| 摘要 | 第8-11页 |
| Abstract | 第11-14页 |
| 第一章 引言 | 第15-24页 |
| 1.1 双瓣双瓣茉莉概述 | 第15-18页 |
| 1.1.1 双瓣茉莉的生物学特征 | 第15-16页 |
| 1.1.2 双瓣茉莉的应用价值 | 第16页 |
| 1.1.3 双瓣茉莉的繁殖 | 第16-18页 |
| 1.2 木本植物组织培养再生途径 | 第18-19页 |
| 1.2.1 器官发生途径的植株再生 | 第18-19页 |
| 1.2.2 体细胞胚胎发生途径 | 第19页 |
| 1.3 WOX转录因子的研究 | 第19-20页 |
| 1.4 植物遗传转化的研究 | 第20-22页 |
| 1.4.1 遗传转化方法 | 第21页 |
| 1.4.2 转化受体材料的选择 | 第21-22页 |
| 1.4.3 农杆菌菌株的选择 | 第22页 |
| 1.4.4 遗传转化条件的优化 | 第22页 |
| 1.5 本研究的目的意义和内容 | 第22-24页 |
| 第二章 茉莉愈伤组织诱导及分化 | 第24-39页 |
| 2.1 材料与方法 | 第24-29页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第24页 |
| 2.1.2 试剂及仪器 | 第24-26页 |
| 2.1.3 不同外植体的消毒时间筛选 | 第26页 |
| 2.1.4 愈伤组织诱导、继代增殖及分化培养基筛选 | 第26-28页 |
| 2.1.5 愈伤组织统计分析 | 第28-29页 |
| 2.1.6 冷冻切片观察愈伤组织的形成过程 | 第29页 |
| 2.2 结果与分析 | 第29-37页 |
| 2.2.1 不同消毒时间下双瓣茉莉外植体的污染率 | 第29-30页 |
| 2.2.2 不同培养基配方对茎段和叶片愈伤组织诱导率、生根率及出芽率的影响 | 第30-32页 |
| 2.2.3 茎段和叶片愈伤组织的诱导 | 第32-34页 |
| 2.2.4 冷冻切片观察愈伤组织的形成过程 | 第34-37页 |
| 2.3 讨论 | 第37-39页 |
| 第三章 茉莉胚性愈伤组织WOX基因家族成员表达特征 | 第39-48页 |
| 3.1 材料与方法 | 第41-43页 |
| 3.1.1 试验材料 | 第41页 |
| 3.1.2 试剂及仪器 | 第41页 |
| 3.1.3 总RNA的提取及cDNA第一链的合成 | 第41-42页 |
| 3.1.4 WOX基因表达量检测 | 第42-43页 |
| 3.2 结果与分析 | 第43-47页 |
| 3.2.1 茉莉的茎段、3个月愈伤组织、5个月愈伤组织的总RNA的提取及检测 | 第43-44页 |
| 3.2.2 qRT-PCR引物的质量分析 | 第44页 |
| 3.2.3 WOX基因家族成员在三个时期内的表达模式 | 第44-47页 |
| 3.3 讨论 | 第47-48页 |
| 第四章 原位杂交检测WOX基因的表达部位 | 第48-62页 |
| 4.1 材料与方法 | 第48-53页 |
| 4.1.1 实验材料 | 第48页 |
| 4.1.2 试剂及仪器 | 第48页 |
| 4.1.3 原位杂交探针片段的扩增 | 第48-50页 |
| 4.1.4 原位探针的地高辛标记 | 第50页 |
| 4.1.5 原位杂交探针的纯化 | 第50-51页 |
| 4.1.6 原位杂交探针的电泳检测 | 第51页 |
| 4.1.7 原位杂交探针的点膜检测 | 第51页 |
| 4.1.8 原位杂交材料的处理 | 第51-52页 |
| 4.1.9 原位杂交 | 第52-53页 |
| 4.2 结果与分析 | 第53-61页 |
| 4.2.1 原位杂交探针片段的扩增 | 第53-55页 |
| 4.2.2 原位探针的地高辛标记 | 第55-59页 |
| 4.2.3 原位杂交探针的点膜检测 | 第59页 |
| 4.2.4 JsWOX4和JsWOX1 mRNAs在脱分化细胞的检测 | 第59-61页 |
| 4.3 讨论 | 第61-62页 |
| 第五章 茉莉PK7WG2-JsWOX4、PK7WG2-JsWOX1植物表达载体构建 | 第62-71页 |
| 5.1 材料与方法 | 第62-66页 |
| 5.1.1 试剂、培养基、菌株 | 第62页 |
| 5.1.2 仪器 | 第62-63页 |
| 5.1.3 PCR扩增目的基因 | 第63页 |
| 5.1.4 目的片段纯化回收 | 第63-64页 |
| 5.1.5 Gateway方法构建表达载体 | 第64-65页 |
| 5.1.6 阳性克隆PCR验证 | 第65-66页 |
| 5.2 结果与分析 | 第66-69页 |
| 5.2.1 目的基因PCR产物鉴定及无胶纯化回收检测 | 第66-67页 |
| 5.2.2 入门载体构建 | 第67-68页 |
| 5.2.3 PK7WG2-JsWOX4、PK7WG2-JsWOX1植物表达载体和PK7WG2-GUS对照载体构建 | 第68-69页 |
| 5.3 讨论 | 第69-71页 |
| 第六章 茉莉愈伤组织JsWOX1/4基因转化及检测 | 第71-79页 |
| 6.1 材料与方法 | 第71-73页 |
| 6.1.1 植物材料 | 第71页 |
| 6.1.2 试剂 | 第71页 |
| 6.1.3 菌株与植物表达载体 | 第71页 |
| 6.1.4 质粒DNA转化农杆菌GV3103 | 第71-72页 |
| 6.1.5 植物表达载体转化茉莉愈伤组织 | 第72页 |
| 6.1.6 茉莉抗性愈伤组织GUS染色及GFP荧光检测 | 第72-73页 |
| 6.1.7 WOX基因在茉莉抗性愈伤组织中的表达水平检测 | 第73页 |
| 6.2 结果与分析 | 第73-78页 |
| 6.2.1 携带质粒农杆菌的阳性检测 | 第73页 |
| 6.2.2 茉莉愈伤组织抗性检测 | 第73-75页 |
| 6.2.3 茉莉愈伤组织的转化及其筛选 | 第75页 |
| 6.2.4 愈伤组织转化后GUS染色和GFP检测 | 第75页 |
| 6.2.5 愈伤组织过表达JsWOX1及JsWOX4对基因表达及形态的影响 | 第75-78页 |
| 6.3 讨论 | 第78-79页 |
| 第七章 总结与展望 | 第79-81页 |
| 7.1 主要结论 | 第79-80页 |
| 7.2 展望 | 第80-81页 |
| 参考文献 | 第81-87页 |
| 致谢 | 第87页 |
