| 前言 | 第4-5页 |
| 中文摘要 | 第5-8页 |
| Abstract | 第8-11页 |
| 英文缩写词表 | 第17-20页 |
| 第一章 绪论 | 第20-46页 |
| 1.1 氧化应激 | 第20-23页 |
| 1.1.1 氧化应激概述 | 第20-21页 |
| 1.1.2 氧化应激的发生 | 第21-22页 |
| 1.1.3 氧化应激与人类疾病 | 第22页 |
| 1.1.4 氧化应激的消除 | 第22-23页 |
| 1.2 硒 | 第23-25页 |
| 1.2.1 硒的概述 | 第23页 |
| 1.2.2 硒的化学性质 | 第23-24页 |
| 1.2.3 硒的体内代谢 | 第24-25页 |
| 1.3 硒代半胱氨酸 | 第25-35页 |
| 1.3.1 硒代半胱氨酸的化学性质 | 第25-26页 |
| 1.3.2 硒代半胱氨酸的体内合成 | 第26-30页 |
| 1.3.3 硒代半胱氨酸的编码 | 第30-35页 |
| 1.4 硒蛋白 | 第35-40页 |
| 1.4.1 天然存在的硒蛋白 | 第35-36页 |
| 1.4.2 硒蛋白的获取方法 | 第36-40页 |
| 1.5 GPx | 第40-44页 |
| 1.5.1 GPx概述 | 第40页 |
| 1.5.2 GPx结构 | 第40-42页 |
| 1.5.3 含硒GPx的催化机制 | 第42-44页 |
| 1.6 立题依据及研究策略 | 第44-46页 |
| 第二章 tRNA~(UTu)用于琥珀型终止缺陷大肠杆菌中hGPx4的表达与表征 | 第46-68页 |
| 2.1 序言 | 第46-47页 |
| 2.2 实验部分 | 第47-56页 |
| 2.2.1 实验试剂 | 第47-49页 |
| 2.2.2 实验仪器 | 第49页 |
| 2.2.3 菌株与质粒 | 第49页 |
| 2.2.4 主要试剂配制 | 第49-51页 |
| 2.2.5 实验方法 | 第51-56页 |
| 2.3 实验结果 | 第56-65页 |
| 2.3.1 hGPx4基因的获取 | 第56-57页 |
| 2.3.2 pRSF-hGPx4_(46TAG)的构建 | 第57-58页 |
| 2.3.3 hGPx4的表达及纯化 | 第58-59页 |
| 2.3.4 hGPx4的活力测定 | 第59页 |
| 2.3.5 seleno-hGPx4最适pH值和温度的测定 | 第59-60页 |
| 2.3.6 seleno-hGPx4稳定性测定 | 第60页 |
| 2.3.7 seleno-hGPx4稳态动力学测定 | 第60-61页 |
| 2.3.8 seleno-hGPx4全蛋白分子量测定 | 第61-63页 |
| 2.3.9 seleno-hGPx4第46位氨基酸的鉴定 | 第63-65页 |
| 2.4 讨论 | 第65-66页 |
| 2.5 本章小结 | 第66-68页 |
| 第三章 tRNA~(UTu)的优化及鉴定 | 第68-88页 |
| 3.1 序言 | 第68-70页 |
| 3.2 实验部分 | 第70-74页 |
| 3.2.1 实验试剂 | 第70页 |
| 3.2.2 实验仪器 | 第70-71页 |
| 3.2.3 菌株和质粒 | 第71页 |
| 3.2.4 溶液配制 | 第71页 |
| 3.2.5 实验方法 | 第71-74页 |
| 3.3 实验结果 | 第74-85页 |
| 3.3.1 tRNA~(UTu)突变体的构建 | 第74-75页 |
| 3.3.2 FDH报告基因鉴定tRNA插入Sec的效率 | 第75-76页 |
| 3.3.3 不同tRNA表达seleno-hGPx4的SDS-PAGE鉴定 | 第76页 |
| 3.3.4 不同tRNA表达seleno-hGPx4的活力 | 第76-77页 |
| 3.3.5 tRNA~(UTuT6)表达seleno-hGPx4的精确分子量 | 第77-79页 |
| 3.3.6 tRNA~(UTuT6)表达seleno-hGPx4在UAG位置天然氨基酸鉴定 | 第79-80页 |
| 3.3.7 pRSF-hGPx1_(49TAG)的构建 | 第80页 |
| 3.3.8 不同tRNA表达seleno-hGPx1的活性测定 | 第80-81页 |
| 3.3.9 hGPx1的四聚体鉴定 | 第81-82页 |
| 3.3.10 seleno-hGPx1的催化动力学测定 | 第82页 |
| 3.3.11 tRNA~(UTuT6)改善Sec插入效率的潜在途径 | 第82-85页 |
| 3.4 讨论 | 第85-86页 |
| 3.5 本章小结 | 第86-88页 |
| 第四章 hGPx3及其突变体在tRNA~(UTu)优化系统中的表达与表征 | 第88-104页 |
| 4.1 序言 | 第88-89页 |
| 4.2 实验部分 | 第89-93页 |
| 4.2.1 实验试剂 | 第89页 |
| 4.2.2 实验仪器 | 第89页 |
| 4.2.3 菌株和质粒 | 第89页 |
| 4.2.4 溶液配制 | 第89页 |
| 4.2.5 实验方法 | 第89-93页 |
| 4.3 实验结果 | 第93-101页 |
| 4.3.1 表达质粒pRSF-hGPx3_(53TAG)的构建 | 第93页 |
| 4.3.2 seleno-hGPx3的SDS-PAGE鉴定与活力测定 | 第93-95页 |
| 4.3.3 seleno-hGPx3的最适pH值和温度的测定 | 第95-96页 |
| 4.3.4 seleno-hGPx3稳定性测定 | 第96-97页 |
| 4.3.5 seleno-hGPx3的稳态动力学测定 | 第97-98页 |
| 4.3.6 seleno-hGPx3突变体表达质粒的构建 | 第98页 |
| 4.3.7 seleno-hGPx3及其突变体的SDS-PAGE鉴定 | 第98-100页 |
| 4.3.8 seleno-hGPx3及其突变体中游离巯基的检测 | 第100页 |
| 4.3.9 hGPx3及其突变体的活力测定 | 第100-101页 |
| 4.3.10 seleno-hGPx3分子内二硫键形成位置分析 | 第101页 |
| 4.4 讨论 | 第101-102页 |
| 4.5 本章小结 | 第102-104页 |
| 第五章 结论与展望 | 第104-106页 |
| 5.1 全文结论 | 第104页 |
| 5.2 创新点 | 第104-105页 |
| 5.3 不足与展望 | 第105-106页 |
| 参考文献 | 第106-122页 |
| 作者简介及科研成果 | 第122-124页 |
| 致谢 | 第124页 |
