| 摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5页 |
| 英文略词与译名 | 第6-12页 |
| 第一章 绪论 | 第12-24页 |
| 1.1 研究目的与意义 | 第12-16页 |
| 1.1.1 α-半乳糖苷酶 | 第12-13页 |
| 1.1.1.1 α-半乳糖苷酶的定义 | 第12页 |
| 1.1.1.2 α-半乳糖苷酶的来源及分类 | 第12-13页 |
| 1.1.1.3 α-半乳糖苷酶的应用 | 第13页 |
| 1.1.2 β-半乳糖苷酶 | 第13-16页 |
| 1.1.2.1 β-半乳糖苷酶的定义 | 第13-14页 |
| 1.1.2.2 β-半乳糖苷酶的来源及分类 | 第14页 |
| 1.1.2.3 β-半乳糖苷酶催化机理 | 第14-15页 |
| 1.1.2.4 β-半乳糖苷酶的应用 | 第15-16页 |
| 1.2 研究现状与进展 | 第16-23页 |
| 1.2.1 α-半乳糖苷酶的研究进展 | 第16-19页 |
| 1.2.1.1 微生物α-半乳糖苷酶的研究进展 | 第16-18页 |
| 1.2.1.2 基因工程技术在真菌α-半乳糖苷酶中的研究进展 | 第18页 |
| 1.2.1.3 真菌α-半乳糖苷酶降解豆类产品中棉籽寡糖应用的研究进展 | 第18-19页 |
| 1.2.2 β-半乳糖苷酶的研究进展 | 第19-23页 |
| 1.2.2.1 微生物β-半乳糖苷酶研究进展 | 第19-21页 |
| 1.2.2.2 基因工程技术在细菌β-半乳糖苷酶中的研究进展 | 第21-22页 |
| 1.2.2.3 细菌β-半乳糖苷酶乳糖水解及低聚半乳糖合成方面的研究进展 | 第22-23页 |
| 1.3 研究目标与内容 | 第23-24页 |
| 第二章 米黑根毛霉α-半乳糖苷酶基因(RmgalB)克隆、表达及重组酶性质研究 | 第24-48页 |
| 2.1 前言 | 第24-25页 |
| 2.2 材料与方法 | 第25-33页 |
| 2.2.1 主要仪器与试剂 | 第25页 |
| 2.2.2 菌株及载体 | 第25-26页 |
| 2.2.3 培养基 | 第26页 |
| 2.2.4 米黑根毛霉总RNA的提取 | 第26-27页 |
| 2.2.5 米黑根毛霉CAU432总mRNA的提取及cDNA第一链合成 | 第27页 |
| 2.2.6 米黑根毛霉基因组DNA的提取 | 第27页 |
| 2.2.7 α-半乳糖苷酶基因(RmgalB)的克隆和序列分析 | 第27-28页 |
| 2.2.8 α-半乳糖苷酶基因(RmgalB)在P.pastoris中的表达 | 第28-30页 |
| 2.2.9 重组α-半乳糖苷酶(RmgalB)酶活力、蛋白含量测定 | 第30页 |
| 2.2.10 SDS-PAGE分析、去糖基化检测、酶谱分析及Western Blot检测 | 第30-31页 |
| 2.2.11 重组α-半乳糖苷酶(RmgalB)的分离纯化 | 第31页 |
| 2.2.12 重组α-半乳糖苷酶(RmgalB)分子量测定 | 第31页 |
| 2.2.13 重组α-半乳糖苷酶(RmgalB)最适pH及pH稳定性 | 第31-32页 |
| 2.2.14 重组α-半乳糖苷酶(RmgalB)最适温度及温度稳定性 | 第32页 |
| 2.2.15 金属离子及化合物对重组α-半乳糖苷酶(RmgalB)活性的影响 | 第32页 |
| 2.2.16 糖对重组α-半乳糖苷酶(RmgalB)的影响 | 第32页 |
| 2.2.17 重组α-半乳糖苷酶(RmgalB)蛋白酶抗性 | 第32页 |
| 2.2.18 重组α-半乳糖苷酶(RmgalB)底物特异性 | 第32-33页 |
| 2.2.19 重组α-半乳糖苷酶(RmgalB)水解特性 | 第33页 |
| 2.2.20 重组α-半乳糖苷酶(RmgalB)水解豆饼棉籽寡糖特性 | 第33页 |
| 2.3 结果与讨论 | 第33-47页 |
| 2.3.1 α-半乳糖苷酶基因(RmgalB)的克隆 | 第33-37页 |
