通路分析 | 第27-28页 |
| 3.1.11 验证试验的设计 | 第28-30页 |
| 3.1.12 放线菌素D合成途径相关基因分析 | 第30页 |
| 3.2 结果与分析 | 第30-41页 |
| 3.2.1 RNA样品质量检测结果 | 第30-31页 |
| 3.2.2 转录组测序原始数据数据分析 | 第31页 |
| 3.2.3 差异表达基因分析 | 第31-33页 |
| 3.2.4 与放线菌素D产量相关代谢通路验证 | 第33-41页 |
| 3.3 小结与结论 | 第41-43页 |
| 第4章 铁胁迫下黄色链霉菌TRM45540次生代谢产物分离与鉴定 | 第43-49页 |
| 4.1 材料与方法 | 第43-45页 |
| 4.1.1 菌株 | 第43页 |
| 4.1.2 培养基种类和成分 | 第43页 |
| 4.1.3 主要仪器和试剂 | 第43页 |
| 4.1.4 发酵产物的预处理 | 第43页 |
| 4.1.5 发酵产物分析 | 第43-44页 |
| 4.1.6 TRM45540次生代谢产物分离与鉴定 | 第44-45页 |
| 4.2 结果与分析 | 第45-48页 |
| 4.2.1 铁胁迫发酵TRM45540次生代谢产物的 HPLC 分析 | 第45-46页 |
| 4.2.2 TRM45540次生代谢产物的分离与结构鉴定 | 第46-48页 |
| 4.3 小结与讨论 | 第48-49页 |
| 第5章 强启动子A4促进黄色链霉菌高产放线菌素D | 第49-58页 |
| 5.1 材料与方法 | 第49-54页 |
| 5.1.1 菌株、质粒和培养基 | 第49页 |
| 5.1.2 主要仪器和试剂 | 第49-50页 |
| 5.1.3 DNA片段回收 | 第50页 |
| 5.1.4 大肠杆菌 Escherichia coli S17-1感受态的制备及 DNA 转化 | 第50-51页 |
| 5.1.5 质粒DNA的提取： | 第51页 |
| 5.1.6 转化子的构建 | 第51-53页 |
| 5.1.7 转化子的验证 | 第53页 |
| 5.1.8 接合子的构建 | 第53页 |
| 5.1.9 接合子的总DNA提取 | 第53-54页 |
| 5.1.10 发酵培养流程 | 第54页 |
| 5.2 结果与分析 | 第54-56页 |
| 5.2.1 PCR及酶切验证转化子pYS001的正确性 | 第54-55页 |
| 5.2.2 接合子TRM45540::pYS001的PCR验证 | 第55页 |
| 5.2.3 TRM45540::pYS001与野生型TRM45540菌株发酵比较 | 第55-56页 |
| 5.3 小结与讨论 | 第56-58页 |
| 第6章 总结与展望 | 第58-59页 |
| 参考文献 | 第59-61页 |
| 致谢 | 第61-62页 |
| 作者简介 | 第62-63页 |
| 附录 | 第63-64页 |
