| 摘要 | 第7-9页 |
| ABSTRACT | 第9-10页 |
| 缩略词 | 第11-13页 |
| 第一章 文献综述 | 第13-19页 |
| 1. 蔗糖在植物体内的生理作用 | 第13页 |
| 2. 蔗糖的合成和运输 | 第13-14页 |
| 3. 蔗糖的运输的机理 | 第14-15页 |
| 4. 植物体内参与糖代谢的转运蛋白 | 第15-17页 |
| 4.1 蔗糖转运蛋白SUC(SUT) | 第15-16页 |
| 4.2 糖转运蛋白SWEET家族 | 第16-17页 |
| 3. 研究目的和意义 | 第17-19页 |
| 第二章 OsSWEET11/14基因生物信息学分析 | 第19-29页 |
| 1. 引言 | 第19页 |
| 2. 材料与方法 | 第19-20页 |
| 2.1 水稻SWEET家族基因氨基酸序列分析 | 第19-20页 |
| 2.2 水稻与拟南芥SWEET家族基因的系统进化树分析 | 第20页 |
| 2.3 OsSWEET11/14基因启动子顺式作用元件分析 | 第20页 |
| 2.4 跨膜拓扑模型分析 | 第20页 |
| 2.5 亚细胞定位的预测 | 第20页 |
| 2.6 RiceXPro的芯片预测 | 第20页 |
| 3. 结果和分析 | 第20-26页 |
| 3.1 OsSWEET11/14与家族其余基因氨基酸序列及进化树分析 | 第20-23页 |
| 3.2 OsSWEET11/14基因启动子分析 | 第23页 |
| 3.3 OsSWEET11/14跨膜拓扑模型分析 | 第23-24页 |
| 3.4 OsSWEET11/14蛋白亚细胞定位预测 | 第24-25页 |
| 3.5 RiceXPro的芯片预测 | 第25-26页 |
| 4. 讨论 | 第26-29页 |
| 第三章 OsSWEET11/14基因的克隆及亚细胞定位分析 | 第29-37页 |
| 1. 引言 | 第29页 |
| 2. 材料与方法 | 第29-32页 |
| 2.1 作物材料 | 第29页 |
| 2.2 菌种及克隆载体 | 第29-30页 |
| 2.3 RNA提取 | 第30页 |
| 2.4 cDNA的合成 | 第30页 |
| 2.5 OsSWEET11/14 cDNA全长的扩增 | 第30页 |
| 2.6 PCR产物测序 | 第30页 |
| 2.7 亚细胞定位载体的构建 | 第30-32页 |
| 2.8 农杆菌介导瞬时转染烟草 | 第32页 |
| 3. 结果与分析 | 第32-34页 |
| 3.1 OsSWEET11/14全长cDNA的扩增 | 第32-33页 |
| 3.2 OsSWEET11/14亚细胞定位分析 | 第33-34页 |
| 4. 讨论 | 第34-37页 |
| 第四章 组织细胞定位及表达模式分析 | 第37-49页 |
| 1. 前言 | 第37页 |
| 2. 材料与方法 | 第37-41页 |
| 2.1 组织定位分析 | 第37-39页 |
| 2.1.1 基因组DNA的提取 | 第37页 |
| 2.1.2 OsSWEET11/14启动子的克隆 | 第37-38页 |
| 2.1.3 组织定位载体的构建 | 第38-39页 |
| 2.1.4 转基因 | 第39页 |
| 2.1.5 对转基因阳性材料进行GUS染液染色 | 第39页 |
| 2.2 定量PCR(qRT-PCR)检测OsSWEET11/14基因在不同组织中的表达丰度 | 第39-41页 |
| 2.2.1 野生型水稻(日本晴)不同部位的采样 | 第39页 |
| 2.2.2 RNA的提取及反转录 | 第39页 |
| 2.2.3 实时荧光定量PCR的检测 | 第39-41页 |
| 3. 结果与分析 | 第41-46页 |
| 3.1 OsSWEET11/14基因启动子的克隆及载体构建 | 第41页 |
| 3.2 组织定位材料的GUS染色结果及树脂切片 | 第41-45页 |
| 3.3 定量PCR对OsSWEET11/14基因不同组织中的表达量的检测 | 第45-46页 |
| 4. 讨论 | 第46-49页 |
| 第五章 OsSWEET11/14转基因材料的鉴定和表型分析 | 第49-67页 |
| 1. 引言 | 第49页 |
| 2. 材料与方法 | 第49-54页 |
| 2.1 试验材料 | 第49页 |
| 2.2 RNAi干涉载体和CRISPR定点突变载体的构建 | 第49-53页 |
| 2.2.1 OsSWEET14基因RNAi干涉载体的构建 | 第49-51页 |
| 2.2.2 OsSWEET11/14基因CRISPR定点突变载体的构建 | 第51-53页 |
| 2.3 水稻转基因 | 第53页 |
| 2.4 转基因苗的鉴定 | 第53页 |
| 2.5 材料分析 | 第53-54页 |
| 2.5.1 花粉I2-KI染色 | 第53-54页 |
| 2.5.2 花粉的离体萌发 | 第54页 |
| 2.5.3 田间标花与采样 | 第54页 |
| 2.5.4 颖果的形态观察和结构 | 第54页 |
| 2.5.5 不同材料胚腔中液体糖含量的测定 | 第54页 |
| 2.5.6 不同材料千粒重统计 | 第54页 |
| 3. 结果与分析 | 第54-65页 |
| 3.1 OsSWEET11/14转基因苗的初步鉴定 | 第55-57页 |
| 3.1.1 RNAi沉默材料的鉴定 | 第55页 |
| 3.1.2 CRISPR敲除材料的鉴定 | 第55-57页 |
| 3.2 OsSWEET11基因CRISPR定点突变材料的田间表型 | 第57页 |
| 3.3 OsSWEET14 RNAi沉默材料和CRISPR定点敲除材料的田间表型 | 第57-58页 |
| 3.4 OsSWEET11基因CRISPR敲除后对花粉育性的影响 | 第58-60页 |
| 3.4.1 花粉的I2-KI染色 | 第59页 |
| 3.4.2 花粉的离体萌发 | 第59-60页 |
| 3.5 OsSWEET11基因敲除后对颖果形态的影响 | 第60-63页 |
| 3.6 OsSWEET11基因敲除后对颖果胚腔中蔗糖含量的影响 | 第63-64页 |
| 3.7 OsSWEET11基因敲除后对种子千粒重的影响 | 第64页 |
| 3.8 OsSWEET14基因敲除后其侧根的表型 | 第64-65页 |
| 4. 讨论 | 第65-67页 |
| 全文结论 | 第67-69页 |
| 参考文献 | 第69-73页 |
| 创新点 | 第73-75页 |
| 附录 | 第75-91页 |
| 在读期间发表的论文 | 第91-93页 |
| 致谢 | 第93页 |