| 2.3.2 α-半乳糖苷酶基因(RmgalB)在P.pastoris中的表达 | 第37-38页 |
| 2.3.3 重组α-半乳糖苷酶(RmgalB)的分离纯化 | 第38-40页 |
| 2.3.4 重组α-半乳糖苷酶(RmgalB)分子量测定 | 第40页 |
| 2.3.5 重组α-半乳糖苷酶(RmgalB)最适pH及pH稳定性 | 第40-41页 |
| 2.3.6 重组α-半乳糖苷酶(RmgalB)最适温度及温度稳定性 | 第41页 |
| 2.3.7 金属离子及化合物对重组α-半乳糖苷酶(RmgalB)酶活力的影响 | 第41-42页 |
| 2.3.8 糖对重组α-半乳糖苷酶(RmgalB)的影响 | 第42-43页 |
| 2.3.9 重组α-半乳糖苷酶(RmgalB)蛋白酶抗性 | 第43页 |
| 2.3.10 重组α-半乳糖苷酶(RmgalB)底物特异性 | 第43-44页 |
| 2.3.11 重组α-半乳糖苷酶(RmgalB)水解特性 | 第44-46页 |
| 2.3.12 重组α-半乳糖苷酶(RmgalB)水解豆饼中棉籽寡糖的特性 | 第46-47页 |
| 2.4 本章小结 | 第47-48页 |
| 第三章 巴伦葛兹类芽孢杆菌β-半乳糖苷酶基因(PbBgal2A)克隆、表达及重组酶性质研究 | 第48-69页 |
| 3.1 前言 | 第48页 |
| 3.2 材料与方法 | 第48-53页 |
| 3.2.1 主要仪器与试剂 | 第48-49页 |
| 3.2.2 菌株及载体 | 第49页 |
| 3.2.3 培养基 | 第49页 |
| 3.2.4 巴伦葛兹类芽孢杆菌基因组DNA的提取 | 第49-50页 |
| 3.2.5 β-半乳糖苷酶基因(PbBgal2A)的克隆 | 第50页 |
| 3.2.6 β-半乳糖苷酶基因(PbBgal2A)序列和氨基酸序列分析 | 第50页 |
| 3.2.7 β-半乳糖苷酶基因(PbBgal2A)在大肠杆菌中的表达 | 第50页 |
| 3.2.8 重组β-半乳糖苷酶(PbBgal2A)的分离纯化 | 第50-51页 |
| 3.2.9 重组β-半乳糖苷酶(PbBgal2A)酶活、蛋白浓度测定、SDS-PAGE | 第51页 |
| 3.2.10 重组β-半乳糖苷酶(PbBgal2A)分子量测定 | 第51页 |
| 3.2.11 重组β-半乳糖苷酶(PbBgal2A)最适pH及pH稳定性 | 第51页 |
| 3.2.12 重组β-半乳糖苷酶(PbBgal2A)最适温度及温度稳定性 | 第51-52页 |
| 3.2.13 金属离子及化合物对重组β-半乳糖苷酶(PbBgal2A)活性的影响 | 第52页 |
| 3.2.14 重组β-半乳糖苷酶(PbBgal2A)糖耐受性 | 第52页 |
| 3.2.15 重组β-半乳糖苷酶(PbBgal2A)底物特异性 | 第52页 |
| 3.2.16 重组β-半乳糖苷酶(PbBgal2A)乳糖水解特性 | 第52-53页 |
| 3.2.17 重组β-半乳糖苷酶(PbBgal2A) GOS合成特性 | 第53页 |
| 3.3 结果与讨论 | 第53-68页 |
| 3.3.1 重组β-半乳糖苷酶基因(PbBgal2A)的克隆与序列分析 | 第53-56页 |
| 3.3.2 重组β-半乳糖苷酶基因(PbBgal2A)在E.coli中的表达 | 第56页 |
| 3.3.3 重组β-半乳糖苷酶(PbBgal2A)的分离纯化 | 第56-57页 |
| 3.3.4 重组β-半乳糖苷酶(PbBgal2A)分子量测定 | 第57-58页 |
| 3.3.5 重组β-半乳糖苷酶(PbBgal2A)最适pH及pH稳定性 | 第58-59页 |
| 3.3.6 重组β-半乳糖苷酶(PbBgal2A)最适温度及温度稳定性 | 第59页 |
| 3.3.7 金属离子及化合物对重组(3-半乳糖苷酶（PbBgal2A)的影响 | 第59-60页 |
| 3.3.8 重组β-半乳糖苷酶(PbBgal2A)糖耐受性 | 第60-62页 |
| 3.3.9 重组β-半乳糖苷酶(PbBgal2A)底物特异性 | 第62-63页 |
