| 摘要 | 第4-6页 |
| ABSTRACT | 第6-8页 |
| 第一章 绪论 | 第12-26页 |
| 1.1 概述 | 第12-14页 |
| 1.1.1 酰胺酶(Amidase) | 第12-13页 |
| 1.1.2 酰胺酶催化机制 | 第13-14页 |
| 1.2 酰胺酶催化特性和立体选择性研究进展 | 第14-21页 |
| 1.2.1 酰胺酶催化特性研究进展 | 第14-15页 |
| 1.2.2 反应温度调控生物催化对映选择性研究进展 | 第15-21页 |
| 1.3 本论文的研究内容 | 第21-22页 |
| 参考文献 | 第22-26页 |
| 第二章 Delftia tsuruhatensis ZJB-051 74酰胺酶的克隆、表达与分离纯化 | 第26-42页 |
| 2.1 引言 | 第26页 |
| 2.2 材料与方法 | 第26-35页 |
| 2.2.1 菌株与质粒 | 第26-27页 |
| 2.2.2 培养基 | 第27页 |
| 2.2.3 主要工具酶和试剂 | 第27-28页 |
| 2.2.4 主要实验仪器 | 第28-29页 |
| 2.2.5 Delftia turuhatensis ZJB-05174酰胺酶在大肠杆菌中的表达 | 第29-34页 |
| 2.2.6 酰胺酶的分离纯化 | 第34-35页 |
| 2.2.7 酰胺酶酶活测定 | 第35页 |
| 2.2.8 2,2-二甲基环丙甲酸检测方法 | 第35页 |
| 2.3 结果与讨论 | 第35-40页 |
| 2.3.1 酰胺酶基因的克隆与序列分析 | 第35-37页 |
| 2.3.2 D.tsuruhatensis酰胺酶在大肠杆菌中的表达 | 第37-39页 |
| 2.3.3 酰胺酶的分离纯化 | 第39-40页 |
| 2.4 本章小结 | 第40-41页 |
| 参考文献 | 第41-42页 |
| 第三章 酰胺酶催化特性研究 | 第42-58页 |
| 3.1 引言 | 第42页 |
| 3.2 材料与方法 | 第42-45页 |
| 3.2.1 仪器和试剂 | 第42页 |
| 3.2.2 实验方法 | 第42-45页 |
| 3.3 结果与讨论 | 第45-56页 |
| 3.3.1 酰胺酶催化苯甲酰胺动力学 | 第45页 |
| 3.3.2 酰胺酶催化蛋氨酰胺动力学 | 第45-46页 |
| 3.3.3 酰胺酶催化正丁酰胺动力学 | 第46页 |
| 3.3.4 酰胺酶催化扁桃酰胺动力学 | 第46-47页 |
| 3.3.5 酰胺酶催化烟酰胺动力学 | 第47-48页 |
| 3.3.6 酰胺酶催化2,2-二甲基环丙甲酰胺动力学 | 第48-49页 |
| 3.3.7 酰胺酶催化水解反应热失活动力学 | 第49-50页 |
| 3.3.8 酰胺酶催化酰基转移反应失活动力学 | 第50页 |
| 3.3.9 基于显色法酰胺酶催化酰基转移反应催化特性研究 | 第50-55页 |
| 3.3.10 酰胺酶酰基转移反应-水解反应的竞争性关系研究 | 第55-56页 |
| 3.4 本章小结 | 第56-57页 |
| 参考文献 | 第57-58页 |
| 第四章 酰胺酶立体选择性研究 | 第58-76页 |
| 4.1 引言 | 第58页 |
| 4.2 材料和方法 | 第58-60页 |
| 4.2.1 仪器和试剂 | 第58-59页 |
| 4.2.2 实验方法 | 第59-60页 |
| 4.3 结果与讨论 | 第60-74页 |
| 4.3.1 酰胺酶催化2,2-二甲基环丙甲酰胺立体选择性的研究 | 第60-66页 |
| 4.3.2 酰胺酶初始反应速度研究 | 第66-67页 |
| 4.3.3 酰胺酶催化扁桃酰胺立体选择性研究 | 第67-69页 |
| 4.3.4 酰胺酶转化2-苯基丁酰胺立体选择性研究 | 第69-72页 |
| 4.3.5 酰胺酶催化酰基转移反应立体选择性研究 | 第72-74页 |
| 4.4 本章小结 | 第74页 |
| 参考文献 | 第74-76页 |
| 第五章 结论与展望 | 第76-78页 |
| 5.1 结论 | 第76-77页 |
| 5.2 展望 | 第77-78页 |
| 附表 | 第78-79页 |
| 攻读硕士学位期间发表论文情况 | 第79-80页 |
| 致谢 | 第80页 |
