| 摘要 | 第6-8页 |
| Abstract | 第8-9页 |
| 缩略语表 | 第10-11页 |
| 1 前言 | 第11-27页 |
| 1.1 天然产物 | 第11-12页 |
| 1.2 二硫吡咯酮类化合物的作用机制 | 第12-13页 |
| 1.3 二硫吡咯酮类化合物的产生菌 | 第13-14页 |
| 1.4 二硫吡咯酮类化合物生物合成的研究 | 第14-25页 |
| 1.4.1 生物合成基因簇的鉴定 | 第14-16页 |
| 1.4.2 结构基因的研究 | 第16-25页 |
| 1.5 本研究的目的与意义 | 第25-27页 |
| 2 材料与方法 | 第27-44页 |
| 2.1 实验材料 | 第27-40页 |
| 2.1.1 本实验所用引物 | 第27-31页 |
| 2.1.2 本实验所用质粒 | 第31-34页 |
| 2.1.3 本实验所用菌种 | 第34-37页 |
| 2.1.4 实验用培养基 | 第37-38页 |
| 2.1.5 主要生化试剂 | 第38-40页 |
| 2.2 实验方法 | 第40-44页 |
| 2.2.1 分子生物学基本操作 | 第40页 |
| 2.2.2 链霉菌培养及菌种保藏 | 第40-41页 |
| 2.2.3 提取链霉菌基因组DNA | 第41页 |
| 2.2.4 链霉菌质粒DNA的少量快速提取及检测 | 第41页 |
| 2.2.5 链霉菌的种间接合转移 | 第41-42页 |
| 2.2.6 大肠杆菌感受态的制备 | 第42页 |
| 2.2.7 大肠杆菌的转化 | 第42页 |
| 2.2.8 小量抽提大肠杆菌的质粒 | 第42-43页 |
| 2.2.9 PCR-tageting中大肠杆菌电转化感受态的制备及电转化 | 第43页 |
| 2.2.10 菌株的固体发酵及萃取检验 | 第43页 |
| 2.2.11 Thiolutin的HPLC分析 | 第43-44页 |
| 3 结果与分析 | 第44-86页 |
| 3.1 Aureothricin生物合成基因簇aut的功能分析 | 第44-46页 |
| 3.2 核心结构基因的研究 | 第46-74页 |
| 3.2.1 酰基转移酶的功能分析 | 第46-53页 |
| 3.2.2 硫酯酶基因的功能研究 | 第53-58页 |
| 3.2.3 非核糖体多肽合酶基因的功能研究 | 第58-63页 |
| 3.2.4 脱羧酶基因的功能研究 | 第63-68页 |
| 3.2.5 硫氧还原蛋白氧化还原酶基因的功能研究 | 第68-72页 |
| 3.2.6 硫氧还原酶基因敲除菌株的构建及分析 | 第72-74页 |
| 3.3 氧化还原酶基因的研究 | 第74-80页 |
| 3.3.1 氧化还原酶基因敲除突变菌株的构建 | 第74-78页 |
| 3.3.2 氧化还原酶基因敲除突变菌株的代谢产物分析 | 第78-80页 |
| 3.4 可能的转录调控基因的敲除分析 | 第80-86页 |
| 3.4.1 构建转录调控基因敲除菌株 | 第80-84页 |
| 3.4.2 转录调节基因敲除突变菌株的代谢产物分析 | 第84-86页 |
| 4 讨论与展望 | 第86-89页 |
| 参考文献 | 第89-98页 |
| 附录 | 第98-99页 |
| 致谢 | 第99页 |