| 3.3.10 重组β-半乳糖苷酶(PbBgal2A)乳糖水解特性 | 第63-64页 |
| 3.3.11 重组β-半乳糖苷酶(PbBgal2A)水解乳清中的乳糖 | 第64-65页 |
| 3.3.12 重组β-半乳糖苷酶(PbBgal2A)水解牛奶中的乳糖 | 第65-66页 |
| 3.3.13 重组β-半乳糖苷酶(PbBgal2A)合成低聚半乳糖 | 第66-68页 |
| 3.4 本章小结 | 第68-69页 |
| 第四章 巴伦葛兹类芽孢杆菌β-半乳糖苷酶基因(PbBgal42A)克隆、表达及重组酶性质研究 | 第69-85页 |
| 4.1 前言 | 第69页 |
| 4.2 材料与方法 | 第69-72页 |
| 4.2.1 主要仪器与试剂 | 第69页 |
| 4.2.2 菌株及载体 | 第69页 |
| 4.2.3 培养基 | 第69页 |
| 4.2.4 巴伦葛兹类芽孢杆菌基因组DNA的提取 | 第69页 |
| 4.2.5 β-半乳糖苷酶基因(PbBgal42A)的克隆 | 第69-70页 |
| 4.2.6 β-半乳糖苷酶基因(PbBgal42A)序列和氨基酸序列分析 | 第70页 |
| 4.2.7 β-半乳糖苷酶基因(PbBgal42A)在大肠杆菌中的表达 | 第70页 |
| 4.2.8 重组β-半乳糖苷酶(PbBgal42A)的分离纯化 | 第70-71页 |
| 4.2.9 重组β-半乳糖苷酶(PbBgal42A)酶活、蛋白含量测定和SDS-PAGE | 第71页 |
| 4.2.10 重组β-半乳糖苷酶(PbBgal42A)分子量测定 | 第71页 |
| 4.2.11 重组β-半乳糖苷酶(PbBgal42A)最适pH及pH稳定性 | 第71页 |
| 4.2.12 重组β-半乳糖苷酶(PbBgal42A)最适温度及温度稳定性 | 第71页 |
| 4.2.13 金属离子及化合物对重组β-半乳糖苷酶(PbBgal42A)活性的影响 | 第71页 |
| 4.2.14 重组β-半乳糖苷酶(PbBgal42A)糖耐受性 | 第71页 |
| 4.2.15 重组β-半乳糖苷酶(PbBgal42A)底物特异性 | 第71页 |
| 4.2.16 重组β-半乳糖苷酶(PbBgal42A)水解特性 | 第71-72页 |
| 4.2.17 重组β-半乳糖苷酶(PbBgal42A)水解β-半乳聚糖 | 第72页 |
| 4.3 结果与讨论 | 第72-84页 |
| 4.3.1 β-半乳糖苷酶基因(PbBgal42A)的克隆与序列分析 | 第72-75页 |
| 4.3.2 重组β-半乳糖苷酶基因(PbBgal42A)在E.coli中的表达 | 第75页 |
| 4.3.3 重组β-半乳糖苷酶(PbBgal42A)的分离纯化 | 第75-76页 |
| 4.3.4 重组β-半乳糖苷酶(PbBgal42A)分子量测定 | 第76-77页 |
| 4.3.5 重组β-半乳糖苷酶(PbBgal42A)最适pH及pH稳定性 | 第77-78页 |
| 4.3.6 重组β-半乳糖苷酶(PbBgal42A)最适温度及温度稳定性 | 第78页 |
| 4.3.7 金属离子及化合物对重组β-半乳糖苷酶(PbBgal42A)的影响 | 第78-79页 |
| 4.3.8 重组β-半乳糖苷酶(PbBgal42A)糖耐受性 | 第79-81页 |
| 4.3.9 重组β-半乳糖苷酶(PbBgal42A)底物特异性 | 第81-82页 |
| 4.3.10 重组β-半乳糖苷酶(PbBgal42A)乳糖水解特性 | 第82-83页 |
| 4.3.11 重组β-半乳糖苷酶(PbBgal42A)水解半乳聚糖 | 第83-84页 |
| 4.4 本章小结 | 第84-85页 |
| 第五章 结论与建议 | 第85-87页 |
| 5.1 结论 | 第85页 |
| 5.2 论文创新点 | 第85-86页 |
| 5.3 建议 | 第86-87页 |
| 参考文献 | 第87-104页 |
| 致谢 | 第104-105页 |
| 个人简历 | 第105页 |
