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黏虫β-N-乙酰葡萄糖苷酶和几丁质酶cDNA的克隆及特性研究

摘要第8-10页
英文摘要第10-11页
1 前言第12-19页
    1.1 黏虫第12页
    1.2 几丁质第12-13页
        1.2.1 几丁质的结构第12-13页
        1.2.2 几丁质在昆虫体内的分布第13页
    1.3 几丁质降解酶系第13-18页
        1.3.1 β-N-乙酰葡萄糖苷酶研究进展第14-15页
        1.3.2 几丁质酶研究进展第15-18页
    1.4 研究目的与意义第18-19页
2 材料与方法第19-31页
    2.1 试验昆虫第19页
    2.2 试验仪器第19页
    2.3 试验试剂及来源第19-20页
    2.4 黏虫MsNAG和MsCHT7基因的克隆第20-27页
        2.4.1 总RNA的提取第20-21页
        2.4.2 第一链cDNA的合成第21页
        2.4.3 MsNAG基因特异性片段克隆第21-23页
        2.4.4 MsNAG基因3'-RACE试验第23页
        2.4.5 MsNAG基因5'-RACE试验第23-25页
        2.4.6 MsNAG基因全长cDNA克隆第25-26页
        2.4.7 MsCHT7基因全长cDNA克隆第26-27页
    2.5 核苷酸序列分析第27页
    2.6 氨基酸序列分析第27页
        2.6.1 氨基酸序列的结构分析第27页
        2.6.2 氨基酸序列的多重比对第27页
        2.6.3 MsNAG和MsCHT7氨基酸序列系统进化树构建第27页
    2.7 MsNAG和MsCHT7基因时空表达的研究第27-29页
        2.7.1 MsNAG和MsCHT7基因不同发育阶段表达研究第27-28页
        2.7.2 荧光定量PCR第28页
        2.7.3 MsNAG和MsCHT7基因不同组织表达研究第28-29页
    2.8 20E蜕皮激素对MsNAG和MsCHT7基因表达影响第29页
    2.9 黏虫MsNAG基因RNA干扰的研究第29-31页
        2.9.1 dsRNA的体外合成第29-30页
        2.9.2 dsRNA的纯化第30页
        2.9.3 dsRNA的注射第30-31页
3 结果与分析第31-51页
    3.1 黏虫MsNAG和MsCHT7基因的克隆与分析第31-35页
        3.1.1 MsNAG全长cDNA序列克隆与分析第31-33页
        3.1.2 MsCHT7全长cDNA序列克隆与分析第33-35页
    3.2 氨基酸序列分析第35-42页
        3.2.1 信号肽预测第35-36页
        3.2.2 N-糖基化位点的预测第36-37页
        3.2.3 氨基酸序列的同源性比对与分析第37-40页
        3.2.4 氨基酸序列系统进化分析第40-42页
    3.3 MsNAG和MsCHT7基因时空表达的研究第42-45页
        3.3.1 MsNAG和MsCHT7基因在不同发育阶段的表达第42-43页
        3.3.2 MsNAG和MsCHT7基因在不同组织的表达第43-45页
    3.4 20E蜕皮激素对MsNAG和MsCHT7基因表达影响第45-47页
    3.5 黏虫MsNAG基因的RNA干扰结果第47-51页
        3.5.1 RNA干扰对MsNAG基因表达的影响第47页
        3.5.2 RNA干扰对黏虫生长发育的影响第47-51页
4 讨论第51-56页
    4.1 MsNAG和MsCHT7基因序列分析第51-52页
        4.1.1 MsNAG基因序列分析第51页
        4.1.2 MsCHT7基因序列分析第51-52页
    4.2 MsNAG和MsCHT7基因表达特性第52-53页
        4.2.1 MsNAG基因不同发育阶段和不同组织的表达第52页
        4.2.2 MsCHT7基因不同发育阶段和不同组织的表达第52-53页
    4.3 20E蜕皮激素对基因表达的影响第53-54页
        4.3.1 20E蜕皮激素对MsNAG基因表达的影响第53页
        4.3.2 20E蜕皮激素对MsCHT7基因表达的影响第53-54页
    4.4 黏虫MsNAG基因RNA干扰第54-56页
5 结论第56-57页
致谢第57-58页
参考文献第58-67页
攻读硕士学位期间发表的学术论文第67页

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